《用高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《用高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸.doc(3页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、用高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸中国质量新闻网2010-05-18 14:47:26 脱氢乙酸及其钠盐是食品中常用的防腐剂,具有良好的防腐效果。对霉菌和酵母抑制能力强,目前广泛用于食品加工行业,尤其是糕点、果汁和酱菜。试验表明,脱氢乙酸对人体健康有一定的影响,有可能导致肾结石等问题。 GB/T5009.121-2003中介绍了用气相色谱法测定脱氧乙酸的测定方法。该方法在样品的前处理中,样品酸化后,用乙醚提取萃取结束后用无水硫酸钠脱水30分钟,样品浓缩后,用丙酮定容。其前处理、净化、分离过程复杂、繁琐、冗长,容易造成样品中测定成分损失,净化不彻底,且采用试剂毒性大等问题,从而影响测定的安全性和
2、准确度。笔者参照各类文献资料根据脱氢乙酸在食品中的作用原理,将样品提取净化,用高效液相色谱法测其含量,经反复实践证明是切实可行的。 1测定方法 1.1试剂 除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682-2008规定的一级水。 (1)甲醇色谱纯。 (2)乙酸铵溶液:0.02molL。称取1.54g乙酸铵,用水溶解、定容至1L。 (3)2%氢氧化钠溶液。 (4)脱氢乙酸标准储备液:1mg/mL。准确称取100mg脱氢乙酸标准品,用2%的氢氧化钠溶解,用水定容至100mL,配成1mg/mL的标准储备液,4保存。 1.2仪器 高效液相色谱仪(带紫外检测器)。 1.3分析步骤 (1)样品处理
3、准确称取混合的样品2.00克5.00克,置于容量瓶中,加入水10毫升(视样品状况,若需沉淀蛋白可加入3毫升22%乙酸锌和10.6%亚铁氰化钾,震荡,充分沉淀蛋白),用NaoH溶液调PH值至78,加水至刻度,超声提取10分钟(视样品状况,若需脱脂,此时加入正己烷10毫升,重复两次脱脂)取适量至于离心管中,4000r/min离心10min,取清液经滤膜(0.45um)过滤,用高效液相色谱测定。 (2)高效液相色谱仪参考条件 a、色谱柱:C18 柱,5m, 4.6mm250mm或相当者。 b、流动相:甲醇:0.02mol/L乙酸铵溶液(10:90)。 c、流速:1mlmin。 d、进样量:10l。
4、e、柱温:40。 f、检测器:紫外检测器、293nm波长, 根据保留时间定性外标峰面积定量。 (3)结果计算 X= AV1000 MV11000 X:样品中脱氢乙酸的含量gkg。 A:进样体积中脱氢乙酸的含量mg。 V:样品稀释液总体积ml。 V1:进样体积ml。 M: 样品质量g。 2.结果与讨论 按照以上测定方法对六组果汁进行加标回收实验见下表: 加标回收率在90.00101.1,平均回收率为95.3。 实验证明采用该方法测定食品中脱氢乙酸,样品前处理采用水萃取,沉淀蛋白等简单净化技术,且采用高效液相反相,整个实验操作相对简单且准确度高,效率高,此法切实可行。 (作者单位:新疆昌吉州产品质量检验所)