《败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用【药学论文开题报告】.DOC》由会员分享，可在线阅读，更多相关《败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用【药学论文开题报告】.DOC（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用【药学论文开题报告】.DOC 药学论文-败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用 【关键词】 败酱 摘要： 目的： 探讨败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用， 并初步探讨其作用机制。 方法： 采纳混合菌液注入划伤的子宫内造成大鼠慢性盆腔炎， 将 60 只雌性 Wistar 大鼠随机分为 6 组： 假手术组、 模型组、 阳性药组和败酱复方高、 中、 低剂组， 每组 10 只， 造模后 2d 起先 ig 给药， 连续 21 d。 检测血液变学、 免疫学指标及病学形态。 结果： 模型组大鼠全血粘、 血浆粘和红细胞压积显著上升， 脾巴细胞
2、转化指数、 血清 IL2 低， IL6 上升；败酱复方(ig,1.5、 30、 60g kg-1 d-1)可同程改善上述指标； 组织形态学视察发觉败酱复方给药组大鼠慢性盆腔炎病变更明显减轻。 结论： 败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎有显著的治疗作用，其作用机制可能与改善血液循环和调整免疫功能有关。 关键词： 败酱复方； 慢性盆腔炎； 血液变学； 免疫学； 病形态学 慢性盆腔炎(chronic pelvic inflammatory disease, CPID)是妇科常见多发病， 目前西医疗法以抗生素和皮质激素为主， 对于改善症状有肯定的疗效， 但有很多反应， 且很难消退病因 1 。 中医常
3、采纳活血化瘀、 清热湿、 温经散寒和气止痛等方法， 往往有较好的疗效。 败酱复方是结合中医论研制的复方中药制剂， 多临床实践表明， 该药对诊断明确的慢性盆腔炎患者有较好的疗效， 但作用机制尚明确。 本试验采纳混合菌液致大鼠慢性盆腔炎模型， 视察该复方对慢性盆腔炎的治疗作用， 并对其作用机制进探讨。 1 试验材 11 动物和仪器 雌性 Wistar 大鼠 60 只， 8 周龄， 体重 20020g， 由武汉高校医学院动物试验中心供应， 动物许可证号 SYXK(鄂)2004004。 Stat Fax2100 酶联免疫检测仪为美国 Awareness 公司产品， YDAIV(A)型全自动血液粘仪为京
4、宏润达公司产品， 超净工作台为苏州净化公司产品。 12 药品、 试剂及菌种 败酱复方由败酱草、 连翘、 苦参、 赤芍、 黄柏、 参、 蒲公英和甘草等组成，上述药物由中国科学院武汉植物探讨所江明喜探讨员鉴定。 用适水浸泡 30分钟， 武火急煎 10 分钟， 再用文火慢煎 20 分钟即可， 由武汉高校药物非临床探讨中心制备。 妇科千片， 规格为 032g/片， 含生药 34g/片， 湖南株洲制药厂生产， 批号 200407077。 高效植物凝集素(PHA)为暨南高校暨东生物工程探讨所产品； IL2、 IL6 试剂盒由深圳晶美生物试剂有限公司供应； 四甲基偶氮唑盐(MTT)购自 Sigma 公司；
5、RPMI1640 培育液和小牛血清购自 GIBCO 公司。 菌种： 大肠杆菌、 黄色葡萄球菌、 乙型溶血性链球菌由武汉高校中南医院检验科临床分别并保种， 以 2 1 1 的比溶于无菌生盐水配成浓为 3109 ml-1 的混合细菌悬液。 2 结果 21 模型的建 2 用 03%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(50mg kg-1)， 无菌条件下于大鼠下腹部正中口 0.81cm， 并固定子宫， 用注射器机械损伤子宫内膜组织， 注入0.2ml 混合细菌悬液至子宫双侧内， 缝合口， 复原饮水， 正常清洁饲养。 假手术组操作基本同模型组， 但子宫内未注射混合菌液。 22 分组及给药 将 60 只大鼠随机分为
6、6 组， 每组 10 只， 于造模后 2d 起先 ig 给药， 连续21 天。 败酱复方低、 中、 高剂组分别 ig 败酱复方 15、 30、 60g kg-1 d-1；阳性药组 ig 妇科千片 2.8g kg-1 d-1； 假手术组及模型组 ig 等体积生盐水， 各组给药容积均为 15ml kg-1。 23 视察指标及测定方法 231 血液变学指标 末次给药 12 小时后， 各组大鼠麻醉后颈总动脉抽血测定全血粘、 血浆粘和红细胞压积。 232 免疫学指标 IL2 和 IL6 测定 取大鼠肝素抗凝血， 离心分别血浆， 按试剂盒说明书采纳双抗体夹心法测定IL2 和 IL6 浓。 脾巴细胞转化指数
7、测定 于给药 30 d 后， 无菌条件下取脾， 按文献 3 方法， 用 RPMI1640 培育液制作单细胞悬液， 并用 TrisNH4Cl 破坏红细胞， 镜检活细胞数90%后， 调整细胞悬液浓为 2106 L-1， 将细胞加入 16 孔培育板中， 每样品 2 孔， 每孔1ml，其中一孔加入细胞周期分素(PHA， 5mg L-1)， 另一孔作比照。 置 37， 5%CO2培育箱中培育 68h 后， 将细胞移入 40 孔培育板中， 每孔加入细胞悬液 100 l，并加入 5%MTT 溶液 10 l， 接着培育 4h， 每孔加 100 l 酸性异丙醇充分混匀，终止反应， 用酶联免疫检测仪作比色测定，
8、计算脾巴细胞转化指数(脾巴细胞转化指数=加 PHA 巴细胞 OD 值未加 PHA 巴细胞 OD 值)。 233 子宫病形态学视察 取大鼠双侧子宫称重后， 先肉眼视察其炎症反应及四周粘连状况， 然后将子宫置 10%福尔马溶液中固定， 片， HE 染色， 于光学显微镜下镜检， 摄片。 病视察指标及积分标准为： 宫腔粘连闭或扩张： - 无病变； + 1/3病变； + 1/32/3 病变； + 2/3以上病变。 腔壁结构病变： - 各层结构正常； + 粘膜固有层腺体结构消逝； + 肌层与粘膜层分界清；+ 分层结构清。 上皮细胞变性坏死： - 单柱状上皮； + 上皮细胞扁平或脱1/3； + 上皮细胞扁平
9、或脱 1/32/3 病变； + 全层上皮细胞变性坏死。 慢性炎细胞浸润： - 无慢性炎细胞浸润； + 小数散在或灶性且仅在粘膜固有层内； + 散在或灶性但深化肌层； + 多数散在或层状浸润并及全层。 内膜充血水肿： - 无内膜充血水肿； + 固有膜稍微充血水肿； + 明显充血水肿； + 全层充血水肿。 24 数据处 资以均值标准差(3 试验结果 31 对血液变学指标的影响 由表 1 可见， 模型组与假手术组比较全血粘、 血浆粘和红细胞压积均显著上升； 败酱复方给药组全血粘、血浆粘和红细胞压积有显著改善。 表 1 败酱复方对血液变学各指标的影响(） 注： 与假手术组相比， * P0.01； 与模
10、型组比较， # P0.05, P0.01。 32 对免疫学指标的影响 由表 2 可见， 败酱复方高、 中、 低剂组脾巴细胞转化指数和血清 IL2明显上升， IL6 显著低。 表 2 败酱复方对免疫学指标的影响(） 注： 与假手术组相比， * P0.01； 与模型组比较# P0.05, P0.01。 33 对大鼠慢性盆腔炎组织形态学的影响 假手术组： 肉眼视察子宫颜色、 硬正常， 浆膜面未见肿胀、 充血。 镜下宫壁各层结构清楚， 内膜表面上皮偶见轻增生， 腺体未见明显病变， 间质无炎症反应。 模型组： 肉眼视察大部分子宫颜色暗红， 浆膜面明显肿胀、 充血， 子宫重增加，部分动物盆腔粘连。 镜下大
11、鼠子宫粘连闭或扩张，子宫壁完全被破坏、坏死， 已失去原有正常形态， 结构紊乱， 模糊清， 代之以多成纤维细胞增生，以及炎性细胞浸润， 以中性细胞、 巴细胞、 浆细胞浸润为主； 粘膜上皮细胞部分变性坏死脱， 各层组织坏死， 形成无结构形态； 子宫腺体上皮坏死。 败酱复方组： 子宫肿胀、 充血等有同程减轻， 少数子宫腺体腔闭， 固有膜、 肌层有轻的炎性细胞浸润， 中、 高剂组成纤维细胞增生明显， 其形态结构较接近正常。 阳性药组： 子宫肿胀、 充血也有减轻， 宫壁各层结构尚清楚。 镜下可见炎症细胞浸润及子宫内膜腺上皮肯定程增生， 成纤维细胞增生明显， 个别动物子宫内膜炎症明显。 表 3 败酱复方对
12、混合菌液引起的慢性盆腔炎大鼠子宫病变更的影响()注： 与假手术组相比，* P0.01；与模型组比较# P0.05, P0.01。 4 探讨 对于慢性盆腔炎动物模型的建， 国内学者 4 较早采纳化学性烧伤致炎的方法造成大鼠子宫内膜粘连模型， 但它在感染方式、 传播途径和病变特点上与人盆腔炎有较大的差别。 所以， 我们依据文献 2 采纳混合菌液加机械损伤的方法造成贴近于人类盆腔炎的病模型， 视察败酱复方的治疗作用。 结果显示， 败酱复方给药组子宫病变较模型组明显减轻， 表明败酱复方对混合菌液所致慢性盆腔炎有明显的治疗作用。 中医学认为慢性盆腔炎病机主要为瘀、 热、 湿三者蓄积胞宫， 导致冲任气血运
13、畅， 为此我们选择血液变学指标进药物疗效的视察。 结果显示， 模型组大鼠全血粘、 血浆粘和红细胞压积显著上升， 败酱复方可同程改善上述指标。 这可能是由于本方中含有参、赤芍、蒲公英、连翘等活血化瘀成份，可改善慢性盆腔炎大鼠的血液循环， 有于炎症细胞的汲取及子宫内膜的修复。 文献还报道， 败酱草能增加网状细胞和白细胞的吞噬能， 促进抗体形成及提高血清溶菌酶的水平， 从而达到抗菌消炎的目的 5 。 IL2 是机体免疫调整网络中最重要的细胞因子之一， 可通过促进 B 细胞分、 增殖以及 NK 细胞的活性作用， 提高机体的免疫功能 6 。 IL6 与其受体系统结合可促使分化成熟的 B细胞分抗体， 促进
14、 TC、 TD 细胞增殖分化等生物学效应， 过 IL6 的产生， 会导致过于剧的免疫反应， 对机体造成损害 7 。 本探讨结果显示， 模型组大鼠腺巴细胞转化指数、 血清 IL2 低， IL6 上升， 败酱复方各剂组均可明显提高脾巴细胞转化指数、 上升 IL2， 低 IL6， 表明慢性盆腔炎的发病与机体免疫功能低下或紊乱有关。 增加体液免疫和细胞免疫功能， 使紊乱的免疫功能复原正常可能是败酱复方的作用机制之一。 参考文献 1 Grado S. Inflammation of the pelvis minor. Orv Hetil, 1998,139:21152120. 2 张小丽， 张静云， 陈瑞明， 等盆炎宁到混合菌液致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用的试验探讨中药药与临床， 2005， 21：
