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1、精品文档流式细胞仪细腕分选祥品偏转板喷1.光电倍増昔观测点5EZI5工作原理将待测细胞染色后制成单细胞悬 液。用一定压力将待测样品压入流动室， 不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液 管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成 一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品 高速流动，组成一个圆形的流束，待测细 胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检 测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光 源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在 样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的 照射下，产生散射光和激发荧光。这两种 信号同时被前向光电二极管和 90方向 的光电倍增管接收。光散射信号在前向小 角度进行检测，这种信号基本上反映了细 胞
2、体积的大小；荧光信号的接受方向与激 光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带 通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧 光信号。这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍 增管接收后可转换为电信号，再通过模数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数 字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，液可 以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表 达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024 通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据，既可以单独显示每个参数 的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频 电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将 这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转， 落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。
