检测细胞中的DNA和RNA.doc

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1、检测细胞中的DNA和RNA一、 学习任务分析检测细胞中的DNA与RNA是浙科版必修1第一章第三节中的建议活动,在实验的操作上看,本活动可以锻炼学生使用显微镜的高倍物镜的能力。同时,本活动能使学生增加对核酸的种类和性质的认识,为以后相关内容的学习打下基础。本活动将科学知识同实际操作相结合,突出了所学内容一定程度的实用应用性。二、学习者分析本活动的授课对象是高二年级的学生。从知识起点上来看,学生通过上节课的学习已经知道了一定程度的关于核酸的知识,他们自然会对“检测细胞中的DNA与RNA”的方法、过程以及原理产生兴趣,这正是促成学生进行本节活动的兴奋点。此外,学生通过初中实验已掌握了显微镜的运用方法

2、,这为本活动的开展奠定了知识基础。而从认知思维起点上看,高二学生的思维方式已经开始从具象思维转向抽象思维,具备了一定的理论分析能力和逻辑思维能力。所以本活动应注重学生与教师的双向交流,引导学生积极思考,锻炼他们获取信息、从现象发掘本质、建构知识体系的能力。三、教学重难点1、教学重点:实验原理、显微镜的使用2、教学难点:甲基绿使DNA呈绿色,派洛宁使RNA呈红色。四、教学目标1、知识与技能目标: (1)能够分析说明DNA和RNA在结构上的不同点 (2)熟悉显微镜的使用方法2、过程与方法目标: (1)掌握制作装片的方法 (2)能够使用试剂对材料进行染色3、 情感态度和价值观目标: 在动手能力方面上

3、得到培养,在学习态度上得以提升而变得更加积极、乐观。五、 教学过程1、实验原理分析(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。(2)甲基绿和派洛宁两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而派洛宁对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、派洛宁的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。(3)盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。2、实验材料用具(1)材料:新鲜动物(蛙)肝脏。(2)用具:恒温水浴,100mL的烧杯,

4、1000mL烧杯,量筒,滴管,天平,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜。(3)试剂及配制方法 试剂:1mol/L的盐酸,蒸馏水(盛于滴瓶内),派洛宁甲基绿混装粉,乙酸钠,乙酸。如果实验室没有派洛宁甲基绿混装粉,可以分别用甲基绿和派洛宁G,然后按染色剂A液配制中的方法2进行配制。 染色剂的配制染色剂A液的两种配制方法方法1:取派洛宁甲基绿粉1g,加入到100mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。方法2:取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中,取派洛宁G 5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL派洛宁溶液加入到16mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用。染色剂B液的配制方法

5、:B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL备用;再取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)。染色剂的配制染色剂是由A液和B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合,就是实验中所用的甲基绿-派洛宁染液。应该注意的是该试剂应现用现配。3、实验步骤(1)涂片 取新鲜的动物肝脏切开,将其断面在一干净的载玻片中央涂抹数下,晾干。(2)水解 将盛有60mL 1mol/L盐酸溶液的小烧杯,置于30的恒温水浴中。将晾干的载玻片倾斜着浸没于30的盐

6、酸溶液中水解10min(温度适中控制在301)。(3)漂洗 用镊子取出涂血的载玻片,用滴管向稍微倾斜的载玻片上加水,让水从一端缓慢流过血膜,这样反复冲洗2-3次。(4)染色 用吸水纸吸去血膜周围的水分,再将载玻片放入盛有60mL甲基绿-派洛宁染液的烧杯中,冲洗残存的染液,再次用吸水纸吸干血膜周围的水分。(5)观察 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。 在显微镜下,含RNA的区域被染成红色,而含DNA的区域被染成蓝绿色或淡绿色。注意RNA、DNA在细胞中的分布。4、注意事项(1)材料的选择

7、选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; 常用的观察材料:新鲜的动物肝脏(2)取材要点 动物肝脏要新鲜。(3)冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。(4)换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。5、实验相关知识(1)加入1mol/L盐酸进行水解的目的是:改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞;使染色剂中的DNA与蛋白质分离;杀死细胞,有利于DNA与染色剂结合。(2)为什么要进行水解:甲基绿和派洛宁不是活细胞所需要的物质,正常情况下,无法穿过细胞膜进入细胞内,因此实验中使用盐酸破坏细胞膜,增加细胞膜的通透性,以方便染色剂进入细胞。同时,盐酸还能使细胞中染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与甲基绿染色剂结合。(3)将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有30温水的大烧杯中保温。水浴加热的目的是使小烧杯受热均匀。六、形成性评价 将对比自己做出来的实验结果和理想中的实验结果,发现其中的差异并分析产生差异的原因。

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