《猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书》由会员分享，可在线阅读，更多相关《猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、猪瘟ELISA抗体检测试剂盒猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明书【简介】试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪 IgG 及其它试剂制成，应用间接 ELISA 原理检测猪血清中抗猪瘟 病毒抗体。【用途】猪瘟ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。评估猪场猪瘟疫苗免疫状况，感染猪的血清学诊 断。【原理】 本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中 含有抗猪瘟病毒的特异性抗体，则将与检测板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加 入酶标二抗，与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB
2、底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液终止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD 值。【试剂盒主要成分】1包被抗原的微孔板2 块（96 孔/块）2阴、阳性对照血清各1管（0.5ml/管）3羊抗猪酶标二抗1 瓶（20ml/瓶）420 倍浓缩洗涤液1 瓶（30ml/瓶）5底物A液、B液各1瓶（10ml/瓶）6终止液1 瓶（10ml/瓶）7 样品稀释液8 血清稀释板9 说明书1瓶2块1张（50ml/瓶）96 孔/块）【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。【洗涤液配制】使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（25C左右），并摇动使沉淀的盐溶解（最好在37C水中加
3、热5-10m in），然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用20 ml浓缩液加上380ml水），稀释好的洗涤 液在4C可以存放7天。【样品稀释】在血清稀释板中按1： 40的体积稀释待检血清（195p l样品稀释液中加5p l待检血清）。注意：阳性对照和阴性对照1： 40稀释，（234p l样品稀释液中加6p l对照血清）。【注意事项】1试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回2-8Co2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。3 不要用口移液。4 TMB （底物液B）不要暴露于强光，避免接触氧化剂。5检测板拆封后避免受潮或沾水（未用完的抗原包被板加干燥剂放于自
4、封袋中，应尽快置于4C）。6 待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到检测 板，使反应时间一致。7 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。8 严格按照操作说明书可以获得最好的结果，操作过程中移液，定时和洗涤等的全过程必须精确。 【操作步骤】1取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清取100p l加入到检测板 孔中。阴性对照和阳性对照各设2孔，每孔100p l。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37C温育30分钟。2甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板5次，200p l/孔，每次静置3分钟倒掉，再在干
5、净吸水纸上拍干。3每孔加羊抗猪酶标二抗100p l,置37C温育30分钟。4 洗涤 5 次, 方法同 2。切记每次在干净吸水纸上拍干。5每孔先加底物液A 一滴（50M）、再加底物液B 一滴（50M），混匀，室温（18C-25C）避光显色10分 钟。6每孔加终止液1滴（50p l），10分钟内测定结果（测定前在震荡器上轻轻震动一下）。【结果判定】 在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于1.0, 阴性对照孔平均OD630值必须小于0.3。样品OD630值大于0.35，判为阳性；样品OD630值小于0.35，判为阴性。注意：用 620 650 纳米波长测定结果均有效。【贮 存】2-8 C避光保存【有 效 期】 6 个月
