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1、分类号： 密级： UDC ： 编号： 硕士学位论文三七集团选择后代群体的鉴定与评价Identification and Evaluation on three populations of Panax notoginseng by mass selection 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得云南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：
2、 时间： 年 月 日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解云南农业大学有关保存、使用学位论文的管理办法及规定，即：云南农业大学有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意云南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日课题来源西南地区中药材规范化种植及大宗中药材综合利用开发技术研究项目下课题三七规范化种植基地优化升级及系列产品综合开发研究（2011BAI13B01）。三七集团选择后代群体的鉴定与评价
3、目录摘 要IIIABSTRACTV1 前言11.1 三七概况11.1.1 三七植物形态特征及生境分布11.1.2 三七表型变异类型研究11.1.3 三七分子生物学特性研究21.1.4 三七化学成分研究进展21.1.5 三七药理学研究进展21.2 集团选择21.3 DUS测试31.4 分子标记及其应用41.5 本研究的目的意义61.6 技术路线72 材料与方法82.1 试验材料82.1.1 供试材料82.1.2 主要仪器82.1.3 主要试剂82.2 试验方法92.2.1 主要农艺性状测定92.2.1.1 表型性状调查92.2.1.2 三七改良群体产量测定102.2.1.3 三七改良群体有效成分
4、的含量测定102.2.1.4 数据分析132.2.2 三七改良群体的ISSR和SRAP研究132.2.2.1 三七基因组DNA的制备及检测132.2.2.2 ISSR-PCR扩增体系142.2.2.3 ISSR引物筛选142.2.2.4 SRAP-PCR扩增程序152.2.2.5 SRAP引物筛选172.2.2.6数据分析183 结果与分析183.1 三七改良群体主要农艺性状表型一致性分析183.2 三七改良群体产量分析213.3 三七改良群体品质分析223.4 ISSR和SRAP标记对3个改良群体的特异性、一致性和稳定性分析253.4.1 DNA电泳结果253.4.2 特异性分析263.4.
5、3 一致性分析333.4.4 稳定性分析343.4.5 ISSR和SRAP相关性分析354 讨论364.1 三七集团选择群体的主要农艺性状364.2 三七集团选择群体的产量和品质364.3 三七集团选择群体的一致性和稳定性364.4 三七集团选择群体的综合评价374.5 三七DUS测试标准的指标优化374.6 三七DUS测试的分子标记方法比较374.7 三七集团选择的改良效应385结论386创新点39参考文献40附录46在读期间的学术研究49致谢50摘 要三七（Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen）为五加科（Araliaceae）人参属多年生草本植物，以根及
6、根茎入药，具有散瘀止血、消肿定痛等功效。三七已有400多年的栽培历史，但仍无选育的品种。本研究以2002年应用集团选择方法建立，并经过四代连续选择的三七紫茎群体（purple stem population, PSP）、绿茎群体（green stem population, GSP）和紧凑型群体（compact type population, CTP）为材料，以自然群体（natural population, NP）为对照，比较了集团选择后代群体的农艺性状、产量、皂苷组分，并利用ISSR和SRAP分子标记对特异性、一致性、稳定性等进行了鉴定和评价，以期为三七育种提供种质材料，探讨集团选择对三
7、七的遗传改良效应。研究结果如下：1. 经四代的连续选择，第五代三七集团选择后代群体的目标性状纯度显著高于未经选择的自然群体。紫茎群体、绿茎群体和紧凑型群体的茎高均小于自然群体约7 cm。紫茎群体的紫茎植株比例达到100.0%，较对照提高75.0%；绿茎群体的绿茎植株比例为100.0%，较对照提高70.0%；紧凑型群体的植株复叶柄与花茎夹角60的比例为76.6%，较自然群体提高41.4%。2. 集团选择后代群体的存苗率、单根干重和产量均显著高于自然群体。三个集团选择后代群体紫茎群体、绿茎群体和紧凑型群体的存苗率分别较自然群体提高11.6%、6.6%和13.5%；单根干重分别较自然群体提高13.4
8、%、19.2%和34.6%；产量分别较自然群体提高2.7%、13.4%和55.2%。3. 绿茎群体的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总皂苷含量分别为3.8%、4.9%，均显著高于自然群体，紫茎群体和紧凑型群体与自然群体无差异。4. 基于ISSR和SRAP分子标记，第四代和第五代的3个改良群体和自然群体的特异性、一致性均显著大于自然群体，3个改良群体的特异性和一致性关系是紫茎群体紧凑型群体绿茎群体。第四代与第五代的3个改良群体的Nei基因多样性指数和Shannon多样性指数变化趋势差异不显著，3个改良群体的稳定性较好。5. 将ISSR和SRAP的遗传相似性系数矩阵进行相关性分析，第四代和第五代的3
9、个改良群体的相关系数为0.5437，达到显著性水平。ISSR扩增结果的遗传相似性系数分别为0.55850.9231和0.65790.9000；SRAP扩增结果的遗传相似性系数分别在0.51320.8441和0.62580.8537。ISSR标记揭示的遗传相似性系数范围比SRAP标记广，说明ISSR标记更适用于三七集团选择后代的DUS测试分析。综上所述，3个集团选择群体均表现出矮杆、高存苗率的特点，一致性、稳定性显著提高，绿茎群体优质高产特性突出，紧凑型群体产量较高，可经进一步鉴定评价后作为三七新品种推广应用。集团选择能够显著提高三七后代群体的目标性状纯度、存苗率、单根干重、产量和遗传一致性，具
10、有良好的选择效应。关键词：三七；DUS测试；集团选择；农艺性状；ISSR；SRAP；皂苷含量Identification and Evaluation on three populations of Panax notoginseng by mass selectionYang Yun (Botany)Directed by Professor Shengchao YangABSTRACTPanax notoginseng (Burk.) F. H. Chen belongs to Panax L. genus of Araliaceae, is a perennial herbs. Its
11、root and rootstock was used as medical herbs for its hemostatic and restorative properties. According to historical records, P. notoginseng has been cultivated for more than 400 years, still has not strains now. we used purple stem population(PSP), green stem population(GSP), compact type population
12、( CTP) as material which was build by mass selection in 2002, and selected over four generation, the natural population (NP) as contrast. Compared agronomic characters, yield, saponin constituents of three populations, we also identification and evaluation distinctness, uniformity, stability by ISSR
13、 and SRAP marker, in order to provide the germplasm resources for P. notoginseng breeding, discussing the effect of mass selection. The main results were as follows:1. The purity of aim traits are significant higher than natural population by four generation selection. The height of purple stem popu
14、lation, green stem population, compact type population are lower than natural population about 7 cm. The ratio of purple stem and transition in purple stem population reaching 100.0%, increased 75.0% more than natural population. The ratio of green stem in green stem population reaching 100.0%, increased 70.0% more than natural population. The ratio of compound leaf and peduncle which angle 60 is 76.6%, increased 41.4% more than natural population.2. The deposit rate, dry root and yield of offspring are significant higher than natural population. The d
