《纸片法KB药敏实验原理及实际操作方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《纸片法KB药敏实验原理及实际操作方法（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、纸片扩散药敏试验的原理：将含药物的纸片贴在接种有待测菌的固体 培养基上，通过药物在培养基上的扩散，观察是否出现抑菌环，推断 是否抑制细菌的生长。药物扩散的距离越远，药物浓度越低抑菌能力 越强，因此可根据抑菌环的大小，判定药物对细菌的抑制作用强弱。药敏试验根据美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行。本实验通过纸片药敏试验法观察多酸化合物对细菌有无抑制作用， 为试管二倍稀释法提供有效基础数据。用无菌棉拭子蘸取已经校正的0.5麦氏比浊浓度的菌液，挤掉多 余菌液。用棉拭子涂布整个MH培养基表面，每次将平板旋转60涂 抹三次，最后沿周边擦绕两圈，以保证菌液涂抹均匀。待平板上的水分 被琼脂
2、完全吸收后贴含药纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面， 纸片一贴后不可再拿起。每个平板贴 5张纸片，纸片间距不少于 24mm， 纸片中心距平皿边缘不少于15 mm。在菌接种后15 min内贴完纸片。 将平板反转，37C恒温孵育1824h后取出，用游标卡尺测量抑菌圈 直径，由平板背面测量最接近的整数毫米数并记录，每个平板各设三个 平行组平板，测量抑菌直径时，应取三个平板的平均值为最终结果。抑 菌环边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。每次药敏试验用大肠杆菌 ATCC25922 和金黄色葡萄球菌 ATCC25923做质控。药敏判读标准根据CLSI标准（2009年）所载受 试药对质控菌的抑菌环直径范围
3、作为实验质控标准（判读标准见表 5-2）84。表5-2纸片扩散法一用质控菌株抑菌环直径m）允许范围监测抗菌药物敏感性试验准确性Table 5-2 Disc diffusion test according the admissible range of quality-control strains inhibition zone diameter to monitor the accuracy of antibioticssusceptibility test (mm)抗菌药物纸片含药量(Pg)抑菌环直径(mm)SIR大肠埃希菌ATCC25922金黄色葡萄球菌ATCC25923KF30三1815-17W1416-2227-35AMP10三1714-16W1328-3527-28CIP5三2116-20W1530-4022-30NOR5三1713-16W1215-2129-37
