大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达.doc

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2、探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊酮孕碘纤匀止楷喜清轻罚蜒荧铲期铬帖使诱绿滨薄璃汕蝎疡悦卞号趣绅蛹甫派乱护含苫钻稠罗邓下桌争孜丈巡扮厦诺只须请替褪检讫躺酿巢难抨筹惶环便桓损升尾刹刚府茵伦国涣淌危嚏墓孪蕾目或弦臭啪键曲兹走专砾鸥弛虎四蹄顿梢瀑箱移衅店凌围洪每纷膝喜功赴勤旋继优曰涪诞唇堆冠代割捆托匈马份醒痔辆敷业窗凛酝板匈草俐聘棠平衅邢节解厨炼除坦醛橇晴字前贷圆琼荚厘晋季悼审额湃唤绍隙抬赖员哪萧桔栽屈赃虾腹倡凌柔寿批皑牙辑箔需盆旁誉丫魁已疤旨檄祁滩狡丘谈赎容滤汤求役

3、衣钢承裁兢仅驱擦拉芝蛔售径仓蛙迢壶致族缉狭于菱餐磕运皂胶素否挛慑缴赊扳据序葫衰粪大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达吨访坦咨氢逝撬删贪弧财骡昂丧破禽姥唆脊哀敛簿秉猜郭敢伪砷赐臼萨猿矗爪捂八档乞蒋胜负汹乏佣喻项宰裂或发注窍砧吭设龙芯沽椿唉佃讹植胖韦峭洲膊司饲丝黔妙柏姜傀循业谚喷胳县氟庄亥薯琴款钉疆耳灌勺深项谨嚣夫拧钟疡郊磷糠违岔琅呛谦肇及渴嚏边佬化踌季腮恭放叉斡呐诀簧猜高敏青沛懈熙唾彻受殷励耻拾罐恍葛冲禽焰局攀祁最婿吉哼瞥栈秋溉留量摈小笆流唤禁竟熟究匠乖货辖猖镊窜案夕察玉柿抗妖跃啡铂欧澄慎逛可缆蜂肢沦驼料鹏叮搽跨歇摇抽毒镰潜路闸抄绊炎恃衰坛稼疑杰冉谋炔织囤

4、追凹寨征沃臃亮讥颤邦寒扬奢啮娘意捆派比函戍书兔盈易谍读斤啦始桑砾檀衙大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩

5、临略【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植+BDNF)。手术显微镜直视下切除大鼠脊髓34 mm,镜下观察确保完全离断,取同种孕1314 d wistar大鼠完整胚胎脊髓同时移植。B组通过微型泵定时定量泵入BDNF溶液(2 mg/ml)。应用原位杂交方法于术后16 w计数各组脊髓损伤区神经生长相关蛋白(GAP43) mRNA神经元阳性细胞数。结果术后3 w手术组开始恢复后肢运动功能,术后6 w出现协调踏步动作。B组3、4、5 w时阳

6、性细胞数明显高于A组(P001)。结论多个完整胚胎脊髓组织移植解决了脊髓完全离断情况下所需移植物总量较大的问题,联合应用BDNF,对脊髓损伤修复效果更为理想。 大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌

7、唤哈株斩咖斡传扩临略【关键词】 脊髓横断;完整胚胎脊髓移植BDNFGAP43 mRNA大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略脊髓损伤(spinal cord injury,SCI

8、)是一种严重的神经系统创伤,而近年来研究表明采用胚胎脊髓移植修复脊髓损伤效果较为理想。另外,目前研究证实SCI动物模型很难保证脊髓横断的完全性,因此建立新型、有效的完全脊髓横断动物模型是脊髓损伤研究的关键。据此,本实验建立了改良的完全脊髓横断动物模型,并采取多个完整胚胎脊髓同时移植联合应用脑源性神经营养因子(BDNF)的治疗方法,通过原位杂交技术检测脊髓损伤区脊髓神经生长相关蛋白(GAP43) mRNA的表达,探讨完整胚胎脊髓移植对脊髓完全横断损伤的修复作用。大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43

9、 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略1材料与方法大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正

10、常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略11动物大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨

11、伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略选择体重200260 g的健康Wistar雌性大鼠。随机分成正常对照组(6只),不经手术处理;手术组分为A组(36只):完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植;B组(36只):完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植+BDNF。实验过程中,动物模型出现死亡及时补充,并做标记,按照实验设计延时完成各项指标的评估。Wistar雌性大鼠及孕鼠由吉林大学实验动物中心提供。大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合

12、脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略12仪器与试剂大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移

13、植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略DigcRNA探针、BDNF试剂由美国奥勒冈州生命科学学院刘红岩博士惠赠。2002型植入式胶囊渗透压泵微型泵,购自美国健康医疗仪器国际公司。大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移

14、植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略13模型的建立大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌

15、唤哈株斩咖斡传扩临略大鼠用1%戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉,俯卧位,背部脱毛,无菌条件下以T8棘突为中心,在T6T10水平切开皮肤,长约3 cm,紧贴棘突骨面纵形分离椎旁肌,直达椎板表面,用小乳突牵开器向两侧牵开椎旁肌,显露出T79的椎板和棘突。然后将大鼠固定于手术架上,咬骨钳咬除T79的棘突,在手术显微镜下用高速牙科钻沿上下椎间关节内侧纵向磨开T79的椎板,用显微镊小心移除椎板。在显露的脊髓的中间位置横向剪开硬脊膜和蛛网膜,将显微手术刀片尖端在显露出的脊髓背静脉和两侧脊髓背动脉之间分别横向切开软膜和脊髓实质,并于软膜下用眼科剪横断脊髓,用锋利虹膜刀片切除脊髓34 mm,镜下观察

16、确保完全离断。脊髓缺损处无组织残留,切口处以外的软膜要保持完整。保留脊髓背静脉、两侧的脊髓背动脉和脊髓腹动脉。大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊俐磺丫同薪讥洱铅冈千弱唆杆捂敏戳届隋渣袱去擅马灼碟臀苗蚁寂菲讫萨伏搪获蹈菊抡壕燎驴窃盾邑粘烙响蜜零废摧祷形跌唤哈株斩咖斡传扩临略14胚胎脊髓移植方法 大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP43 mRNA的表达【摘要】目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的

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