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1、学生设计性实验论文题目：水中细菌总数的测定姓名学号20121321专业生物技术班级123相关实验课程名称微生物学实验指导教师及职称实验学期20132014学年一学期太原师范学院教务处编印水中细菌总数的测定摘要水是微生物广泛分布的天然环境。各种天然水中常含一定数量的微生物。水中微生物的 主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自 下水道的污染物和人畜的排泄物等。细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分， 培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得ImL水样所含菌落的总数。本实验只包括一群能在 营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。目前一般是采用普通牛
2、肉膏蛋白胨琼脂培 养基。通过此方法我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是 否受到污染。引言水资源是人类生产生活的最关键资源。如今，生态环境遭到严重破坏，水体污染严重， 水资源的保护和水污染的治理成为现代社会最关注的问题。水污染不仅加剧了灌溉可用水资 源的短缺，成为粮食生产用水的一个重要制约因素，而且直接影响到饮水安全、粮食生产和 农作物安全，造成了巨大经济损失，因此，必须对生活用水及其水源水进行严格的细菌学检 查。细菌总数的测定是测定水样是否符合饮用水标准，被测水样中的细菌总数可说明其被有 机物污染的程度细菌数越多，有机物质含量越大。我国饮用水的卫生学标准：在ImL自
3、来水 中细菌总数不得超过100个。关键词水中细菌总数 肉膏蛋白胨琼脂培养基 水资源保护目的及意义1、学习水样的采取方法以及检测水中细菌总数的方法。2、了解检测水中细菌总数的原理及其应用中的优、缺点。3、了解水质评价的微生物学卫生标准，明白其应用的重要性。基本原理水中细菌总数可以说明被有机物污染的程度，细菌数越多，有机质含量越大。细菌总数是指1mL水样在普通营养琼脂培养基中，37C经24h培养后所生长的菌落数。 本实验采用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种 培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的
4、培养基平板上生长 出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般采用前一般是采用普通肉 膏蛋白胨琼脂培养基。器材及培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、自来水、灭菌培养基、灭菌三角烧瓶、灭菌吸管操作步骤1、水样的采取先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,在开放水龙头使水流5min后在火焰旁边打开灭 菌三角烧瓶瓶塞，以其接取水样，迅速地进行分析。2、用灭菌吸管吸取1mL水样注入灭菌培养皿中，共作两个平皿。3、分别倾注约15mL已溶化并冷却到45C左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基， 并立即放在平整的桌面上，做平板旋转摇动，使水样与培养基充分混匀。4、另取一灭菌培养皿，不加水样，倾注牛肉膏蛋白胨琼脂
5、培养基15mL，作 空白对照。5、培养基凝固后，倒置于37C的环境中，培养24h后进行菌落计数。两个平板的平均菌落数，即为1mL水样的细菌总数。结果分析数据：平板菌落数1mL自来水中细菌总数17263254分析:可以看出，自来水中细菌在普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上可生长出菌落，数目 大约为63个，自来水是把水源水从江河湖泊中抽到水厂，然后经过沉淀、过滤、消毒、入库（清 水库），最终分配到水龙头整个过程经多次水质化验，确保符合饮用水标准，即1mL自来水中 细菌总数不得超过100个经过处理的自来水中仍有细菌存在,主要是一些大肠杆菌为主的 细菌,在一定的范围内对人体是无害的。注意事项1、培养基要
6、到45C50C才能倒入培养皿，太热会将自来水中的细菌烫死。2、自来水与牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的混合液不能超过培养基的1 / 2。3、在将自来水与牛肉膏蛋白胨琼脂培养基混合时要快一些，以防杂菌的污染；同时太慢 会造成牛肉膏蛋白胨琼脂培养基凝固，自来是与之混合不均，使菌落生长在一块成为 菌苔。4、在混合时要摇均匀，以使菌落能较好生长。讨论人类对环境的保护归根结底是基于保护地球上日益枯竭的资源，保护人类生存发展的 最起码条件一一保护水资源首当其冲。首先，要树立惜水意识，开展水资源警示教育。长期以来，大多数人们普遍认为水是 取之不尽，用之不竭的“聚宝盆”，使用中挥霍浪费，不知道自觉珍被屏蔽广告惜。其
7、实，地球上水资源并不是用之不尽的，尤其是我国的人均水资源量并不丰富，地区分布也 不均匀，而且年内变化莫测，年际差别很大，再加上污染严重，造成水资源更加紧缺的状 况，黄河水多处多次断流就是生动体现。人们一定要建立起水资源危机意识，把节约水资 源作为我们自觉的行为准则，采取多种形式进行水资源警示教育。其次，必须合理开发水资源，避免水资源破坏。水资源的开发包括地表水资源开发和 地下水资源开发。水资源属于国家所用，因此，生产和生活用水的开发必须遵守中华人 民共和国水法的有关规定，作到全面规划，统筹兼顾。在开采地下水的时候，由于各含 水层的水质差异较大，应当分层开采；对已受污染的潜水和承压水不得混合开采
8、；对揭露 和穿透水层的勘探工程，必须按照有关规定严格做好分层止水和封孔工作，有效防止水资 源污染，保证水体自身持续发展。现代水利工程，如防洪、发电、航运、灌溉、养殖供水等在发挥一种或多种经济效益 的同时，对工程所在地、上下游、河口乃至整个流域的自然环境和社会环境都会产生一定 的负面影响，也可能造成一定范围内水资源破坏，因此，自20世纪70年代以来，许多国 家对水利工程进行环境评价。我国要求在水利工程可行性研究阶段即进行环境评价，大型 工程和一般中型工程要编写环境影响报告，对环境影响较小的中型工程和小型工程要编写 环境影响评价表。无限度的乱砍乱伐，造成植被严重破坏，对水土保湿及水资源的地表埋 藏
9、也会造成一定的影响。第三，提高水资源利用率，减少水资源浪费。有效节水的关键在于利用“中水”，实 现水资源重复利用。如果中水利用能在全社会范围内通行，不仅能带来可观的经济效益和 环境效益，又能令社会形成一种珍惜水资源的良好风气。城市用水定额管理是国际上通行 的办法，它是在科学核定用水量的前提下，坚持分类对待的原则，市民生活用水、工商企 业用水、机关事业团体用水实行不同的水价，定额内平价，超额部分适当加价，以培养公 民节约用水的习惯。在节约用水资源的同时应避免无效浪费。北方的冬季，水管很容易冻裂，造成严重的 漏水，应特别注意预防和检查；随着社会经济的发展和城市化进程的加快，为了缓解水资 源紧张的情
10、况，要大力抓好节约和保护水资源工作。在水资源的配制上，市场机制通常被 管制方法所替代，当前应当转变观念，认识到水资源的自然属性和商品属性，遵循自然规 律和价值规律，确实把水作为一种商品，合理应用市场机制配置水资源，减少资源浪费。第四、进行水资源污染防治，实现水资源综合利用。水体污染包括地表水污染和地下 水污染两部分，生产过程中产生的工业废水、工业垃圾、工业废气、生活污水和生活垃圾 都能通过不同渗透方式造成水资源的污染，长期以来，由于工业生产污水直接外排而引起 的环境事件屡见不鲜，它给人类生产、生活带来极坏影响，因此，应当对生产、生活污水 进行有效防治。在城市可采取集中污水处理的途径；工业企业必
11、须执行环保“三同时”制 度；生产污水据其性质不同采用相应的污水处理措施。总之，我们必须坚决执行水污染防 治的监督管理制度，必须坚持谁污染谁治理的原则，严格执行环保一票否决制度，促进企 业污水治理工作开展，最终实现水资源综合利用。水是地球生物赖以存在的物质基础，水资源是维系地球生态环境可持续发展的首要条 件，因此，保护水资源需要我们每一个人贡献自己的一份力量，从身边的小事所起，从我 们的每一天中努力，我相信，我们的未来世界将更加美好！参考资料1 陈声明，刘丽丽微生物学实验研究方法.北京：人民教育出版社，19822 李根生.干燥培养基恩德制造及应用.上海：上海科学技术文献出版社，19943 郝士海.现代细菌学培养基和生化试验手册.北京：中国科学技术出版社，19924 罗雪云等食品卫生微生物检验标准手册.北京：中国标准出版社，19955 沈萍，范秀容等.微生物学实验（第四版）.北京：高等教育出版社.1999.1821836 王子石，秦钰惠，郑乃彤.生活饮用水卫生标准2007.7.17 沈萍，陈向东微生物学实验M.4版北京：高等教育出版社，20078 张清敏，李洪远，王兰环境生物学实验技术2005
