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1、实验一、生理学实验的基本要求及基本技能一、生理实验基本要求（一）家畜生理学实验及其方法动物生理学是一门实验性科学，生理学实验是生理学教学不可分割的一部分。生理学实验研究绝大部分是在实验动物身上进行，利用一定的仪器设备和方法，人为地控制某些因素再现动物机体的某些生命活动过程，或将一些感官难以观察到的内在的、迅速而微小变化着的生命活动展现、记录下来，便于人们观察、分析和研究。动物生理学实验的方法一般根据动物的组织器官是在整体条件下进行实验，还是将其解剖取下，置于人工环境条件下进行实验，可分为在体实验方法和离体实验方法。1.在体实验方法在动物处于整体条件下，保持欲研究的器官于正常的解剖位置或从体内除
2、去（拟从反证的角度），研究动物或某器官生理功能的实验方法。在体实验又可分为活体解剖实验和慢性实验。（1）活体解剖实验 在动物麻醉（或去除脑髓）情况下，对其进行活体解剖，以便观察组织、器官机能在不同情况下的变化规律。这种方法比慢性实验方法简单，易于控制条件，有利于观察器官间的相互关系和分析某一器官功能活动过程与特点，但与正常功能活动仍有一定差别。 （2）慢性实验 是使动物处于清醒状态，观察动物整体活动或某一器官对于体内情况或外界条件变化时的反应。在慢性实验前，首先必须对动物进行较为严格的消毒、手术，根据实验目的要求，对动物进行一定处理，如导出或去除某个器官，或埋入某种药物、电极等。手术之后，使动
3、物恢复接近正常生活状态，再观察所暴露器官的某些功能、摘除或破坏某器官后产生的生理功能紊乱等。慢性实验以完整动物为实验对象，所取得的结果能比较客观地反映组织或器官在正常生活时的真实情况，比离体实验有更大的真实性，但是由于动物处于体内各种因素综合控制下，因此，对于实验结果所产生原因比较难以确定。2.离体实验方法离体实验是根据实验目的和对象的需要，将所需的动物器官或组织按照一定的程序从动物机体上分离下来，置于人工环境中，设法在短时间内保持它的生理功能，而进行研究的一种实验方法。此种方法的优点在于能拚弃组织或器官在体内受到的多种生理因素的综合作用。能比较明确地确定某种因素与特定生理反应的关系。但由于离
4、体实验的实验对象已去除了整体时中枢神经的控制，所以离体实验得出的结论还不能直接推广至整体时的情况。由于离体实验和活体解剖实验过程不能持久，实验后动物往往不能存活，故又称为急性实验法。急性实验手术毋须进行严格地消毒。(二)家畜生理实验课的目的和要求家畜生理学实验课的目的在于，通过实验使学生初步掌握生理学实验的基本操作技术，了解获得生理学知识的科学方法，以及验证和巩固生理学的基本理论。在实验过程中培养对科学工作的严肃态度，严格的要求，严密的工作方法和实事求是的工作作风。通过实验逐步培养学生能够客观地对事物进行观察、比较、分析和综合的能力以及独立思考的能力。为了实现实验课的目的，要求：1 实验前（1
5、）仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、实验步骤和操作程序。（2）结合实验内容，复习有关理论，做到充分理解。（3）预测该实验各个步骤应得的结果。（4）注意和估计实验中可能发生的误差。2实验时（1）实验器材的放置力求整齐、清洁、有条不紊。（2）按照实验步骤以严肃认真的态度循序操作，不得进行与实验无关的活动，要注意保护实验动物和标本，节省实验器材和药品。（3）仔细、耐心地观察实验过程中出现的现象；要随时记录并联系讲授内容进行思考；如：1发生了什么现象？2为什么出现这种现象？ 3这一现象有什么生理意义等。3 实验后（1）将实验用具整理就绪，所用器械擦洗干净。如有损坏缺少者，应立即报告任课教师。临时
6、借用的器械或物品，实验完毕后，点交任课教师。（2）整理实验记录，作出实验结论。（3）清晰填写实验报告，按时交给任课教师评阅。4.实验结果的处理实验过程中所得到的结果需要进行分析和整理。凡属于测量性质的结果，例如，高低、长短、快慢、轻重、多少等，均应以正确的单位和数值定量。一般凡是有曲线记录的实验，尽量用曲线记录实验结果。在曲线上应标注说明，要有刺激记号、时间记号等。有些实验测量出的结果为了便于比较、分析，可用表格或绘图表示。做表格时，应事先详细考虑，制出比较完善的表格。一般将观察的项目（例如刺激的各种条件）列在表内左侧，由上向下逐项填入。表的右侧可按时间或数量变化的顺序由左至右逐格写人。绘图时
7、，一般应注意下列各点：一、在图的旁边列出数值表格；二、横轴表示各种刺激条件，纵轴表示所发生的各种反应；三、坐标轴适当注解，包括剂量单位；四、选择大小适宜的标度以便作图，根据图的大小确定坐标轴的长短；五、绘制经过各点曲线或折线要光滑。如果不是连续性的变化，也可用柱形表示；六、在图的下方注明实验条件。 5实验报告写作要求一、示教实验或自己做的实验，均要求每人写出报告。必须用统一规定的实验报告册。二、实验报告必须按时完成，由课代表收齐交任课教师评阅。三、按照每一实验的具体要求，认真写出实验报告。写报告应注意文字简练、通顺，书写清楚、整洁，正确使用标点符号。每次写实验报告的要求如下： （一）注明姓名、
8、班次、组别、日期、室温、气压。（二）实验号数和题目。（三）实验目的。（四）实验方法：一般不必描述。如果实验仪器或方法临时有所变更，或因操作技术影响观察的可靠性时，可作简短的说明。（五）实验结果：实验结果是实验中最重要的部分。应将实验过程所观察到的现象忠实、正确地记述。否则容易发生错误和遗漏。实验结果的处理见前项要求。（六）讨论和结论： 实验结果的讨论是根据已知的理论对结果进行解释和分析。要判断实验结果是否为预期的，如果出现非预期的结果，应该考虑和分析其可能的原因。还要指出实验结果的生理意义。实验结论是从实验结果中归纳出一般的、概括性的判断，也就是这一实验所能验证的概念、原则或理论的简明总结。结
9、论中一般不要罗列具体的结果。在实验结果中未能得到充分证据的理论分析不应写入结论。实验的讨论和结论的书写是富有创造性的工作，应该严肃认真，不应盲目抄袭书本。参考课外读物应注明出处。（三）实验室守则一、遵守学习纪律准时到达实验室。实验时因故外出或早退应向教师请假。二、必须严肃认真地进行实验；实验期间不得进行任何与实验无关的活动。三、保持实验室安净。讲话要低声，以免影响别人试验。四、实验室内各组仪器和器材由各组自己使用，不得与别组调换，以免混乱。如遇仪器损坏或机件不灵，应报告负责老师或实验准备室人员，以便修理或更换，不要自行乱修。实验用的动物按组发给，如需补充使用，需经教师同意才能补领。五、爱惜公共
10、财物，注意节约各种实验器材和用品。六、保持实验室清洁整齐，不必要的物品不要带进实验室。实验完毕后，应将实验器材、用品和实验桌收拾干净，数点清楚，不可零乱。动物尸体、纸片及废品应放到指定地点，不要随地乱扔。二、常用手术器械及（一）常用手术器械滴管玻璃针金属探针气管插管蛙心夹动脉夹动脉插管咬骨钳剪毛剪手术剪手术刀颅骨钻普镊眼科镊止血剪动物生理学实验常用手术器械与医学外科手术器械大致相同，但也有一些专用器械.现仅介绍常规的手术器械。图1 常用生理手术器械1.蛙类手术器械(1)剪刀 细剪刀或眼科剪刀，用于剪神经和血管等细软组织；粗剪刀用于骨、肌肉和皮肤等粗硬组织。(2)镊子 圆头镊子用于夹捏组织和牵提
11、切口处的皮肤；眼科镊子用于夹捏细软组织。(3)金属探针 用于破坏脑和脊髓。(4)玻璃针 用于分离神经和血管等组织。(5)锌铜弓 用于对神经肌肉标本施加刺激，以检查其兴奋性。(6)蛙心夹 使用时将一端夹住心尖，另一端借缚线连于杠杆，以进行心脏活动的描记。(7)蛙板 约为20 15厘米的木板，用于固定蛙类，以便进行实验。板上有许多小孔，可用蛙腿夹将蛙腿夹住，嵌入孔内而固定之；也可用大头针将蛙腿钉在板上。制备神经肌肉标本应在清洁的玻璃板上操作，为此可在板中央嵌一玻璃片。2.哺乳类手术器械(1)手术刀 手术刀主要用来切开皮肤和脏器。手术刀片有圆刃、尖刃和弯刃三种。可根据手术部位、性质的需要自由拆装和更
12、换变钝或损坏的手术刀片（图2）。持刀的方式有4种（图3），其中“执弓式”是一种常用的的持刀方式。其动作范围广泛而灵活，用于腹部、颈部或股部的皮肤切口。(2)手术剪和粗剪刀 手术剪分钝头剪、尖头剪。其尖端有直、弯之分。主要用于剪皮肤、肌肉等软组织。也可用来分离组织，即利用剪刀尖插入组织间隙，分离无大血管的结缔组织。另外，还有一种小型的眼科剪，主要用于剪血管和神经等软组织。一般说来，深部操作宜用弯剪，不致误伤。剪线大多为钝头直剪，剪毛用钝头、尖端上翘的。正确执剪姿势是用拇指与无名指持剪，食指置于手术剪的上方（图4）。粗剪刀，为普通的剪刀。在蛙类的实验中，常用来剪蛙的脊柱、骨和皮肤等粗硬组织。(3)
13、手术镊 常用的手术镊有无齿镊和有齿镊两种，用于夹住或提起组织，以便剥离、剪断或缝合。有齿镊用于提起皮肤、皮下组织、筋膜、肌腱等较坚韧的组织，使其不易滑脱。但有齿镊不能用以夹持重要器官，以免造成损伤。无齿镊用于夹持神经、血管、肠壁或其他脏器，较脆弱组织，而不致使之受损伤。正确执镊方法如图5，用力适当地把持着。(4)血管钳 血管钳又称止血钳，有直、弯、带齿和蚊式钳等数种。主要用于夹血管或止血点，以达止血的目的。也用于分离组织、牵引缝线，把持或拔缝针等。正确持钳和持剪方法相同（图6）。开放血管钳的方法是利用右手已套入血管钳的拇指与无名指相对挤压，继而两指向相反的方向旋开，放开血管钳（图7）。(5)骨
14、钳 在打开颅腔和骨髓腔时，用于咬切骨质。(6)气管插管 急性动物实验时，插入气管，以保证呼吸通畅，或做人工呼吸。将一端接气鼓或换能器，可记录呼吸运动。(7)血管插管 有动脉插管和静脉插管。一些小型动物的动脉插管可用16号输血针头磨平来替代。在急性实验时插入动脉，另一端接压力换能器或水银检压计，以记录血压。静脉插管插入静脉后固定，以便在实验过程中随时用注射器向静脉血管中注入药物和溶液。(8)金属探针 专门用来毁坏蛙类脑和脊髓。(9)玻璃分针 专用于分离神经与血管等组织。(10)蛙心夹 使用时将夹的前端在蛙心室舒张时夹住心室尖，尾端用线系在换能器（或扛杆）上。(11)动脉夹 用于阻断动脉血流。(1
15、2)蛙板 一块20 cm15 cm的木板，用于固定蛙类。各种手术器械使用后，都应及时清洗，齿间、轴间的血迹也应用小刷刷洗干净。洗净后用干布擦拭干，忌用火烤烘干或重击。久置不用的金属器械应擦油保护。 1、安刀片法 2取刀片法 1、执弓式 2、握持式 3、执笔式 4、反挑式图 2 安装、取下刀片法 图3 执刀方法图4 手术剪的握持方法 图5 镊子的握持图 6持钳法右手松钳法 左手松钳法图7 松钳法三、生理实验常用实验动物及其控制方法（一）验动物捉拿和固定方法1.蛙 实验者一手拇指、食指和中指控制蛙两前肢，无名指和小指压住两后肢（图 11）。图11 蛙和蟾蜍的捉拿方法2.小鼠、大鼠 实验者右手捉住小鼠尾，鼠会本能地向前爬行。左手攥紧鼠颈背部皮肤，使其腹部向上，拉直躯干，并以左手小指和掌部夹住其尾固定在左手上（图12）。可作腹腔麻醉。亦可用金属筒、有机玻璃筒或铁丝笼式固定器固定，露出尾部，作尾静脉注射。捉持大鼠的方法基本同小鼠。大鼠在惊恐或激怒时会咬人，
