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2、对蛋白质的有关性质的认识； 掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法； 对学生所学进行综合的测试。二、教学实验原理：蛋白质含有两个以上的肽键，因此有双缩脲反应。在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫红色络 合物，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量氨基酸成分无关，因此利 用此进行比色测定蛋白质含量。在一定条件下，未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应，并于540560nm下比色，可以 通过标准蛋白质的标准曲线求出未知的蛋白质浓度，标准蛋白溶液可以用结晶的牛（或人） 血清白蛋白、卵清蛋白或酪蛋白粉末配制。除-C0NH-有此反应外，-CONH2-，-CH2-，NH2-，-CS-CS-NH
3、2，等基团亦有此反应。三、考核主要内容1、标准曲线的制作取6支干净的试管，按0-5编号，然后按下表依次加入试剂，充分混匀，在室温下放置半小 时，以管为空白，在550nm波长处测定消光值（0D）,以各管蛋白质含量（毫克）横坐标，0D 值为坐标，画出标线。编号 012345蛋白质标准液（毫升） 00.20.40.60.81.0 蒸馏水（毫升） 1.00.80.60.40.20双缩脲试剂（毫升） 4.04.04.04.04.04.02、样品测定：取样品液1.0ml，同法进行，测其OD值，对照标准曲线求得未知液蛋白质 浓度。3、分光光度计的使用：规定每组在10min以内全部完成操作（共测6支管）；同时
4、注意操 作是否规范。4、 成绩的计算：此次的实验占30%（包括平时的表现及实验报告的完成情况和完成质量），平时 的五次实验共占70%，每次实验按总分为5分为满分进行打分，总评折合成百分制。四、实验注意事项： 标准样品的浓度为：10“g/ml； 实验过程中不得过问他人，同组人可以配合进行； 实验报告在课堂上独立完成，同组人数据相同，不得抄袭他人数据，一旦发现以零分 处理； 实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做 对实验结果进行简单的分析. 资讯搜索 加入收藏 告诉好友 打印本文 关闭窗口 返回顶 部 近期相关资讯人胎球蛋白A(FETU-A)酶联免疫分析11-02操作恒温恒湿箱注意14项11-
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