弹性纤维weigerts.doc

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1、弹性纤维- WEIGERTS 间苯二酚-品红目的:是鉴别弹性纤维的一种改良染色技术。原理:由碱性品红、铁、间苯二酚结合到弹性纤维上形成蓝黑色的复合物。核主要是被铁苏木精染色,不会在弹性纤维酸性染液中被过度分化。对照:动脉或皮肤固定:10% 甲醛或任何固定良好的组织技术:石蜡切片4m。设备:蒸馏水清洗玻璃器皿,染色缸,微波炉。试剂:间苯二酚-品红染料:碱性品红 2.0 gm间苯二酚 4.0 gm蒸馏水 200.0 ml用500 ml 烧杯,将溶液煮至强烈沸腾,加入:29% 三氯化铁 25.0 ml保持沸腾2-5 min。冷却和过滤,丢弃过滤液。烤干沉淀物和滤纸。放回烧杯,加入:95% 酒精 20

2、0.0 ml小心加热。搅拌,溶解沉淀,弃去滤纸。冷却,过滤,补充95%酒精至200 ml。加入:盐酸 4.0 ml标签,签名和日期。保存期1年。Weigerts 苏木精:详见微波三色。Van Giesons 溶液:详见EVG安全:戴手套,护眼镜和白大衣,在通风场所或通风橱中使用。避免接触和吸入。盐酸:对皮肤、眼睛和呼吸道有剧烈的刺激性,影响靶器官为皮肤、眼睛、呼吸系统、生殖系统及胎儿系统。腐蚀性。碱性品红(副品红)是一种已知的致癌物质。配制溶液时戴手套,护眼镜,微过滤口罩和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。苦味酸:毒性,干燥时可能产生爆炸。碘:皮肤致敏,皮肤、眼睛和呼吸系统刺激物,腐蚀

3、性。程序:1. 常规脱蜡至蒸馏水。2. Weigerts 苏木精工作液(新鲜),10 minutes。3. 自来水冲洗。4. Scotts 蓝色漂白剂 30 seconds.5. 自来水冲洗, 5 minutes, 蒸馏水稍洗。6. 间苯二酚品红溶液:a. 微波, 30 secondsb. 室温放置1.5 hours.c. 重复一次,总计染色时间为 3 hours。保留溶液。7. 95%酒精稍洗去过多的染料。8. 自来水冲洗,蒸馏水稍洗。9. Van Gieson 溶液, 1 minute。10. 快速酒精脱水和二甲苯透明,封固。结果:弹性纤维:蓝黑色;胶原纤维:粉红色;核:蓝黑色;其他组织黄

4、色注意:1. 当微波处理间苯二酚品红溶液时,将染色缸置于含有200 ml 蒸馏水的500 ml烧杯中。可助于预防高浓度酒精沸腾溢出。2. 染色后将间苯二酚品红溶液倒回溶液瓶。参考文献:Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp 194-195,Battelle Press, OhioCrookham, J, Dapson, R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED,1991,AnatechSaf

5、ety and Compliance In the Histology Laboratory: Biohazards to Toxic Chemicals, FredenburghJ, Grizzle W., NSH Symposium, Oct. 1993, PhiladelphiaPROCEDURE CARD弹性纤维- WEIGERTS 间苯二酚-品红程序:1. 常规脱蜡至蒸馏水。2. Weigerts 苏木精工作液(新鲜),10 minutes。3. 自来水冲洗。4. Scotts 蓝色漂白剂 30 seconds.5. 自来水冲洗, 5 minutes, 蒸馏水稍洗。6. 间苯二酚品红

6、溶液:a. 微波, 30 secondsb. 室温放置,1.5 hours.c. 重复一次,总计染色时间为 3 hours。保留溶液。7. 95%酒精稍洗去过多的染料。8. 自来水冲洗,蒸馏水稍洗。9. Van Gieson 溶液, 1 minute.10. 快速酒精脱水和二甲苯透明,封固。结果:弹性纤维:蓝黑色胶原纤维:粉红色核:蓝黑色其他组织黄色注意:1. 当微波处理间苯二酚品红溶液时,将染色缸置于含有200 ml 蒸馏水的500 ml烧杯中。可助于预防高浓度酒精沸腾溢出。2. 染色后将间苯二酚品红溶液倒回溶液瓶。间苯二酚-品红染料:碱性品红 2.0 gm间苯二酚 4.0 gm蒸馏水 20

7、0.0 ml用500 ml 烧杯,将溶液煮至强烈沸腾,加入:29% 三氯化铁 25.0 ml保持沸腾2-5 min。冷却和过滤,丢弃过滤液。烤干沉淀物和滤纸。放回烧杯,加入:95% 酒精 200.0 ml小心加热。搅拌,溶解沉淀,弃去滤纸。冷却,过滤,补充95%酒精至200 ml。加入:盐酸 4.0 ml标签,签名和日期。保存期1年。Weigerts 苏木精:详见微波三色。Van Giesons 溶液:详见EVG间苯二酚-品红染料:碱性品红 2.0 gm间苯二酚 4.0 gm蒸馏水 200.0 ml用500 ml 烧杯,将溶液煮至强烈沸腾,加入:29% 三氯化铁 25.0 ml保持沸腾2-5 min。冷却和过滤,丢弃过滤液。烤干沉淀物和滤纸。放回烧杯,加入:95% 酒精 200.0 ml小心加热。搅拌,溶解沉淀,弃去滤纸。冷却,过滤,补充95%酒精至200 ml。加入:盐酸 4.0 ml标签,签名和日期。保存期1年。警告:腐蚀性,易燃性,致癌物质。日期:技师:限期:

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