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1、藻类对重金属的富集与释放设计方案作者：毛赛亚09320102同组人:马立红09320101指导教师：邹继颖单位：吉林化工学院环境科学0901班藻类对重金属的富集与释放一 实验目的1、藻类对重金属的富集能力测定。2、藻类对重金属的释放能力测定。二 实验仪器721 型分光光度计、恒温水浴摇床、低速台式离心机、电光天平、玻璃器皿（比色皿；玻璃 棒；锥形瓶；容量瓶 ；量筒；烧杯；移液管；试剂瓶；）。三 实验药品表 1 BG11 培养基配方药品名称浓度mg/L硝酸钠（NaNO3）1500磷酸氢二钾（K2HPO4）40硫酸镁（MgSO4）75氯化钙(CaCl22H2O)36柠檬酸6柠檬酸铁胺6乙二胺四乙酸
2、二钠（EDTA）1碳酸钠（Na2CO3）20氯化锰(MnCl24H2O)1.81硫酸锌(ZnSO47H2O)0.22钼酸钠(Na2MoO4 2H2O)0.39硫酸铜(Cu SO45H2O)0.079硝酸钻(CoNO36H2O)0.0493.1 主要试剂（1）丙酮。（2）1+1 硫酸溶液。（3）1+1 磷酸溶液。（4）铬标准贮备溶液：称取于120C干燥2h的重铬酸钾（优级纯）0.2829g，用水溶解，移 入1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。每毫升贮备液含O.lOOpg六价铬。（5）铬标准使用溶液：吸取5.00mL铬标准贮备溶液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线， 摇匀。每毫升标准使用
3、溶液含l.OOpg六价铬。使用当天配制。（16）二苯碳酰二肼溶液：称取二苯碳酰二肼（简称DPC, C13H14N4O） 0.2g，溶于50mL 丙酮中，加水稀释至100mL，摇匀贮于棕色瓶内，置于冰箱中保存。颜色变深后不能使用。四 试验方法4.1 标准曲线的绘制取 9 支 50ml 比色管，依次加入 0.00,0.20, 0.50，1.00 2.00, 4.00, 6.00, 8.00 和 10.00ml 铬标准使用溶液，用水稀释至标线，加入1+1硫酸溶液0.5ml和1+1磷酸溶液0.5ml，摇匀。 加入2ml显色剂溶液，摇匀。5lOmin后，于540nm波长处，用1cm或3cm比色皿，以水为
4、 参比，测定吸光度并做空白校正。以吸光度为纵坐标，相应六价铬含量为横坐标绘制标准曲 线。4.2 铬离子浓度配置称取重铬酸钾14.2mg，溶于500ml蒸馏水中，配置成含6价铬离子的母液。首先向三 角烧瓶中每个瓶加入BG11培养基50ml,然后加入含6价铬离子的母液，配置成铬离子质量 浓度为1.0、3.0、lO.OmgL-1梯度系列.4.3 富集实验将配制好的一系列含铬相应浓度的三角锥形瓶分批次放入手提式不锈钢蒸汽消毒器进行高温高压消毒30 min。冷却后，三角锥形瓶放在单人净化工作台面上在紫外光下灭菌30 min。最后，取对数生长期的藻种进行接种，将10m藻液移入每个三角锥形瓶中，摇匀。同 时
5、，取样测定初始的光密度 A0 并记录相应数据。将加有藻的含有重金属铬的三角锥形瓶放在实验室靠窗户处，在自然光照(300015000LX)和室温(2030C )下进行实验。每天定时人工摇动3次，每隔24小时取样(在每 天上午 10 点)，实验总共进行了 2 天。4.4 重金属离子浓度检测方法及富集量计算样品中铬离子质量浓度测定：吸取 10mL 藻液倒入离心管，在离心机中以 10000 r/min 的 速度离心10mi n，吸取上清液，利用分光光度计检测铬离子浓度值。以未加藻液的加药试管 为对照。每个样品及对照设2个平行。所有样品置于恒温振荡器中振荡培养(151)C。4.5 实验 4 中样品富集
6、24 h 后,取出试管测定生物富集量。其余试管离心,用注射器抽净上 清液(不要移动藻体)，加入新鲜培养液至10mL，继续振荡培养。分别于,2,5 h取样测定化合物的 释放量。五实验处理5.1 富集通过查阅资料，计算估得培养后的藻类鲜重约为8.25X10-6mg/个，藻类个数约为1.02X 108，由此可计算富集量：Q=(C0-C) X V/(1000X m)Q富集量，mg/g；C0初始浓度，卩g/mL；C溶液中的浓度，卩g/mL；V体积，mL；m藻类质量，mg。生物富集因子(BCF)是以稳态时(8h-12h) 1kg藻胞(干重)所富集的六价铬离子的质量(Ca： mg/kg)与溶液中六价铬离子的浓度(Cw： mg/L)比来表示。即：BCF (mg / kg)/(mg / L) =Ca / Cw5.2 释放释放量(mg/g)=培养液中六价铬含量/藻胞干重。 计算释放量与富集量的比值 释放时间与C/C。的关系
