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1、 果蔬中抗坏血酸含量的测定摘要：分别采用，二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法和紫外分光光度法测定果蔬中抗坏血酸的含量，通过对比研究，优选出测定果蔬中抗坏血酸含量的方法为分光光度法。关键词：抗坏血酸；果蔬；测定方法 ， ， （ ， ， ， ， ）： t s ere ， ， ， and ， comparative ： ； ； method抗坏血酸（ a，）也称，是维持人体健康的一种重要物质。人体所需的大多数由水果、蔬菜及食品供给。人体长期缺乏抗坏血酸会得坏血病、关节疼痛、牙龈出血、发炎、感染、身体骨骼易损伤且不易愈合等疾病，而过量摄入不仅不能抵御疾病，而且还可能缩短寿命。这是因为能够破坏自由基，这种破坏
2、会导致早衰和癌症。因此，对果蔬中抗坏血酸含量的定量分析具有重要的意义。含量的测定方法很多。一般有，二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法、紫外分光光度法、库仑分析法、原子分光光度法和碘量法等。本研究采用，二氯靛酚钠法、高锰酸钾滴定法和紫外分光光度法测定果蔬中抗坏血酸的含量，然后通过对比分析，确定测定果蔬中抗坏血酸含量的最优方法。 材料与方法 仪器与试剂紫外分光光度计（美国安捷伦）；岛津分析天平（日本岛津）；循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；微量移液器（上海安亨微量进样器厂）。（，下同）偏磷酸溶液；标准抗坏血酸； 溶液；高锰酸钾；，二氯靛酚钠。以上试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。 样品的处理
3、选取新鲜的西红柿和黄瓜洗净、擦干，称取约 至研钵中，捣碎，加入 偏磷酸浸提剂，迅速捣成匀浆，用纱布过滤至烧杯中，然后抽滤。取滤液转移至 容量瓶中，用浸提剂定容，备用。 样品的检测 紫分光光度法 校准曲线的绘制：配制一系列抗坏血酸标准溶液，浓度分别为、 。以偏磷酸为参比，在波长 处用石英皿测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光度。以吸光度值（）对抗坏血酸浓度（）绘制校准曲线。线性回归方程 ，r= 。结果表明，抗坏血酸浓度在 范围内吸光度值与浓度之间呈良好的线性关系。样液的测定：用偏磷酸为参比，在波长 处测定样液的吸光度。将待测样品的吸光度值代入回归方程，则可得样品中抗坏血酸的浓度，进而可按式（）计算出样
4、品中抗坏血酸的含量（ ）。 （）其中：为样品重量，；为稀释倍数；为提取液体积，。 高锰酸钾法 配制标准溶液：称取 溶于 水中，煮沸 ，冷却，贮存于棕色试剂瓶中，浓度为 ；用标定后为 。样液的测定：移取配制好的试样溶液 于 锥形瓶中，加入 的溶液， 硫酸溶液，摇匀后在棕色滴定管中用高锰酸钾标准溶液滴定至呈微红色， 不退色即为终点。两者的反应方程式：o，可按式（）计算出样品中抗坏血酸的含量（ ）。 （）式中：、分别为标准溶液的浓度和滴定用去的体积；为抗坏血酸的摩尔质量。 ，二氯靛酚钠法 测定，二氯靛酚钠的滴定度：吸取 ，二氯靛酚溶液于 锥形瓶中，摇匀，用浓度为 抗坏血酸标准溶液滴定至溶液呈粉红色
5、不退色为止。按式（）计算其滴定度： （）式中：为抗坏血酸的浓度，；为吸取抗坏血酸的体积，；为滴定抗坏血酸溶液所用，二氯靛酚溶液的体积，。样品中抗坏血酸含量的测定：移取样品提取液 于锥形瓶中，立即从滴定管中滴入，二氯靛酚钠溶液，直到溶液变色后 不变色即为滴定终点，到达滴定终点时，样品溶液变为粉红色。平行测定次。由，二氯靛酚钠溶液的体积可按式（）计算出样品中抗坏血酸的含量（ ）。 （）式中：为滴定样液时消耗染料溶液的体积，；为，二氯靛酚染料滴定度，。 结果与分析 实验条件的选择 紫外分光光度法 测定波长的选择：是烯醇化合物，在可见区无吸收，在紫外区有吸收。分别对不同浓度的与试剂空白溶液在 波长范围
6、内进行扫描，最大吸收峰在 。因此，选 作为测量波长。溶剂的选择：一般用偏磷酸、草酸作为提取剂。但由于草酸在波长 处有非常强的吸收，不能作为的提取液。因此，本实验选择偏磷酸作为分光光度法的溶剂。 高锰酸钾法 溶液的酸度：m在酸性溶液中具有较强的氧化性，所以其测定宜在酸性溶液中进行。由于具有还原性，也能与高锰酸钾作用；而具有氧化性，可氧化抗坏血酸，所以不使用和而用稀。干扰离子的影响：试液中如有等还原性离子存在，不仅能加快抗坏血酸被空气中的氧气所氧化而分解的速度，而且也要消耗一定量的标准溶液而造成滴定误差。所以加入溶液予以掩蔽而消除干扰。 样品测定结果 不同方法的对比 将紫外分光光度法、高锰酸钾法、
7、，二氯靛酚滴定法进行对比，这种方法采用相同的前处理溶液，从表可以看出，用高锰酸钾法测的值明显高于紫外分光光度法和，二氯靛酚钠法的值。这表明种方法均可用于快速测定果蔬中抗坏血酸的含量，但紫外分光光度法和，二氯靛酚滴定法的准确度要优于高锰酸钾法，而对于深色泽样品的测定，紫外分光光度法由于不受颜色干扰和其他还原性物质的影响而优于氧化还原滴定法，因此更加准确、可靠，适用范围更广。 紫外分光光度法的检出限 连续测定空白吸光值次，吸光度值见表，在置信度时，取置信系数，按上述线性方程，其校准曲线斜率为 ，则相对应的分析物浓度作为方程的检出限 。 紫外分光光度法的准确度 为验证分析结果的可靠性，了解试样中有无
8、干扰物质存在，应用本法对样品进行加标回收试验，结果见表，可得出，该方法回收率在之间，平均回收率为，共存物质造成干扰较小。 紫外分光光度法的精密度 取样品平行测定次，结果见表，从测定结果可以看出，平行样测定有较好的重现性。 小结与讨论利用抗坏血酸对紫外产生吸收的特性和较强的还原性，采用种不同方法测定果蔬中抗坏血酸的含量。实验结果表明，紫外分光光度法简单易行、结果准确、灵敏度高、检出限低，值得推广应用。参考文献： 阎树刚，韩 涛果蔬及其制品中测定方法评价中国农学通报，（）： 羊金梅，覃超凤，余瑞林，等分光光度法测定梨和苹果中的含量安徽医药，（）：205-206 李秋菊，王亚红，刘秀萍 维生素的测定
9、方法 太原师范学院学报，4（）：89-91 李志英，薛志伟，张海容 用荧光光度法测定饮料中的含量商丘师范学院学报，（）： 杨芳芳抗坏血酸的测定方法综述甘肃科技纵横，（）： 谢志鹏，肖友军，汪敬武 流动注射抑制电化学发光法测定分析试验室，（）： 大连轻工业学院食品分析北京：中国轻工业出版社， 夏 静，刘琼霞双光束剩余染料差减比色法测定蔬菜中的抗坏血酸含量安徽农业科学，（）： 中国卫生部药典委员会中国药典：第二部北京：化学工业出版社， 库尔班江，赛丽曼碘量法测定水果蔬菜中的含量伊犁师范学院学报，（）：2 苑乃香，宣亚文，谢东坡，等 ，二氯靛酚钠测定蔬菜中抗坏血酸的含量安徽农业科学，（）： 郑京平水果、蔬菜中维生素含量的测定紫外分光光度快速测定方法探讨光谱实验室，（）： 王建国，王端斌高锰酸钾滴定法快速测定蔬菜中抗坏血酸含量食品科学，（）：
