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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流Folin-Ciocalteu比色法.精品文档.Folin-Ciocalteu比色法(FC酚法)一、 仪器UV-2401PC型紫外分光光度计;超声波清洗仪;恒温水浴锅二、 试剂没食子酸标准品;钨酸钠;磷钼酸;85%磷酸,碳酸钠,以上试剂均为分析纯。水为蒸馏水。1、 福林试剂的配置 在250ml的圆底烧瓶内加入20g钨酸钠,5g钼酸钠、140ml蒸馏水,85%的浓硫酸10ml及浓盐酸20ml,充分混匀,以小火回流10h,再加入硫酸锂及15ml双氧水,开口继续煮沸15min,待双氧水全部挥发,呈亮黄色。冷却后移入250ml容量瓶定容,置于棕色试剂
2、瓶中,放入冰箱中备用。2、 碳酸钠溶液的配制称取40g碳酸钠,溶于200ml蒸馏水中,即为20%(g/L)的碳酸钠溶液。三、 方法与结果1、 标准曲线的制作 精密称取没食子酸标准品0.0110g,用蒸馏水并定容至100ml,得浓度为0.11mg/ml的标准液。准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6ml置于25ml的容量瓶中,加蒸馏水6.0ml,然后分别加入FC试剂0.5ml,混匀,在30s8min内加入1.5ml20%的碳酸钠溶液,充分混合后定容,30避光放置30min,以不加标准液的6.0ml蒸馏水为空白对照,760nm下测定吸光值,每个样品平行测定3次。2、 供试品液的制备 样品液总酚含量的测定:准确量取制备好的乙醇粗提液0.5ml于50ml容量瓶中,加入9.5ml蒸馏水,摇匀,再加入0.5ml福林试剂,在30s8min内加入1.5ml20%的碳酸钠溶液,充分混合后定容,30避光放置30min,以没食子酸标准液为空白对照,760nm下测定吸光度值,每个样品平行测定6次(A为6次平行测得的吸光度)。3、 以没食子酸为标准品的标准曲线:C0=0.11mg/ml4、 以没食子酸在反应体系中的质量浓度C为横坐标,吸光度值A为纵坐标,绘制标准曲线。次数12345678样品V(ml)00.40.60.81.01.21.41.6A