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1、 苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠肠粘膜细胞因子和自由基的影响 熊永爱1 赵强强1 王淼1 黄勤挽1谢兴亮1 杨明*1(1成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室 四川成都611137)摘要 目的 探究苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠肠粘膜细胞因子和自由基的影响机制。方法 利用三硝基苯磺酸(TNBS)复制大鼠溃疡性结肠炎模型,灌胃给予苦参碱溶液进行治疗。治疗结束后,剖取结肠,检测溃疡性结肠粘膜细胞中IL-1、TNF-、IL-4、IL-10等一系列细胞因子的水平;检测结肠粘膜细胞中SOD、MDA水平。另取部分结肠做组织显微镜检查,并对组织损伤评分进行数理统计。结果 1)与模型组相比,苦参碱和柳氮磺胺吡啶
2、均能极显著降低IL-1水平(p0.01);显著降低TNF-水平(p0.01);极显著降低IL-4水平(p0.01);极显著降低IL-10水平(p0.01);2)与模型组相比,苦参碱和柳氮磺胺吡啶均能极显著升高结肠粘膜细胞SOD水平(P0.01);极显著降低MDA水平(P0.01);3)苦参碱和柳氮磺胺吡啶均能促进溃疡面愈合,减少病灶部位炎细胞浸润,水肿及纤维化。结论 苦参碱能明显抵抗溃疡性结肠炎炎性反应,增强机体免疫,通过调节肠粘膜细胞因子失衡和抑制粘膜细胞氧自由基的产生和抗氧化功能干预了UC发病过程。 关键词 苦参碱 溃疡性结肠炎 肠粘膜 细胞因子 自由基 机制Abstract Object
3、ive This study is to investigate the effect of matrine on the mechanism of cytokines and free radical in UC rats intestinal mucosa. Methods We made the model of ulcerative colitis by TNBS, and used the matrine to treat animals. After the treatment, animals were killed and colons were taken out, a se
4、ries of cytokines IL-1, TNF-, IL -4, IL-10 were detected; The SOD and the MDA were detected too. Other colons were tanken to be done the microscopy, and tissue injury scores were caculated. Result 1)Compared with model group, matrine and sulfasalazine could significantly reduce the IL-1 levels (p0.0
5、1); significantly decrease TNF- levels (p0.01); significantly reduce IL-4 levels (p0.01); significantly reduce IL-10 levels (p 0.01); 2) Compared with model group, matrine and sulfasalazine could significantly increase the level of SOD in colon mucosa cells (p 0.01); could significantly decrease MDA
6、 levels (p 2处溃疡伴炎症/伴炎症1cm 5溃疡/伴炎症2cm,病变增加1cm加1分 6-82.4 统计方法 数据采用组间对照t检验,以s表示。2.5 实验结果2.5.1 苦参碱对结肠细胞内IL-1和TNF-的影响与模型组相比,给药组结肠组织IL-1水平均极显著降低(p0.01),表明柳氮磺胺吡啶和苦参碱均能下调炎性细胞分泌IL-1;给药组结肠组织TNF-水平均显著降低(p0.01),表明两组药物能下调炎性细胞分泌TNF-水平。IL-1和TNF-测试结果见表-2。 表-2 结肠组织TNF-、IL-1水平测定结果(s,n=10) 组 别IL-1(pgmg-1) TNF-(pgmg-1)
7、正常组 60.00 9.97 * 61.44 18.77 *模型组 627.14 209.04 109.33 35.49 阳性组 133.30 39.39 * 77.56 13.05 *苦参碱组 268.89 102.50 * 84.88 12.56 * 注: 与模型组比较,*:P0.01,*:P0.05;与柳氮磺胺吡啶组比较,P0.01,P0.052.5.2苦参碱对结肠细胞中IL-4、IL-10的影响 与正常组比较,模型组大鼠结肠组织中IL-4、IL-10水平均极显著性升高(p0.01),表明结肠组织局部免疫细胞分泌抗炎因子十分活跃。与模型组相比,苦参碱组、柳氮磺胺吡啶组结肠组织中IL-4水平均显著降低,苦参碱组具有显著性(p0.01),表明苦参碱和柳氮磺胺吡啶都能明显下调结肠组织异常升高的IL-4水平。与模型组相比,苦参碱组、柳氮磺胺吡啶组能显著降低结肠组织中IL-10水平(p0.01),表明各药物都能明显下调结肠组织异常升高的IL-10水平。IL-4和IL-10测试结果见表-3。表-3 结肠组织中IL-4、IL-10水平测