《结构类似物抗性菌株的获得》由会员分享，可在线阅读，更多相关《结构类似物抗性菌株的获得（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、结构类似物抗性菌株的获得方法:就是将诱变处理的野生型菌株涂布在含有末端代谢产物的结构 类似物的琼脂平板上，培养一段时间之后大多数细胞被杀死，而那些 形成了抗性突变的君主则形成了菌落，从而得到不受末端代谢产物调 节作用的突变株。机制如下：细胞中过量代谢产物（氨基酸A）会抑制和阻遏参与 其生物合成途径的酶。氨基酸A可用于蛋白质的合成，氨基酸类似 物A* （又称抗代谢物），具有与氨基酸A 一样的调节作用，但不能 用于合成蛋白质。经诱变处理的野生型在含有氨基酸类似物A*的培 养基中培养时，因为绝大多数细胞不能合成氨基酸A而死亡，只有 那些对类似物A*不敏感的抗性突变菌株能合成氨基酸A,方能形成 菌落。
2、在这些突变菌株中，有些可能是由于参与氨基酸合成的酶结构 起了变化，对类似物A*不敏感（抗反馈抑制的突变株），另一些可能 是编码参与氨基酸A合成酶的操纵子控制基因发生了突变，编码出 没有活性的调节蛋白而对类似物A*不敏感（抗反馈阻遏的突变株）。 由于这些君主对氨基酸A的合成失去控制，从而能过量的生产氨基 酸Ao如筛选能抗苏氨酸的结构类似物a-氨基-卩-羟基戊酸的黄色短杆 菌的突变株获得苏氨酸过量合成型菌株。当然，此种方法还可用于过量合成嘌吟、嘧啶、维生素。1和皿一址瞇筛选抗性突变株的结构类似物&石访二积累的产物结构类似物积累的产物结构类似物酪氨酸脯氨酸墩氨酸亮氨酸 精氨酸（20g/L）尿畴曉对-
3、氨基苯甲酸 苯丙氨酸a-氨基炉轻戊酸对-氟苯丙氨酸.D酪氨酸3.4- 脱氢脯氨酸旷氨基丁酸3-氟亮氨酸，4-氟亮氨酸刀豆氨酸.精氨酸径胯.!精氨酸2.5- 二氨基噂吟5-氟尿喘陀，8-氮黄瞟吟磺胺对氟苯丙氨酸噪吩苯丙氨酸色氨酸组氨酸（8g/L）异亮氨酸（15g/L）甲硫氨酸次黄嚓吟次黄昔烟酸.毗哆醇（维生 素BJ硫胺累（维生素Bi）翌色氨酸-甲基色氨酸 氟色氨酸2- 囉堆丙氨酸，1,2,4-三哇-3-丙 氨酸缄氨酸异亮気酸氣脂酸，氨 基-伕轻戊酸.O甲基苏氨酸乙硫氨酸，正亮氨酸.a-甲基甲硫 氨酸，L-甲硫氨酸-D.L-硫脖5-氟尿喘咙.8-氮鸟嗥吟3- 乙酰毗咗异烟腓毗噪硫胺素下面以选育能过量合成毗哆醇（维生素b6）的酵母菌结构类似物抗性突变株为例来介绍其获得方法。吡哆醇结构类似物是异烟肼。定向培育抗异烟肼的吡哆醇高产菌株的方法是:先在培养皿中加入10ml融化的普通琼脂培养基，皿底斜放，待凝。皿底放平，倒上10ml含异烟肼的培养基，凝固后，该平板上涂以经诱变的大量酵母菌细胞，培养。酵母菌在较高浓度一侧还有生长的，即是酵母菌产生了能分解异烟肼酶类的突变株，或是产生了能合成更高浓度毗哆醇的突变株，以克服异烟肼的竞争性抑制。结果发现，利用梯度平板法筛选出来的突变株多数都属于毗哆醇过量合成型突变株。此法使毗哆醇合成产量提高了 7倍。
