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1、抗生育胶囊对成年大鼠生育调控作用物质基础研究【摘要】 目的 观察抗生育胶囊抗生育情况。方法通过应用口服中草药节育胶囊对雄性育龄大鼠进行用药前后睾丸生殖上皮细胞形态变化和血浆睾丸酮测定，观察药物抗生育情况。结果挑选出用药前生育率达到100%的雌雄大鼠，观察用药后生育情况，结果生育率明显下降，只有12%。血清睾酮用药组较对照组明显下降。结论 说明中草药抗生育胶囊生育调控作用确切，有一定研究价值。【关键词】 中草药； 生育调控； 物质基础研究当前，伴随着世界人口结构的变化和我国计划生育政策的逐渐实施，推广应用安全有效、简便经济的新型节育技术、新方法和避孕药物，开发和利用传统中草药避孕方剂，提高避孕普
2、及率、有效率和安全性，对男女生殖生育领域的研究已经逐渐成为社会发展领域科技发展重点、热点。然而我国传统方法上节育环、口服激素类避孕药等都把负担加在妇女身上，有时不适应者还有一定副作用，给夫妻生活带来许多不便。如炔诺酮类避孕药长期使用，毒副反应甚多。为了寻找有效、无毒、方便的避孕药，近10年来，很多学者进行了中草药抗生育药理研究，从中发掘出了很多有效的抗生育单味中草药，中药药理作用研究表明一些单味中药具有干扰精子生成或杀灭精子的作用，而复方中草药抗生育研究国内外都是空白，为此开展男性抗生育研究以寻求安全可靠、副作用小的不含激素的中草药复方制剂，以便更好地提高夫妻生活质量，进一步推进我国计划生育政
3、策。1 器材与方法1 节育胶囊组方及制备节育胶囊由蛇床子、乌梅、苦参、川楝子等数味中药按君臣佐使组方而成。按现代工艺提取，浓缩干燥制成胶囊备用。2 动物选取性成熟Wister大鼠40只，其中雌鼠10只，雄鼠30只，体重280330 g。自北京军事医学科学院动物养殖中心购进，本院动物房常规饲养，自由饮食，1周后用于实验。3 给药方法按雄大鼠体重灌胃给药，对照组灌服生理盐水，按体重 1 ml-1d-1灌服；用药组灌服节育胶囊，按体重1 ml-1d-1灌服。4 生育率观察用药前后雌雄以11合笼交配(21 d为1个生育周期)，计算生育率。5 组织学观察对照组与用药组分别取睾丸、附睾和输精管等组织进行大
4、体标本观察，然后将标本放入10%甲醛中固定，脱水，包埋，常规HE染色,光镜观察。6 用药前后血清睾酮测定给药前与给药后分别取大鼠尾静脉血，放免法测定血清睾丸酮的水平。7 试剂戊巴比妥钠、多聚甲醛、甲醛、血清睾丸酮试剂盒，购自解放军总院开发中心放免所。8 仪器回旋切片机、离心机、电子天平、722分光光度计、光学显微镜、Olympus 显微镜、放免仪等。2 结果光镜观察结果对照组大鼠曲精细管生精细胞排列整齐；用药组大鼠曲精细管生精细胞排列紊乱，腔内有少量脱落的生精细胞，并见多核巨噬细胞的形成，偶见变态期精子细胞头部增大深染。发现部分睾丸曲精细管上皮出现排列紊乱，层次减少，精子细胞内出现较大的空泡，
5、线粒体肿胀，变态期精子顶体膜增厚，皱缩。精子数量减少，活力下降，畸变率增高，说明节育胶囊对雄性大鼠有较强的抗生育的能力。血清睾酮测定结果见表1。用药组较正常对照组血清睾酮下降明显。表1 血清睾酮测定结果用药组与正常对照组生育率情况结果见表2。表2 两组生育率情况比较3 讨论 大鼠属哺乳动物，生育力旺盛，是研究节育药物的理想模型，且雌雄容易辨认，但近年研究表明，精子发生和成熟机理尚未完全阐明，这给精确评价睾丸功能带来了困难，所以我们选择方向主要从生殖细胞的改变和激素水平方面来研究，在一定程度上反应了其抗生育的情况。已往研究已经证实，笔者用的节育胶囊中单味药具有抑制或杀死精子的有效成分，如贾氏1用
6、川楝子油给SD大鼠两侧附睾尾部注射100 l/侧，10 d后将上述大鼠分别与有生育力雌鼠进行交配，结果用药组及对照组大鼠生育率分别为%和90%。用药组5周时组织学检查附睾及输精管均无梗阻改变、睾丸形态正常，附睾出现轻度炎症，6周时睾丸曲细精管口径缩小，FCM检查表明川楝子油可抑制睾丸生精细胞的生成，刺激非生精细胞使其合成代谢增加。故而得出附睾注射川楝子油可影响睾丸生精功能，激活睾丸间质细胞使其功能增强，产生局部免疫性不育，而不影响雄性大鼠的睾丸酮分泌及性功能。朱氏2用蛇床子浸膏粉用生理盐水配成20%40%混悬液，离心，取上清液过滤，滤液作杀精实验，结果20 s内抑制人精子的最低有效浓度是30%
7、液，每毫升精液与不同剂量的浸膏粉混合，其抑制精子活动的最低有效剂量为250300 mg。应用扫描及透射电镜对经蛇床子3作用后的人类精子结构的变化进行研究，其结果表明，其对人类精子的表面形态和超微结构均有明显的破坏和损伤作用。另外苦参碱4可通过抑制和杀死精子发挥抗生育活性；从中药乌梅5中经化学提纯、分析、确定其杀精有效成分为枸橼酸，其最有效杀精浓度为%( mg/ml)，经透射电镜观察枸橼酸杀伤精子的主要靶结构在于精子顶体、质膜、核膜及线粒体；蚤休乙醇6提取物对大鼠精子杀精有效浓度为3 mg/ml，小鼠为3 mg/ml。其粗皂苷对大鼠和小鼠精子杀精有效浓度均为30 g/ml，对人精子杀精有效浓度为
8、5001000g/ml。这些研究成果为开展中药复方研究奠定了基础。经初步观察效果肯定，说明中草药复方抗生育研究可行。此项研究为寻求安全、可靠、副作用小的非激素类天然抗生育制剂奠定了基础，对进一步推进我国计划生育政策有积极意义，具有开发前景。 【参考文献】 1贾瑞鹏，周性明，周干南. 川楝子油对雄性大鼠的抗生育作用J.南京铁道医学院学报，1996，15(1)1. 2朱淑英，韩向阳，任淑君. 中药蛇床子杀精作用的实验研究J.哈尔滨医科大学学报，1992，26(2)：155.3张英姿，韩向阳，朱淑英. 中药蛇床子对人类精子超微结构影响的研究J.哈尔滨医科大学学报，1995，29(1)22.4杜俊杰，郭仁兴，刘胜家. 苦参碱的体外杀精子作用J.西安医科大学学报，1996，17(3)：388.5王庆玉，王信胜，张玉祥. 乌梅-枸橼酸避孕栓的临床应用效果观察J.泰山医学院学报，1997，18(4)：247.6张寅恭，卢凤英. 七叶一枝花的杀精子作用J.中草药，1981，12(2)：40.
