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1、展开剂的极性规律 单一溶剂的极性大小顺序为：石油醚（小）一环己烷一四氯化碳_二氯乙烯一苯一甲苯_二氯甲烷一氯仿_乙醚_乙酸乙 酯f乙酸甲酯f丙酮f正丙醇f甲醇f吡啶f乙酸（大）混合溶剂的极性顺序：苯：氯仿（1+1）f 环己烷：乙酸乙酯（8+2） f氯仿：丙酮（95+5） f苯：丙酮（9+1） f苯：乙酸乙酯（8+2） f氯仿：乙醚（9+1） f苯：甲醇（95+5） f苯：乙醚（6+4） f 环己烷：乙酸乙酯（1+1） f氯仿：乙醚（8+2） f氯仿：甲醇（99+1） f苯：甲醇（9+1） f氯仿：丙酮（85+15） f苯：乙醚（4+6） f苯：乙酸乙酯（1+1） f氯仿：甲醇（95+5） f氯
2、仿：丙酮（7+3） f苯：乙酸乙酯（3+7） f苯：乙醚（1+9） f乙醚：甲醇（99+1） f 乙酸乙酯：甲醇（99+1） f苯：丙酮（1+1） f氯仿：甲醇（9+1）1、生物碱（1）沉淀反应一一碘化汞钾试剂一白色或浅黄色沉淀碘化铋钾试剂一橘红色沉淀碘一碘化钾试剂一浅棕或暗棕色沉淀硅钨酸试剂一浅黄或黄棕色沉淀磷钨酸试剂一浅黄色沉淀磷钼酸试剂一白色或淡黄色沉淀苦味酸试剂一黄色结晶或非结晶形沉淀 鞣酸试剂一棕黄色沉淀 氯化金试剂一黄色结晶氯化铂试剂一白色结晶雷氏铵盐一红色无定形沉淀（2）薄层层析检查：吸附剂一一碱性氧化铝（III级，干法铺板）硅胶G （稀碱湿法铺板）展开剂一一氯仿：甲醇 显色UV
3、；碘化铋钾2、氨基酸、多肽、蛋白质（1）加热沉淀试验：加热煮沸一混浊或沉淀（蛋白质）+5%H2SO4 （不加热）一混浊或沉淀（2）双缩脲反应： +40%NaOH， 1%CuSO4 一紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）（3）茚三酮反应： +0.2%茚三酮试液 一蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）（4）吲哚醌反应： +吲哚醌试液 一各种颜色（氨基酸）（5）Millon反应：+Hg, H2NO2 一红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸一各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）(7)氨基酸的薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G展开剂 n-BuOH，n-BuOH： HA
4、c： H2O显色剂一一0.25%茚三酮试液一紫红色斑点3、有机酸( 1) PH 试纸检查(2) 溴酚兰试液：喷洒一蓝色背景黄色斑点(3) 薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或酸性氧化铝展开剂一一 C6H6： EtOH显色剂一一0.1%溴酚兰试液一黄色4、酚类和鞣质(1) FeCI3试剂：+l%FeCI3试液一蓝、暗绿或蓝紫色(2) 三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒一蓝色斑点(3) 香草醛-盐酸试剂：喷洒一红色(间苯二酚、间苯三酚)(4) 重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠一红色(5) 薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或纤维素展开剂一一 n-BuOH： HAc： H2O；15%HAc 显色剂一一1% Fe
5、CI3试液1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液一蓝、绿或黑色鞣质与酚类的区别： +明胶 一一 沉淀上清液+1%FeCI3试液一蓝、暗绿或蓝紫色5、糖和苷(1) 斐林试剂： +硫酸铜、酒石酸钾钠 一一 砖红色沉淀(还原糖)(一) +1%HCI +NaOH 沉淀(苷元)30min上清液(+)(多糖、苷)(2) Molish反应：+a-萘酚-浓硫酸一紫红色环(3) 银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水一银褐色(还原糖)(4) 薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或纤维素展开剂一一 n-BuOH： Pd： H2O；15%HAc显色剂一一 苯胺-邻苯二甲酸6、皂苷(1) 泡末试验：振摇一大量持续性泡末+0.1M H
6、CI 二管泡末高度相同(三萜皂苷)+0.1M NaOH 碱管高于酸管(甾体皂苷)(2) 溶血试验： +2%红血球悬浮液 一溶血(3) Lieberman-Burchard反应：+醋酐-浓硫酸 紫红色(三萜皂苷)黄-红-紫-污绿(甾体皂苷)7、甾体(1) Lieberman-Burchard反应：+醋酐-浓硫酸一黄-红-紫-污绿(2) 氯仿-浓硫酸反应： +氯仿-浓硫酸 氯仿层一红或青色硫酸层一绿色荧光(3) 五氯化锑或三氯化锑反应： +SbCI3 或 SbCI5 一红色(4)薄层层析检查：吸附剂一一中性氧化铝或硅胶G展开剂 C6H6-MeOH；CHCl3-MeOH显色剂一一 10%磷钼酸一蓝-
7、蓝紫色5%三氯化锑试液一红、棕红或绿色8、黄酮(1) 盐酸-镁粉反应：+HCI-Mg 红色(2) 三氯化铝反应：+AICI3 黄色(3) 浓氨水反应：+NH3 一亮黄或橙色(4) 薄层层析检查：吸附剂一一聚酰胺或硅胶G展开剂一一 MeOH-H2O；EtOH-H2O显色剂一一 UV-亮黄或黄绿色荧光1%三氯化铝试液一亮黄色9、香豆素、内酯(1) 开闭环反应：+1%NaOH-澄清+2%HCI-混浊(2) 异羟污酸铁反应：+7%盐酸羟胺、10%KOH +稀HCI、1%FeCI3 一红色(3) 重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠一红色(4) 薄层层析检查：吸附剂一一酸性硅胶G或硅胶G或酸性氧化铝展开剂
8、一一 甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5： 4： 1)显色剂一一 UV-蓝色荧光异羟污酸铁试液一红色10、强心苷(1) Kedde试剂：+3, 5-二硝基苯甲酸试液一紫红色(2) Baljet试剂：+碱性苦味酸试液一橙或橙红色(3) Legal试剂：+亚硝酰铁氰化钠试液一紫红色(4) K-K反应：+FeCI3/冰HAc、浓H2SO4- 上层绿蓝色(2-去氧糖)界面红棕色(5) 薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或中性氧化铝展开剂一一 n-BuOH： HAc： H2O(4： 1： 5)显色剂一一碱性3, 5-二硝基苯甲酸试液一紫红色碱性苦味酸试液一橙红色11、蒽醌(1) 碱液反应： +10%NaOH 一红色
9、+H2O2 一红色不褪 +H+ 一红色褪去(2) 醋酸镁反应： +1%MgAc2 一红色(3) 薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G展开剂Pet： EtOAc显色剂UV黄色荧光5%NaOH 一红色12、挥发油、油脂(1) 油斑检查：油斑挥发 一挥发油； 油斑不消失一油脂或类脂(2) 磷钼酸反应：喷洒 5%磷钼酸试液 一蓝色(油脂、三萜、甾醇)TLC VisuaIization ReagentsThis is a brief selection of the many available TLC visualization reagents. Below each title is the type
10、of compounds or structure which can be detected with the specific reagent. When beginning work with these reagents, acquired any MSDS (material safety data sheets) to see if there are any extra precautions needed in safely using them.Before spraying, plates should be well dried in the hood of residu
11、al solvents and components. Amines and organic acids used in the mobile phases may adversely affect the visualization reaction being attempted. If heating to remove these components is done, consideration should be given so that loss of components or their decomposition is avoided (by lowering the t
12、emperature or using a shorter time in the oven).Always spray any of these reagents onto plates in a well ventilated hood while wearing safety glasses. Also apply moderate amounts to the plate so it always appears dull and flat (if it looks wet, you have sprayed too much). You can always overspray to
13、 enhance the detection.When information about the results of using the visualization reagents was available, this was put undereach reagent as Results. If not give, the user will have to do a few experiments to see what the results might be.Always remember to look under normal light and also short a
14、nd long wavelength UV light so as not to miss any possibilities.Many of the reagents for these visualizers can be found in the EMD Chemicals catalog or on the website ( ).Aluminium chlorideFor flavonoidsSpray plate with a 1% ethanolic solution of aluminum chloride. Results: Yellow fluorescence in lo
15、ng wavelength UV light (360nm) 4-Aminoantipyrine/potassium hexacyanferrate (III) (Emerson reaction) (Emerson reagent) for the detection of phenols and arylaminesSolution I: 1g aminoantipyrine (4-aminophenazone) in 100ml 80% ethanolSolution II: 4g potassium hexacyanoferrate (III) in 20ml water, fill to 100ml with ethanolProcedure:Spray with solution IDry 5 minutes with warm airPlace chromatogram in a chamber with vapor from 25% ammonium solution, making sure that the layer does not contact the li
