《马铃薯多酚氧化酶》由会员分享，可在线阅读，更多相关《马铃薯多酚氧化酶（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、马铃薯多酚氧化酶活性测定及其性质研究设计性实验方案题目:马铃薯多酚氧化酶活性测定设计性实验方案系(部)院：农业与生物技术学院班 级：生物科学102班小组成员：韩 春、高有湖、 高彩云指导教师：张喜峰马铃薯多酚氧化酶活性测定及其性质研究设计性实验方案研究目的及意义：马铃薯(Solanum tuberosum L.)富含碳水化合物、蛋白质、维生素、矿物质 及人体必需氨基酸等营养成分，有“地下苹果”之美称” 。我国各省均有种植， 种植面积广，产量居世界前列，但加工利用水平却远落后于国外。鲜切马铃薯是 一种新型的马铃薯初加工制品，因食用方便、快捷而备受消费者青睐。马铃薯切 分后呼吸作用和各种衰老代谢反
2、应加剧，品质迅速下降；另外，由于切分造成的 机械伤导致细胞破裂，切分表面木质化或褐变，极易失鲜失重，从而降低了其食 用价值和商品价值 。马铃薯中的多酚氧化酶(PPO)鲜切以后催化底物氧化聚合，导致褐变。目前, 马铃薯抗褐变方法主要集中在微波、烫漂、蒸汽处理及驱逐或隔氧等物理方法和 应用柠檬酸、亚硫酸盐等抗氧化剂的化学方法，而其他抗氧化剂的研究较少。为 深入研究鲜切马铃薯抗褐变技术措施，探讨马铃薯中PPO酶学特性，笔者系统 研究了切分马铃薯中PPO酶活特性，分析了几种常用防腐、防褐抑制剂对切分 马铃薯PPO的抑制效果及贮运品质的影响，以期为马铃薯加工中褐变控制提供 理论和实践依据。二材料与仪器：
3、马铃薯(农生院试验田)；邻苯二酚、抗坏血酸、VC、柠檬酸等均为分析纯。三仪器与设备：722s可见分光光度计、高速冷冻离心机、移液枪、水浴锅等。 四实验原理：马铃薯PPO酶学特性与防褐剂的筛选。马铃薯切分后，测定不同pH值(4、 6、7、8、9)和温度(10-50C)下PPO活力；通过高温(60-100C)处理，确定PPO 热稳定性。以邻苯二酚为底物，测定不同底物浓度下PPO活性，经米氏方程回 归分析，确定 PPO 酶促反应动力学模型。通过抗坏血酸、 NaHSO4 柠檬酸、壳 聚糖、苯甲酸钠、山梨酸钾、EDTANa2、丙酸钙、CaCI2,、PVPP等确定马 铃薯PPO较合适的防褐剂和防腐剂，选用
4、较为有效的试剂进行L9 (3) 4正交试 验，通过马铃薯丝褐变度确定复合保鲜剂的优化组合。五实验步骤：( 1)粗酶液制备：马铃薯去皮后称取5 g,加5 ml的0.03 mol/L磷酸缓冲液,研磨后，在4 C下6000 r/m in离心10 min,沉淀经缓冲液重悬后再次离心。所得上清液定容至50 ml即得粗酶液。PPO酶活的测定：反应体系0. 1 mol/L磷酸缓冲液(pH值7. 0) 2 ml、0. 5 mol/L邻苯二酚1 ml、PPO 粗酶液0.5ml。以缓冲液为对照，在420 nm下加入酶液后，每2min记录1次OD值，以 OD值变化0. 001为一个酶活力单位。(3)温度对马铃薯PP
5、O活性的影响：试管号pH=7 缓 冲液2ml邻苯二酚(ml)粗酶液(ml)温度(C)AOD420PPO活性12ml0.50.5室温22ml0.50.54032ml0.50.55042ml0.50.560(4) pH值对马铃薯PPO活性的影响:试管号不同pH缓冲液2ml邻苯二酚(ml)粗酶液(ml)AOD420PPO活性1pH=40.50.52pH=60.50.53pH=70.50.54pH=80.50.55pH=90.50.5(5)不同试剂多PPO影响:试官邻苯二 酚(ml)VC(ml)EDTA(ml)柠檬酸(ml)亚硫酸 钠(ml)粗酶液AOD420PPO活性10.520.520.520.5
6、30.520.540.520.5参考文献来源：1 安徽农业科学.-200937(34).-17067-6 作者：刘 静等 阅读次数： 481 2 刘普幸 ,李筱琳.层次分析法在生态预警中的应用 以酒泉绿洲为。例 J .干旱区资源与环境 , 2004, 18 (5) : 15 - 18. 3章家恩 , 骆世明 . 农业生态安全及其生态管理对策探讨 J . 生态学杂志 , 2004, 23 (6) : 59 - 62. 4 孙凡 ,李天云 ,黄轲 ,等.重庆市生态安全评价与检测预警研究 理论与 指标体系 J .西南农业大学学报 :自然科学版 , 2005, 27 (6) : 757 -762 5 赵焕巨 ,许树柏 ,和金生.层次分析法一种简易的新决策方法 “三农”务 政策(如土地使用政策、业生产资料与农产品M北京：科学技术出版社，1986: 1 - 43.
