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1、HE染色技术一、相关理论A1型1. 病理切片HE染色的目的是A 显示组织正常和病变的一般形态结构B 保持细胞原有的形态结构C 保留细胞内原有的特殊成分D 保留细胞内原有物质的颜色E 便于长期保存切片答：A 易X 型 2. 显微镜下HE染色组织切片颜色是A 细胞核呈蓝色B 细胞浆呈红色C 纤维和肌肉呈红色D 胶原纤维等呈蓝色E 脂类呈红色答：ABC 中二、专业知识A1型3. HE染色切片如出现核浆共染，结构不清，其主要原因是：A 组织脱水、透明、浸蜡不足B 组织脱水、透明、浸蜡过度C 组织陈旧、腐败D 分化时间过短E 胞浆染色时间过长答案：C 中X 型4.HE染色中二甲苯的作用是：A 减少组织收
2、缩，避免细胞变形B 溶解切片中的石蜡，以使染料易于与组织结合C 起透明作用，以利光线透过D 防止切片不洁污染E 脱去福尔马林色素答案：BC 易三、实践能力A2型要使苏木红对细胞核具有强的亲合力，必须在苏木红染液加入媒染剂，所谓媒染剂是指能促进染色能力，本身能与织和染料发生结合，能把组织染料联系起来的试剂。配制Harris苏木精液常用的媒染剂是：A 硫酸铁铵B 硫酸铝钾C 三氯化铁D 三氯化铬E 硫酸氢钾答案B 难A3型6.苏木素分子中并不具备发色基，它仅仅是一种容易变成染料的变色物质，要使苏木素变成真正的染料（染液）苏木红，必须使苏木素分子氧化变成酸性染料苏木红，而苏木红和铝结合形成一种带正电
3、荷的蓝色色精。问题1. 配制Harris苏木精液常用的氧化剂是：A 钾明矾B 红色氧化汞C 氯化氢D 硫酸铝E 氢氧化物答案：B 中问题2 Harris苏木精液配制的优点是A 配制麻烦B 容易形成沉淀C 染色力强D 染色力弱E 染色方法复杂答案：C 难A4型7.HE染色方法虽然是最常用、最简单的染色方法，但它的染色过程却是复杂的，每一染色步骤都关系到切片质量，其中包括固定液的选择、脱水、染色、分化、还原等步骤。问题1 病理组织切片最常用的固定液是A 乙醚乙醇固定液B 95%乙醇C Lugol液D 10%福尔马林E Carnoy固定液答案：D 易问题2 配制伊红染液时加入少量冰醋酸是作为A 氧化
4、剂B 发色剂C 分化剂D 促染剂E 媒染剂答案：D 中问题3 . HE染色分化、还原后应用乙醇的目的是：A 苏木精染料的清洁B 清洗二甲苯C 使水分进入细胞D 清洗伊红染料E 去除组织切片中水分，为二甲苯透明做准备答案：E 易问题4. HE染色核最佳的着色是：A 红色B 黄色C 黑色D 粉红色E 紫蓝色答案：E 易X 型 8. HE染液中的助色团的作用是：A 使染料分子染色度加深B 使染料分子与被染物之间产生亲和力C 使染料分子极性增强，易离子化D 使染料分子电离为负离子，易与细胞结合着色E 多为极性基团答案：ABCE 难9. HE染色细胞核染色原理是A 细胞核内的染色质主要是DNAB DNA
5、两条链上的磷酸基向解，带正电荷 C DNA呈酸性D 苏木精为碱性染料E DNA很容易与苏木精以离子键或氢键结合而被染色答案：ACDE 难10.HE染色盐酸酒精分化作用是：A 促进细胞核着色B 促进细胞还原蓝染C 为细胞核还原蓝染做准备D 去除核、胞浆、多余染料及过染E 去除细胞核过多水分答案：CD 中四、多项问题型11.HE染色方法是目前病理诊断及研究工作最常用的方法之一，其苏木素的配制方法不断的改良，涌现了许多不同的配制方法。问题1 目前最常用的苏木素液配制方法是：A 吉姆萨B 哈瑞氏C 埃利希D 迈耶E 巴氏F 瑞氏G Weigert铁苏木素答案：BCDG 中提示：苏木素分子中并不具发色团
6、和助色团，必须经过氧化后成为苏木红才具有染色功能。问题2 苏木红具有下列哪些发色团和助色团？A. N=N（偶氮基）B. N=O（亚硝基）C. C=O（酮基）D. C=C（烯烃）E. NH2（氨基）F. SO3H（磺酸基）G. OH（羟基）H. COOH（羧基）答案：ABCDEFGH 难提示：要使苏木红对细胞具有强的亲和力必须加入媒染剂：问题3 媒染剂促进染色能力是：A 本身与组织或染料发生结合B 能把组织、染料联系起来C 促进细胞核着色D 促进染色能力E 与组织发生结合，不与染料结合F 与染料发生结合，不与组织结合答案：ABC 难12. 伊红染液是HE染色方法必不可少的胞浆染液，伊红Y是煤焦油
7、染料，Y意指带黄，是最常用的染料。问题1. 伊红Y的染色原理是：A 含有一个醌型苯环的发光基B 两个形成钠盐的酸性助色基C 溶于水就能离解成带负电的色酸，即染料的有色部分D 带正电的钠离子部分，即染料的无色部分E 伊红Y是煤焦油染料F 氨基酸中氨基功能团和酸性染料结合答案：ABCDF 难提示：伊红染液配制方法比较简单，最常用的配制方法问题2 0.5%水溶性伊红液的配制方法A 伊红Y 0.5gB 蒸馏水100mlC 先用20ml蒸馏水溶解伊红D 研磨伊红粉后加20ml蒸馏水溶解伊红E 全部溶解后加入全部80ml蒸馏水F 滴加一滴冰醋酸G 染色时间1-5分钟答案：ABCDEFG 易提示：如需染色快
8、，着色佳需用醇溶性配制伊红问题3 醇溶性伊红配制方法A 伊红B 0.5gB 80%乙醇 100mlC 伊红于乙醇内搅拌D 染色时间为1-3分钟E 研磨伊红F 滤过后使用答案：ABCDEF 易13. 石蜡切片经脱蜡入水洗涤后进入Harris苏木素染液中染色，应该根据苏木素液的陈旧与新鲜度来设置染色。问题1 新配制的苏木素液不同组织的染色时间A 动物组织染色时间5分钟B 新生儿组织染色时间5分钟C 陈旧组织染色时间10分钟D 科研、教学切片染色时间20分钟E 坏死组织染色30分钟F 坏死组织染色60分钟答案：ABCD 中提示：苏木素液染色后需经盐酸酒精分化问题1 盐酸酒精分化的意义是什么？A 使细
9、胞核颜色达到适宜程度B 脱去胞质及核内多余染液C 核由深蓝色变成粉红色D 核由浅蓝色变成蓝色E 核由红色变成蓝色F 核由红色变成蓝色答案：ABC 中提示：如何控制分化过程问题3 分化过度和分化不足可出现的现象：A 分化过度，核呈褪色状，颜色灰淡B 分化过度，核轮廓模糊不清C 分化不足时胞核过深D 分化不足时，核、浆的境界不清E 分化不足时，不能辨认核膜及染色质的结构 F 分化不足时，细胞质背景仍有浅蓝色答案：ABCDEF 难石蜡组织切片的HE染色1取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4m切片。2切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min二甲苯（）5min100乙醇2min95
10、的乙醇1min80乙醇1min75乙醇1min蒸馏水洗2min。3苏木素染色5min，自来水冲洗。4盐酸乙醇分化30s（提插数下）。5自来水浸泡15min或温水（约50）5min。6置伊红液2min。7常规脱水，透明，封片：95乙醇（I）min95乙醇（）1min100乙醇（I）1min100乙醇（）1min二甲苯石碳酸（3：1）1min二甲苯（I）1min二甲苯（）1min中性树脂封固。20111205苏木素伊红（ HE）染色 第一节 染色的基本知识 第二节 苏木素伊红染色法第一节 染色的基本知识 染色术语 1 染色：使染色剂和组织细胞结合，产生特定的颜色以利观察。 2 酸性染料：有一个反应
11、性酸成分，能产生H，使其本身带有负电荷的染料。 3 碱性染料：有一个反应性碱成分,能产生OH，使其本身带有正电荷的染料。 4 中性染料：酸性染料和碱性染料的复合物，其酸碱成分都是反应性成分。 5 直接染色：染色剂和组织可直接结合着色。 6 间接染色：必须有第三种成分媒染剂参与，才能使染色剂和组织有效的结合起来。 7 进行性染色：组织成分自浅至深，当达到所需要的强度时，终止染色。 8 退行性染色：先把组织过度浓染，再用某些溶液脱去多余的染色剂而达到适当的染色程度。 9 分化：选择性的除去多余染色剂的过程。 10 蓝化：用碱性溶液（自来水、饱和碳酸锂等）处理已分化的切片，使苏木素的颜色显示最强的方
12、法。 11 媒染剂：对染料、组织细胞都有亲和力，并能把它们联系起来的一种物质。 12 促染剂：能加强染料和组织细胞的结合能力。 13 正色反应：最后目的物质所呈现的颜色与染色剂的颜色相同。 14 变色反应：最后目的物质所呈现的颜色与当初颜色不同。 15 发色团：染色剂分子中，能够显示颜色的基团。 16 助色团：染色剂分子中，能促使染色剂和组织细胞相结合的基团。 17 色原：含有发色团的苯环化合物。 18 荧光染料：在荧光显微镜下，能显示荧光的染料。19 常见染料发色团： 偶氮基 NN 亚硝基 NO 硝 基NO2 羰 基CO 烯 基CC 20常见染料助色团： 氨 基 NH2 羧 基 -COOH
13、羟 基 OH 磺酸基 SO3H染色剂 标准 具有鲜艳透明的颜色，且能与组织细胞结合，从结构上说就是必须有色原和助色团，单有色原的化合物对组织细胞无亲合力或易被褪色，具有助色团的染料才有电离的能力，能形成一种盐类染料。分类 1 按来源 A 天然染料：苏木素、胭脂红、地依红番红花、石蕊、靛蓝。 B 合成染料：甲基绿、苯胺蓝、亮绿等，种类最多。 C 无机化合物染料：硝酸银、氯化铜等。2 按用途 A 胞核染料：苏木素、胭脂红等。 B 胞浆染料：伊红、酸性品红、亮绿等。 C 脂质染料：苏丹三、油红O等。按发色团 A 亚硝基类：萘酚绿B。 B 硝基类：苦味酸。 C 偶氮类：桔黄G、苏丹类。 D 醌亚胺类：亚甲蓝、中性红。 E 山叮类：哌洛宁、伊红。 F 苯甲烷类：品红、亮绿。 G 蒽醌类：茜素、胭脂虫酸。染色中的注意事项 1 染色器皿一定要清洁。 2 注意核对染料的有效期、分子式。 3 影响染色效果的是染色剂的新旧、浓度
