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1、饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）和木质素（ADL）的测定实验方案实验原理纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）。植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。 2 所需试剂 十二烷基硫酸钠溶液（中性洗涤剂）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）、四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）、磷酸氢二钠、乙二醇乙醚、十六烷基三甲基溴化铵、硫酸、丙酮，无水亚硫酸钠，十氢化萘 ，95%乙醇3 所需仪器分析天
2、平：感量0.0001 g、容量瓶、锥形瓶、滴定管、移液管、洗瓶、洗耳球、滴管、量筒。 粗纤维测定仪（SLQ-6）、古氏坩埚、干燥器（以氯化钙或变色硅胶为干燥剂）、酸度计4 试剂的配制4.1 30g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。称取18.61g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）和6.81g四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）和10mL已二醇乙醚同放入1000mL烧杯中，加入少量水加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠。称取11.9644g磷酸氢二钠（含12水），置于另一烧杯中，加入少量水，微微加热溶解后倾入第一个烧杯，稀释至1000mL。此溶液PH在6.9-7.1 .4.2 20g/
3、L十六烷三甲基溴化铵（酸性洗涤剂）溶液。称取20g十六烷三甲基溴化铵，溶于1000mL已经标定过的0.5mol/L硫酸溶液中，搅动溶解，必要时过滤。4.3 0.5 mol/L硫酸溶液。称取49g（27.87mL）浓硫酸，慢慢加入已有500mL水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶中，定容，标定。（4.3.1标定硫酸的方法：称量1.6g在270-300灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，称准至0.0001g。溶解50mL水中，加入10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液有绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。4.3.2标定硫酸过程中的主要影
4、响因素 ）4.5 72%硫酸。取734.69mL浓硫酸，倒入200mL水中，冷却后稀释至1000mL。4.6其他试剂。丙酮，无水硫酸钠，十氢化萘，95%的硫酸5操作步骤5.1 NDF的测定 5.1.1 准确称取40目筛饲料样品0.5-1.0g（m）,置粗纤维测定仪（SLQ-6）坩埚中，加入中性洗涤剂溶液100ml和2ml十氢化萘即萘烷和0.5g无水亚硫酸钠。5.1.2 打开冷凝装置，立即置于电炉上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.1.3 煮沸完毕，冷却10min，抽滤，并用沸水冲洗三次，再抽滤，再用95%的乙醇20mL冲洗一次，抽滤，再用20ml丙酮冲洗，抽滤。 5.1.4 取下坩埚，放
5、置通风橱中挥发完残余有机溶剂后，105烘干，称至恒重（m2）5.2ADF的测定 5.2.1 准确称取样品，0.5-1.0g（m）,置坩埚中，加入酸性洗涤剂溶液100ml和数滴十氢化萘。5.2.2 打开冷凝装置，立即置于电炉上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.2.3用已知质量的玻璃坩埚（m3）,在抽滤瓶上抽滤残渣，并用沸水洗涤残渣，抽滤反复3次，并用（蓝色）石蕊试纸检测滤液是否呈现中性，然后用少量丙酮洗涤残渣，反复冲洗至滤液无色为止，抽净全部丙酮。 5.2.4取下坩埚，放置通风橱中挥发完残余有机溶剂后，105烘干，称至恒重（m2） 5.3ADL的测定将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，使得酸性洗
6、涤纤维被淹没，每隔1h搅拌一次，在20消化3h后过滤，并冲洗至中性。将坩埚放置105的烘箱中烘2h后m4,将残渣烘干并灼烧灰分后（500马沸炉中灼烧2h或坩埚中无炭粒为止，取出玻璃坩埚，放入干燥器中冷却至恒重）即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分m5的含量。6 计算 W(NDF)：=(m2-m1)/m W(ADF) =(m3-m2)/mW(ADL) =(m4-m5)/m 七、试剂总用量预算表用量试剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）18.61*50=930.5g四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）6.81*50=304.5g十二烷基硫酸钠溶液30*500=15000g无水磷酸氢二钠4.65*
7、50=232.5g十六烷三甲基溴化铵20*50=1000g94.766%硫酸28*50=1400mL72%硫酸734.69*50=36734.5mL总硫酸38134.5mL十氢化萘(2+2)*500=2500mL无水亚硫酸钠0.5*500=250g丙酮(20+20)*500=2000mL基准无水碳酸钠1.6*20=32g中性洗涤纤维 50000mL酸性洗涤纤维50000mL已二醇乙醚500mL参考文献1 王佩之,许冠南.一种有待开发的稀有蔬菜四棱豆J.中国蔬菜,1991,(3):3032.2 陈东明,艾辛,全妙华,等.四棱豆在湖南怀化地区的引种试J.作物研究,2005,19(1):3537.3
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