酵母培养基的配置 (2).doc

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1、(一)麦芽汁培养基的配制 1培养基成分 新鲜麦芽汁一般为10-15波林。 2配制方法 (1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。 (2)取一份麦芽粉加四份水,在65水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。 (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。 (4)用波美比重计检测糖化液

2、中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至64。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。 (5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2琼脂,加热融化,补充失水。 (6)分装、加塞、包扎。 (7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (二)马铃薯葡萄糖培养基的配制 1、培养基成分 马铃薯 20g 葡萄糖 2 g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2配制方法 (1)配制20马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20马铃薯浸汁,贮

3、存备用。 (2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。 (3)分装、加塞、包扎。 (4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制 1培养基成分 黄豆芽 10g 葡萄糖 5g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2配制方法 (1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10豆芽汁。 (2)配制时,按每100 m1 10豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。 (3)分装、加塞、包扎。 (4)高压蒸汽灭

4、菌 100 Pa灭菌20 min。 (四)察氏(czapck)培养基的配制 1培养基成分 蔗糖 3g NaN03 0.3g K2HP04 0.1g KCl 0.05g MgSO47H2O 0.05 g FeS04 0.001 g 琼脂 1.5-2g 蒸馏水 100ml 自然pH 2配制方法 (1)称量及溶化 量取所需水量约23左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1的FeS04溶液。 (2)定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。 (3)加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补

5、足失水。 (4)分装、加塞、包扎。 (5)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 YPD培养基YPD 或YPED,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基 用于酵母菌的培养 配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉 配制方法: 1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加

6、入20g琼脂粉 2 高压 121度 20min 3 加入100ml 10Dextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入) 注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合。 YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD萨市(Sabourauds)培养基蛋白胨 10克 琼脂 20克 麦芽糖 40克 水 1000毫升 先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。 本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

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