《艾迪注射液抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《艾迪注射液抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应研究（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、艾迪注射液抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应研究潘耀振,余黎,李晓冬,柏帅【摘要】目的研究艾迪注射液抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应。方法利用小鼠体内移植瘤H22肝癌整体动物实验模型分析艾迪注射液的抑瘤率。采用双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠血清TNF-和IL-6的程度；分析艾迪注射液对胸腺和脾脏指数的影响，以碳粒廓清法分析艾迪注射液对网状内皮系统吞噬才能。结果艾迪注射液对小鼠体内移植瘤H22肝癌的抑瘤率高达30%以上，显著进步胸腺和脾脏指数、进步血中TNF-和IL-6的程度，增强内皮系统吞噬才能。结论艾迪注射液对小鼠体内移植瘤H22肝癌具有显著的抑制作用，其机制可能与改善免疫系统的才能相
2、关。【关键词】艾迪注射液抗肿瘤免疫功能Abstrat:bjetiveTinvestigatetheantiturativityandiunregulatryeffetfAiDiinjetin.ethdsInhibitinrate(IR)nturgrthandindexesfthyusandspleeneredeterinedinieithtransplantabletursfH22.ThententsfTNF-andIL-6eredetetedbyELISAinserufieithtransplantabletursfH22,andthearbnpartilelearaneasusedtass
3、aythephagytifuntinfretiul-endtheliialsyste.ResultsAiDiinjetinsignifiantlyinreasedtheindexesfthyusandspleen,andenhanedntentsfTNF-andIL-6inseru,elevatedthephagytifuntinfretiul-endtheliialsyste,anditsIRasver30%.nlusinAiDiinjetinshsptentantitureffetinviv.PrtingiunativityaybeneftheantiturehanisfAiDiinjet
4、in.Keyrds:AiDiinjetin;Antitur;Iunativity放、化疗在恶性肿瘤治疗中占重要的地位，但是在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常细胞也有较强的杀伤作用，患者往往无法承受同时带来的骨髓、免疫、胃肠道等方面的不良反响，导致生存质量严重下降。近年来，从传统中医药宝库中寻找新的抗肿瘤药物或组方逐渐成为广阔医药学科技工作者关注的问题1。艾迪注射液(简称艾迪)由人参、刺五加、黄芪和斑蝥等制备而成，具有扶正驱邪、抗肿瘤和免疫调节作用。该药物已经上市，并被广泛应用于临床，获得了较为满意的疗效。本文主要研究艾迪注射液对H22荷瘤小鼠抑制肿瘤的作用，同时研究其对荷瘤小鼠免疫功能的影响，为其临
5、床应用提供实验根底与理论指导。1材料与方法1.1细胞株小鼠肝癌H22细胞株，购自上海中科院细胞研究所。1.2样品及试剂艾迪注射液由贵州益佰制药提供，10l/只，0.3015g(生药)/l，成人50100l/次；1640培养基，Gib公司提供，批号1177845；新生小牛血清，Hylne公司提供，DQA194。小鼠TNF-，IL-6定量ELISA检测试剂盒，大连泛邦生物技术提供。1.3动物安康昆明种小鼠，体重1822g，均由南京江宁县汤山青龙山动物繁殖厂提供，动物合格证号：SXK苏20020027。1.4对小鼠腋下接种H22肿瘤2取H22肿瘤细胞株用培养液制成细胞悬液，取少许的细胞悬液加等量的0
6、.4%台朌蓝染液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞，计数后将悬液移入到25l培养瓶里，用含10%小牛血清的培养液按比例稀释至1107/l。再将培养瓶放入温度37，相对湿度100%，含5%2，95%空气的培养箱培养。给培养瓶内的细胞换液1次/d，2d传代1次。传代2次，将培养液离心得到的肿瘤细胞，再稀释成浓度为1107/l的细胞后，用无菌注射器接种到小鼠腹腔内，0.2l/只。瘤株在动物体内传代2次后，选择接种8d腹部明显膨大的动物，颈椎脱臼，固定于蜡板上，无菌操作，抽吸腹水，将6只动物的腹水混合。滴1滴腹水混合液于载玻片上，推片，瑞氏染色，镜下进展细胞分类记数，瘤细胞数95%。腹水用无菌PBS液
7、稀释至1107个/l，每鼠右腋下接种0.2l细胞。1.5分组及给药肿瘤接种24h后随机分组，即：正常对照组(等容积蒸馏水)，模型组(等容积蒸馏水)、艾迪高剂量组(9.14g/kg)、艾迪中剂量组(4.57g/kg)、艾迪低剂量组(2.29g/kg)；每组10只。尾静脉给药1次/d，给药容积为10l/kg，连续给药7d。1.6抑瘤率实验3末次给药后30in球后静脉丛取血，处死小鼠，称体重并剥离皮下瘤块，称瘤重，计算瘤指数与抑瘤率。抑瘤率(%)=(1-治疗组平均瘤重/对照组平均瘤重)100%瘤指数=瘤重g/动物体重g实验完毕时1.7荷瘤成年鼠免疫器官脏器指数分析处死动物，剖取胸腺和脾脏，按下式计算
8、脏器指数：脏器指数g/g=脏器重量(g)体重(g)101.8IL-6及TNF-分析对H22抑瘤率实验中获得血液，2500r/in离心15in，别离制备血清。按检测试剂盒说明书进展检测操作，制备一系列标准溶液后，测定吸光度，与标准曲线对照，得到含量。1.9对网状内皮系统吞噬活性的作用4末次给药后30in，尾静脉注射印度墨汁用生理盐水稀释4倍0.1l/10g，注射后立即记时，于注射后3in和13in分别用肝素处理过的玻璃毛细管经小鼠球后静脉丛取血，取0.025l的血液参加含有0.1%Na232l的试管中，混匀。于721分光光度计600n处测定每个样品的光密度值D，用0.1%Na23液做空白对照。末
9、次取血后，处死动物，取出肝脾称重，分别记录。计算去除速度的K值：K=lgD1-lgD2/t2-t1计算吞噬指数：=体重/肝重+脾重K。式中t2-t1为两次取血时间间隔；表示每克组织的吞噬活性。2结果2.1对H22荷瘤小鼠的影响实验结果提示，艾迪注射液高剂量组抑瘤率为47.5%，与模型组比拟差异显著(P0.01)，并呈一定的量-效关系。结果见表1。表1艾迪对小鼠H22的抑制作用略2.2对免疫器官的影响艾迪注射液连续给药7d，脾脏与胸腺系数明显增加，与模型组比拟差异显著，提示艾迪对荷瘤小鼠的免疫功能可能有一定的增强作用。结果见表2。表2对小鼠免疫器官脏器指数的影响略2.3对免疫细胞因子的影响荷瘤小
10、鼠IL-6和TNF-的程度显著降低，与正常对照组比拟差异显著，给予艾迪注射液后，使降低的细胞因子升高，高剂量组作用更加明显。结果见表3。表3复方斑蝥浸膏对小鼠IL-6和TNF-作用的影响略2.4对网状内皮系统吞噬作用的影响荷瘤小鼠去除速度与吞噬指数明显低于正常对照组，差异显著；连续给予艾迪注射液7d显著进步荷瘤小鼠的去除速度与吞噬指数，高剂量组与荷瘤模型组比拟，差异显著，中低剂量组具有增加的趋势。提示艾迪注射液具有增强荷瘤小鼠网状内皮系统RES对吞噬功能的作用。结果见表4。表4复方斑蝥浸膏对荷瘤小鼠的网状内皮系统吞噬活性影响略3讨论多年来的动物实验和临床观察都说明，恶性肿瘤的发生、开展都伴随有
11、机体免疫功能的降低，机体对抗肿瘤的免疫反响主要包括细胞免疫和体液免疫，两者互相配合5。目前认为在抗肿瘤细胞免疫机制中起主要作用的效应细胞包括T淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞等。胸腺是机体的中枢免疫器官，即免疫细胞产生、发育、分化、成熟的部位；脾是机体的外周淋巴器官，即成熟的淋巴细胞定居及对外来抗原发生免疫应答的场所。T细胞是介导细胞免疫应答的主要免疫细胞，它在胸腺中发育成熟，同时也有辅助和增强体液免疫应答的功能，除此之外，T细胞还有免疫调节功能，对维持机体内环境的稳定具有一定作用。异物进入体内血循环系统，可迅速为单核巨噬细胞吞噬而去除，其主要部位为肝脏和脾脏。测定血中异物的去除速度可反映网状
12、内皮系统的吞噬功能。TNF-和IL-6是由单核细胞分泌的重要的细胞因子6。TNF-主要通过对肿瘤区域血管的影响引起移植肿瘤的出血坏死，TNF-能直接作用于不同靶组织，杀伤肿瘤或诱导某些肿瘤细胞凋亡7。IL-6的抗肿瘤效应，主要通过调动机体免疫机制发挥抗肿瘤效应，也可直接或间接增强NK细胞及TL的杀瘤活性。艾迪注射液是贵州益佰制药消费的临床广泛使用的抗肿瘤中药制剂，具有清热解毒、消瘀散结之成效，用于原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤等。处方以斑蝥破血消癥，功毒蚀疮，引赤发泡为君药，发挥抗肿瘤的作用，以人参为臣药，辅助君药发挥抗肿瘤的作用以到达祛邪，同时扶助正气，刺五加、黄芪为佐使
13、，辅助臣药，扶助正气，增强人体的抵抗力。本次实验研究结果提示，艾迪注射液对小鼠移植性H22实体瘤有显著的抑瘤作用，抑瘤率47.52%以上抑瘤率实验重复3次，其中高剂量每次抑瘤率均超过30%，其余2次实验结果未在本文中列出。荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量显著降低，而艾迪注射液可以显著进步荷瘤小鼠胸腺和脾脏的指数；荷瘤小鼠去除速度的K值和吞噬指数显著降低，艾迪注射液的去除速度和吞噬指数明显高于模型组,说明艾迪注射液能进步小鼠非特异性免疫网状内皮系统的吞噬功能,这对于去除或抑制肿瘤细胞可能产生有利的作用；荷瘤小鼠细胞产生TNF-，IL-6的程度较正常小鼠显著下降，说明发生肿瘤时机体的免疫才能在下降，这可能
14、是肿瘤免疫逃避抑制的一个因素。艾迪注射液可以促进荷瘤小鼠体内TNF-，IL-6的分泌，从而进步机体免疫系统的抗肿瘤才能。综上所述,艾迪注射液具有明显的抑制荷瘤机体肿瘤生长的作用,其作用机制可能通过调节荷瘤机体异常的特异性与非特异性免疫状态而发挥抗肿瘤作用。其抗肿瘤作用机制及对肿瘤和免疫的其它影响,有待进一步研究讨论。【参考文献】1黄晓峰,周游.益气败毒汤对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究J.黑龙江中医药,2022,1:53.2韩悦.抗癌药物研究与实验技术.北京:北京医科大学和中国协和医科大学结合出版社,1997:295.3梁丽坚.化积颗粒对S180肉瘤小鼠抑瘤作用的研究J.时珍国医国药,2022,18(4):866.4张建峰,昌友权,陈光,等.红曲多糖的免疫活性研究J.食品科学,2022,29(2):391.5张秀娟,杨姗姗.半枝莲多糖体内抗肿瘤及其免疫调节作用的实验研究J.亚太传统医药,2022,4(2):54.6HuangH,PateDD,antnKG.Theiunesysteinaging:rlesfytkines,TellandNKellsJ.FrntBisi,2022,10:192.7古萃萍,张沂平.TNF-抗肿瘤作用机制新进展J.中国肿瘤,2022,16(2):102.
