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1、乙肌红蛋白(Myoglobin)1. 分析原理采用双抗夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1步：15l标本、生物素化的抗肌红蛋白单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗肌红蛋白单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。Elecsys自动将标本产生的光电信号与从肌红蛋白定标液得出的Cutoff值相比较。2. 标本要求血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。血浆：肝素（锂、钠、铵）
2、、EDTA-K3 、枸橼酸钠抗凝均可。标本在28 度可稳定1 周，-20 度可稳定3 个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂：M： 链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，含防腐剂。R1：生物素化的抗肌红蛋白单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml，浓度1.75mg/l，磷酸缓冲液85mmol/l，pH6.5, 叠氮钠0.1%,含防腐剂。R2：Ru(bpy)32+标记的
3、抗肌红蛋白单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度1.75mg/l，磷酸缓冲液85mmol/l，pH 8.5, 叠氮钠0.1%,含防腐剂。校准品：Cal 1 阴性定标液（白盖），2*1ml血清, 含防腐剂Cal 2 阳性定标液（黑盖），2*1ml血清，含防腐剂质控品：Elecsys 肌红蛋白质控品1和2 （PreciControl Cardica II）货号03530477其他所需材料：Elecsys2010/cobas e 411分析仪需要Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970Elecsys 添加
4、剂液（SysWash）货号11930346Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）货号11933159Elecsys 2010 反应杯（Assay Cup)货号11706802Elecsys 2010 吸样头（Assay Tip)货号11706799E170 /cobas e 601分析仪需要Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）货号12135019Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）货号12135027Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）货号03023141探针冲洗液，12x70ml,用于最终保养
5、及完成试剂吸样后冲洗，货号03005712Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M)货号12102137Elecsys 废物盒(wasteliner)货号03023150Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M)货号03027651各种分析仪均适用的材料Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号112985004. 仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：每批肌红蛋白试剂盒必须用新鲜试剂和肌红蛋白 Cal 1
6、,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：Elecsys2010： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒）各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。5. 操作步骤（以E 170为例）5.1 校准操作步骤：在编缉各项目的参数时，已经在ApplicationCalib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入CalibrationStatus菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SP
7、AN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在CalibrationCalibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。 在CalibrationStatus菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。5.2 样本检测程序： 单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。批量常规标本的输入，在主菜单
8、下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。6. 质量控制用Elecsys 肌红蛋白质控品1和2 （PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围
9、以外，应采取校正措施。7. 计算方法仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计算Cut-off值。每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数形式（标本信号/ Cutoff）报告。8. 参考范围数目2.5-97.5百分位数男性103028-72ng/ml女性11322558ng/ml如有必要，各实验室应自己测定一个参考值。9. 分析性能准确性：以下列出了此试剂盒在Elecsys仪器上的表现。每个实验室结果会不同。重复性测定采用的是美国临床化学实验室标准委员会修订稿EP5-A标准方法进行评估，使用了Elecsys试剂及人血清池、质控进行测定：连续测定10天，每天测定6次（n60次
10、）；E170的批内重复性共测定了21次。结果如下：分析灵敏度（最低检测限）： 21ng/ml,分析灵敏度代表了能与零区别的最低的肌红蛋白值10. 干扰因素该方法不受黄疸（胆红素65mg/dl）、溶血（血红蛋白1.4g/dl）、脂血（脂质2200mg/dl）和生物素5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8 小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。50 种常用药物经试验对本测定无干扰作用。肌红蛋白浓度高到30，000ng/ml 也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。肌红蛋白测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。11
11、. 临床意义肌红蛋白是一种细胞浆蛋白质，存在于心脏和骨骼的横纹肌中，具有转运氧气和贮存氧气的功能，分子量17.8kD，由于分子量较小，当肌细胞受损时，肌红蛋白很快被释放进入血循环中。检测血清肌红蛋白是诊断急性心肌梗死，早期再度梗死以及观察溶栓治疗后成功再灌注的重要指标。症状发生后约两小时，肌红蛋白水平即可升高，因此肌红蛋白被认为是心肌梗死很早期的标志物。梗死发生后4-12 小时，肌红蛋白的血浓度达到最高值。24 小时后恢复到正常值水平。肌红蛋白升高也可见于骨骼肌损伤和肾功能极度衰竭的病人。Elecsys 肌红蛋白采用双抗夹心法原理和两种不同的抗肌红蛋白单克隆抗体。12. 参考文献编写： 审核： 批准：批准日期： 年 月 日
