分子生物学整理资料.doc

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1、第一章1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是什么？1944年肺炎球菌转化实验 1952年噬菌体侵染实验2、请阐明1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋模型内容。 (1) 主链：由二条相互平行而走向相反的脱氧核苷酸链围绕一共同中轴以右手方向盘旋，形成双螺旋构型。主链处于螺旋的外则。 (2) 碱基对：碱基位于螺旋的内则，碱基对以氢键维系，A与T间形成两个氢键，G与C间形成三个氢键。碱基平面与螺旋中轴垂直。 (3) 大沟和小沟：大沟和小沟分别指双螺旋表面凹下去的较大沟槽和较小沟槽。 (4) 结构参数：螺旋直径2nm；螺旋周期包含10对碱基，螺距3.4nm；相邻碱基对平面的间距0.3

2、4nm。3、请说明核小体的结构组成。核小体是由核心颗粒（H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体）和连接区DNA（大约200bpDNA）组成。DNA双螺旋沿八聚体核心的短轴旋绕1.75圈，而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。4、原核生物与真核生物基因组的区别。第二章1、原核与真核生物中的DNA聚合酶有哪些?功能如何？DNApol功能： a 53聚合作用：DNApol的聚合作用主要用于DNA的修复和RNA引物的替换。 b 53外切酶活性： 冈崎片段5末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。 c 35外切酶活性：主要功能是校对作用DNApol： 具a b 不具cDNApolII

3、I：DNA聚合酶III是细胞内DNA复制所必需的酶，也是主要的酶真核：DNA聚合酶：催化核内染色体DNA前导链及滞后链的合成，需增殖细胞核抗原蛋白PCNA（proliferatating cell nucleus antigen-PCNA）的参与。 DNA聚合酶：与引发酶配合，参与滞后链的合成。DNA聚合酶：主要作用是核内缺口填充和DNA修复。DNA聚合酶：负责催化线粒体DNA的复制。DNA聚合酶的结构和特征与酶相似可能参与修复机制或与和协同作用。2、DNA复制的基本特点。3、DNA复制方式有哪些？有何区别？“”型复制，滚环复制，D环复制滚环复制单链环形DNA的复制 D环复制的特点是两条链的复

4、制不是同步的。第三章1、引起DNA突变的原因或来源有哪些，突变结果如何？一、 DNA复制中的错误 二、 DNA的自发性化学变化 1、碱基的异构互变 2、碱基的脱氨基作用 3、脱嘌呤与脱嘧啶 4、碱基修饰与链断裂 5、转座成分的致突变作用三、 诱发突变 1、物理因素引起的DNA突变 2、化学因素引起的DNA突变突变或诱变对生物可能产生4种后果： 致死性； 丧失某些功能； 改变基因型（genotype）而不改变表现型(phenotye)； 发生了有利于物种生存的结果，使生物进化。2、阐述DNA的几种修复方式。一、光修复（DNA的直接修复） 修复是由细菌中的DNA光解酶（photolyase）特异性

5、识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶二聚体，并与其结合，这步反应不需要光；结合后如受300-600nm波长的光照射，则酶被激活，将二聚体分解为两个正常的嘧啶单体，然后酶从DNA链上释放。二、切除修复 切除修复是修复DNA损伤最为普遍的方式，对多种DNA损伤包括碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。同时也是人体细胞主要的DNA修复机制。步骤 首先由核酸内切酶识别DNA的损伤位点，损伤的DNA片段被切除。不同的DNA损伤需要不同的核酸内切酶来识别和切割。 在DNA聚合酶I的催化下，以完整的互补链为模板，按53方向合成一段DNA链。 由DNA连接酶将新合成的DNA片

6、段与原来的DNA断链连接起来。这样完成的修复能使DNA恢复原来的结构。 核苷酸切除修复 碱基切除修复 错配修复三、重组修复 上述的切除修复在切除损伤片段后以原来正确的互补链为模板来合成新的段落而做到修复的。但在某些情况下没有互补链可以直接利用，例如在DNA复制进行时发生DNA损伤，此时DNA两条链已经分开，其修复可用DNA重组方式： 受损伤的DNA链复制时，产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。 完整的母链DNA与有缺口的子链DNA进行重组交换，将母链DNA上相应的片段切下来填补子链缺口处，而母链DNA出现缺口。 以另一条子链DNA为模板，经DNA聚合酶催化合成一新DNA片段填补母链DNA

7、的缺口，最后由DNA连接酶连接，完成修补。 重组修复不能完全去除损伤，损伤的DNA段落仍然保留在亲代DNA链上，只是重组修复后合成的DNA分子经多次复制后损伤就被“冲淡”了。四、SOS修复 SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式。当DNA两条链的损伤邻近时，损伤不能被切除修复或重组修复，这时在核酸内切酶、外切酶的作用下造成损伤处的DNA链空缺，再由损伤诱导产生的一整套的特殊DNA聚合酶SOS修复酶类，催化空缺部位DNA的合成，这时补上去的核苷酸几乎是随机的，但终于保持了DNA双链的完整性，使细胞得以生存。 修复结果只能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率

8、，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复第四章1、重组有哪些类型 根据对DNA序列和所需蛋白质因子的要求可以把重组分为四种类型，即: 同源重组 转座重组 位点专一性重组 异常重组2、 什么是转座子，可分为哪些种类转座子(transposon,Tn)是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。在细菌中发现两种类型的转座子：插入序列与复合转座子玉米中分为两类：即自主性因子 和非自主性因子果蝇中的转座子：Copia转座子 P转座子3、 转座子有什么结构特征？比较插入序列与重复转座子之间的异同所有转座子都有两个结构特征：(1) 两端有20-40个核苷酸的倒转重复序列。(2) 具有编码转座酶的基因

9、，这种酶催化转座子插入新的位置 异同(1) 简单转座子/插入序列(insertional sequence,IS) ：只带有其本身转座所必需的基因，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分，一个细菌细胞常带有少于10个IS序列。(2) 复合转座子：是一类带有某些抗药性基因或其它宿主基因的转座子，其两端往往具有相同或高度同源的IS序列或残余IS序列。这表明，当插入序列跳跃到细胞基因的两端时就可产生复合转座子。一旦形成复合转座子， IS序列就不能再单独移动，只能将复合体作为整体来运动。第五章1、请说出生物体内RNA的种类和功能mRNA是蛋白质生物合成的直接模板tRNA主要起转运氨基酸的作用 rR

10、NA 是合成蛋白质的场所2、 与mRNA序列相同的那条连是什么编码链或有义链3、 什么是DNA模版及mRNA与蛋白质产物之间共线性关系？4、 转录一般被分为哪几个步骤RNA合成的起始 延伸 终止5、 原核生物RNA聚合酶由那几个亚基组成细菌的RNA聚合酶具有很复杂的结构。由5种亚基组成，即2 ，其中亚基有两个，其余亚基均只有一个，总分子量为450KDa6、 说说启动子的一般构造7、 请说说转录终止子与翻译终止密码的结构特点第七章基因：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列基因表达 : 指某一基因指导下的蛋白质合成，即从DNA到蛋白质的过程衰减子：先导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的

11、作用，这段序列就称为衰减子反义RNA ：指与mRNA互补的RNA分子，它能与mRNA分子特异性地互补结合，从而抑制该mRNA的加工与翻译，阻断该基因的表达。操纵子：原核基因表达调控的一种重要组织形式增强子：能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列顺势作用元件：不编码任何产物的DNA片段，能影响与之相联系的同一条DNA链上的基因表达。启动子、增强子属于顺式作用元件。反式作用因子：由调节基因编码，其编码产物（RNA或蛋白质）可以扩散、控制其它基因的表达（转录因子）1. 结合乳糖操纵子结构说明其工作原理乳糖操纵元含有、和3个结构基因。基因编码-半乳糖苷酶，催化乳糖转变为别乳糖，再分解为半乳糖和

12、葡萄糖；基因编码半乳糖苷透过酶，促使环境中的乳糖进入细菌；基因编码转乙酰基酶，以催化半乳糖的乙酰化。2. 简述真核生物在翻译水平上的调控3. 简述反式作用因子的基本结构特点 DNA结合域（DNA binding domain） 转录激活域（activating domain）：不与DNA直接结合的转录因子没有DNA结合域，但能通过转录激活域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率。 连接区 即连接上两个结构域的部分4. 简述锌指结构和亮氨酸拉链结构的特点锌指结构（zinc finger）：锌以4个配价键与4个半胱氨酸、或2个半胱氨酸和2个组氨酸相结合。每个重复的“指”状结构约含23个氨基酸残基，整个蛋白质分子可有2-9个这样的锌指重复单位。每一个单位可以其指部伸入DNA双螺旋的大沟，接触5个核苷酸。亮氨酸拉链（basic-leucine zipper bZIP）：这类蛋白质分子中每隔6个氨基酸就有一个亮氨酸残基，结果就导致这些亮氨酸残基都在螺旋的同一个方向出现。两个相同结构的两排亮氨酸残基就能以疏水键结合成二聚体，二聚体的另一端的肽段富含碱性氨基酸残基，借其正电荷与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合。5. 简述真核生物在转录水平上的调控特点真核基因调控主要在转录水平上进行，受大量特定的顺式作用元件和反式作用因子调控。