蛋品质实验方案.doc

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1、蛋品质实验方案22020年4月19日文档仅供参考 蛋品质测定蛋品质的优劣不但影响蛋的种用价值，而且还影响蛋的食用价值和商品价值，因此对蛋品质进行检测很重要。 一、材料和方法1.实验材料及仪器1.1.1实验鸡蛋：相同饲养条件和日龄的儋州鸡、海兰褐新鲜鸡蛋各25枚 1.1.2实验器材：称重用的电子秤、测蛋壳颜色的分光测色仪、游标卡尺、蛋壳强度测定仪、蛋白高度测定仪、测蛋黄颜色的罗氏比色扇、蛋白蛋黄分离器。1.2.1实验测量指标蛋重、蛋形指数、蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄颜色、哈氏单位、鸡蛋等级，蛋黄重、蛋壳重（含蛋壳膜），蛋白重1.2.2.实验方法（1）蛋重蛋重受品种（品系）、开产

2、日龄、产蛋阶段、营养水平、气温等影响。国际市场鸡蛋以58克为标准，用精确到0.1克的电子秤进行称重。（2）蛋形指数蛋的形状由蛋形指数来表示，蛋形指数指蛋的长径和短径的比例。蛋形指数是蛋的质量的重要指标，它与受精率、孵化率及运输有直接关系。正常鸡蛋的蛋形指数是1.321.39，标准是1.35，用游标卡尺测量其长径及短胫径。（3）蛋壳颜色蛋壳颜色是鸡品种的重要标志，我们用分光测色计测定。蛋壳颜色越深，测定值越小，反之则越大。我们设定黑色的测定值为0，纯白色的测定值为100，所测到的蛋壳颜色介于这两个数之间。（4）蛋壳厚度蛋壳厚度指蛋壳的致密度。蛋壳厚度一般在370um左右。用蛋壳厚度测定仪在蛋壳的

3、大头、中间、小头分别取样测量，求其平均值。测量需去掉蛋壳上的内外壳膜，如未去掉则为表观厚度。（5）蛋壳强度蛋壳强度是指蛋对碰撞或挤压的承受能力，是蛋壳致密坚固性的重要指标。蛋壳强度与鸡的品种、营养水平等密切相关。将蛋垂直放在蛋壳强度测定仪上，钝端向上，测定蛋壳表面单位面积承受的压力。（6）蛋白高度蛋白高度是体现鸡蛋蛋白品质的指标。随着鸡蛋保存时间延长，蛋白高度会逐渐降低。用蛋白高度测定仪测量蛋黄边缘与浓蛋白边缘的中点的浓蛋白高度，测量呈正三角形的三个点，求平均值。（7）蛋黄颜色测定蛋黄颜色是比较蛋黄色泽的深浅度。蛋黄颜色与鸡的品种、饲料等有关。（8）哈氏单位和蛋的等级哈氏单位是由蛋重按蛋白高度

4、加以校正后计算而得的值，范围一般从100（最好）到3（最差），随着鸡蛋保存时间的延长，母鸡年龄的增长和温度升高，哈氏单位会降低。蛋的等级是反映鸡蛋品质的综合指标。哈氏单位 = 100Log(H-1.7W0.37+7.57)，蛋的最佳哈氏单位指标为75-80。（9）蛋黄重、蛋壳重经过测定蛋黄和蛋壳的重量来获得。蛋的营养成分分析一、材料和方法1.实验材料及仪器1.1材料1.1.1实验鸡蛋：相同饲养条件和日龄的儋州鸡、海兰褐新鲜鸡蛋各25枚1.1.2实验药品：蒸馏水、乙醇、高氯酸、硝酸、高锰酸钾、钒钼酸铵显色剂、50 g/mL的磷标准液、浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾、氢氧化钠、硼酸、盐酸、混合指示剂、石油

5、醚、盐酸、硫酸、氨水、草酸铵、甲基红、总胆固醇试剂盒1.1.3实验设备：电子数显卡尺、恒温水箱、电子天平、电炉、恒温烘箱、高温炉粉碎机、离心机、分光光度计、电子秤、凯氏定氮仪、脂肪测定仪 1.2.1实验测量指标 水分、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE）、无氮浸出物(NFE)、胆固醇、钙、总磷、1.2.2实验方法：（1）水分：鸡蛋中水分测定采用GB 6435-1986烘箱干燥法。 清洗称量皿烘至恒重称取样品放入调好温度的烘箱（100105）烘1.5 小时于干燥器冷却称重再烘0.5小时称至恒重（两次重量差不超过0.002g即为恒重）（2）粗蛋白(CP)：粗蛋白测定采用GB/T 6432-1994定氮分

6、析仪法。凯氏定氮法操作步骤：测定原理：鸡蛋经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮素以氨的形式与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收形成硼酸铵，再用盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定，根据盐酸消耗量计算出总氮量，再乘以一定的数值即为蛋白质含量，其化学反应式如下(1)消化反应：有机物(含C、N、H、O、P、S等元素)+H2S04-(NH4)2S04+C02+S02+S03+H3PO4+CO2(2) 蒸馏反应：(NH4)2SO4+2NAOH-2NH3+2H2O+NA2SO42NH3+4H3BO3-(NH4)2B4O7+5H2O(3)滴定反应：(NH4)2B4O7+2HCH+5H2O-2NH4C

7、H+4H3BO3或(NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2试剂与仪器：1、硫酸钾；2、硫酸铜；3、浓硫酸；4、4硼酸溶液(饱和溶液)；5、40氢氧化钠溶液；6、混合指示剂：临用时把(溶解于95乙醇的)0.l甲基红溶液10毫升和(溶于95乙醇的0).l甲基蓝溶液5毫升混合而成；7、0.1N盐酸标准溶液或0.1N硫酸标准溶液；8、凯氏定氮仪一套。1、样品消化：精密称取0.200-2.00g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移入干燥的500ml定氮瓶中，加入0.5g硫酸铜，10g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口

8、放一小漏斗，将定氮瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。取下放冷，小心加100ml水，放冷。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸，用同一方法做试剂空白试验。2、蒸馏、吸收：按图装好定氮装置。接收瓶内加入50ml4%硼酸溶液及混合指示剂5滴，并使冷凝管的下端插入液面下；将70ml40%氢氧化钠溶液慢慢经过安全漏斗进入蒸馏烧瓶中，用直火加热蒸馏30分钟，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。(接收瓶内的溶液呈蓝色)。3、

9、滴定：以0.1N盐酸标准溶液定至溶液灰色或淡紫色为终点。同时作一试剂空白测定除不加样品外，丛消化开始操作完全相同。4、计算：蛋白质(%)=（(V1-V2)N0.014F）100/mV1：样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；V2：试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，ml；N：硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；0.014：1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；m：样品的质量（体积），g（ml）；F：氮换算为蛋白质的系数。（3） 粗脂肪(EE）：粗脂肪测定采用GB/T 6433- 残余法。粗脂肪测定(残余法)一.方法原理一定量的样品经有机溶剂浸提脂肪,称剩余物重,有重量的减少求得脂肪重量计算脂肪

10、含量二、试剂：1无水乙醚。三、 仪器：脂肪提取器、水浴、干燥器；烘箱。四、 四、操作步骤：1取经脱脂处理后烘干过的滤纸，折叠成一头开口的纸包，用铅笔编号，然后称重(分析天平W1)。2取粉碎样品1g左右，小心放人纸包内，将口折封，在100烘1小时，放干燥器中冷却后，称重(W2)。3将纸包放人脂肪提取器内，加入无水乙醚，使乙醚能全部浸没纸包并有部分流人下部烧瓶中。4安装好浸提器，注意接口不漏气，水浴加热下部烧瓶(温度约50)，通水冷凝回流10小时左右，控制每小时回流10次左右。5打开脂肪提取器，取出纸包，风干+然后在105烘于1一2小时。6置于干燥器中冷却后，称重(W3)。五、计算：月旨肪=(w2

11、-w3)*100/w2-w1式中：W1：滤纸包空重(g)w2：(滤纸包+样品)重(g)W3：(滤纸包+残余物)重(g)（4）无氮浸出物(NFE)：；粗灰分测定采用GB/T 6438- 饲料中粗灰分测定。原理：试样在550度灼烧后，所得残渣，用质量分数表示。残渣中主要是氧化物，盐类等矿物质，也包括混入饲料中的沙石，土等，故称粗灰分。实验步骤：1.用分析天平称取以灼烧的坩埚质量。2.在已知质量的坩埚中称取25克式样，在电炉上低温炭化至无烟为止。3.炭化后，将坩埚移入高温炉中，与（55020）度下灼烧3h，取出，在空气中冷却约1分钟，放入干燥器冷却30分钟，称重。（5）总磷：总磷测定采用GB1189

12、3-89钼黄比色法。实验原理：将试样中有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的络合物，在波长400nm下进行比色测定。此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。实验步骤：1.试样的分解。称取25克试样于坩埚中电炉低温炭化至无烟高温炉55020度灰化3h冷却。向盛有灰分坩埚中加盐酸10毫升，浓硝酸溶液23滴，小心煮沸。用滤纸过滤于100毫升容量瓶中用热水洗涤56次用水定容，摇匀，为试样分解液。2.P标准曲线的绘制。准确移取磷标准溶液0,1,2，5,10,15毫升于50毫升容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10毫升，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0

13、毫升溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定各个溶液的吸光度。以50毫升溶液中磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。3.式样的测定。准确移取试样分解液2毫升50毫升容量瓶中加10毫升钒钼酸铵显色剂用水稀释至刻度摇匀，放置10分钟。以0毫升溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定溶液吸光度。用标准曲线查的式样分解液的含磷量。（6）钙：钙测定采用GB/T 5009.92- 高锰酸钾滴定法。原理：将试样有机物破坏，钙变成溶于水的离子，并与盐酸反应生成氯化钙，在溶液中加入草酸铵溶液，使钙成为草酸钙白色沉淀，然后用硫酸溶液溶解草酸钙，再用高锰酸钾

14、标准滴定溶液滴定游离的草酸根离子，根据高锰酸钾标准滴定溶液的用量，能够计算出式样的含钙量。实验步骤：1.试样溶液制备。称取25克试样于坩埚中炭化55020度炭化3h。向盛有灰分坩埚中加(1+3)HCL10毫升，并滴浓HNO3（23）滴，小心煮沸。用滤纸过滤于100毫升容量瓶中用热水洗涤56次用水定容即可。2.草酸钙沉淀。移取10毫升溶液烧杯中加水100毫升调PH值2.53.0（指示剂甲基红两滴，滴氨水，红变橙黄，滴盐酸呈红色）。电炉上煮沸，滴加10毫升草酸铵溶液，且不断搅拌煮沸5分钟静置过滤。3.沉淀洗涤。过滤沉淀用氨水溶液洗沉淀68次，至无草酸根离子为止。4.沉淀溶解与滴定。滤纸+沉淀烧杯中

15、硫酸溶液10毫升，50毫升水加热至80度左右。用0.0493mol/L高锰酸钾标准滴定溶液滴定至终点，30秒不退色。5.空白试验。一张滤纸干净烧杯硫酸溶液10毫升，50毫升水加热至80度左右用0.0493mol/L高锰酸钾标准滴定溶液滴定至终点。注意事项：1.每种滤纸空白滴定消耗高锰酸钾标准滴定溶液的用量有差异，至少每盒滤纸做一次空白滴定。2.洗涤草酸钙时，必须沿滤纸边缘向下洗，使沉淀集中于滤纸中心，以免损失。3.每次洗涤过滤时，都必须等上次洗涤液完全滤净后再加，每次洗涤不得超过漏斗体积的2/3.4.洗涤液氨浓度小，可边冲水边倒入废液池。（7）胆固醇：总胆固醇试剂盒测定。 参考胆固醇试剂盒说明书进行实验操作。