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1、发病情况及诊断本病多发于成年鸡 ,鸡群一般表现正常 ,少数发病。病鸡精神沉郁、贫血、泄殖腔周围羽毛脏乱。鸡产蛋量下降 ,产小蛋 ,蛋壳薄 ,颜色变淡。剖检死亡鸡体况中等 ,嗉囊无食物 ,脾脏肿大 ,为正常的 2 3倍 ,脾脏浆膜面或切面有多处苍白色病灶 ;肝脏异常肿大 ,浆膜下有许多小的出血点或坏死灶 ,肠道特别是十二指肠呈鸡大肝大脾病的诊治鸡的大肝大脾病(B ig liver and sp leen,BLS) 是鸡的一种新的病毒性传染病, 以感染白色产蛋肉用种母鸡为主, 也发生于产棕壳蛋的蛋鸡品种。本病多发生于夏秋季节, 20 58 周龄鸡易感, 传播很快, 12 周可传遍全群, 造成产蛋率
2、急剧下降或达不到产蛋高峰期, 病程持续数周, 死亡率约1% , 给养殖户造成很大经济损失。1998 年6 月下旬, 在我市小店区发生了本病的散在流行, 经确诊后, 用自制纯中药散剂“鸡宝五五一”治疗, 除个别病重鸡外, 全部痊愈, 治愈率在98% 以上, 并恢复到原有产蛋水平。1病原鸡大肝大脾病病原为鸡大肝大脾病病毒, 主要侵害病鸡靶器官和免疫器官, 其中胸腺和盲肠扁桃体受损最早也最严重, 其次是脾和腔上囊等器官, 发病后会导致病鸡免疫功能严重下降。2流行病学鸡的大肝大脾病一般在夏秋季节发生, 20 58周龄易感, 临床症状在性成熟前后出现。本病传播很快, 1 2 周即可传遍全群, 主要表现是
3、免疫功能降低, 产蛋率急剧下降或达不到产蛋高峰期。3症状精神沉郁, 食欲不振, 排黄色水样稀粪, 鸡冠和肉髯发白, 产蛋率急剧下降, 有的病鸡突然死亡, 死后仰面倒地。4病理变化解剖病死鸡, 可发现肝极度肿大, 为正常的2 3倍, 黄褐色; 被膜上有针尖大或针头大出血点, 还散在有绿豆大小灰白色结节, 切面有多量白色小点; 脾肿大, 暗红色, 为正常的3 4 倍, 表面有大小不均的灰白色斑点; 肾肿胀, 出血; 盲肠扁桃体肿胀出血; 卵巢萎缩; 肠道弥漫性出血。5诊断根据发病季节、发病鸡群年龄、临床症状和病理变化可作出初步诊断, 结合实验室免疫荧光技术诊断可确诊, 即用已知阳性抗体测定病鸡肝、
4、脾病料中BLS 抗原, 反应为阳性即可确诊为本病。6治疗611对本病目前尚无有效的免疫预防措施, 加强鸡舍环境卫生定期消毒, 是减少病毒的传播和疾病发生的关键。612在治疗方面, 本病用抗生素治疗无效, 中药可用“鸡宝五五一”, 其主要组成有黄芪、板蓝根、丹参、女贞子、补骨脂等, 内含多种抗病毒成分, 具有清热解毒、增强免疫功能、提高生产力的作用。本药为纯中药散剂, 每代150 g, 可添加于25 kg 饲料中, 3 5d 为1 疗程。预防用量可减半。7病例1998 年6 月, 太原市北格镇张花村张某饲养海兰褐蛋鸡500 羽, 正值产蛋高峰期, 6 月下旬发病, 6月25 日来我所求诊。主诉:
5、 鸡群于6 月3 日前发病,病鸡采食量下降, 有的不食, 拉黄色水样稀粪, 鸡冠发白, 有2 羽鸡已死亡, 产蛋率已由90% 多降到60% , 用抗生素治疗无效。剖检: 肝脏黄褐色, 极度肿大, 为正常的3 倍左右, 切面外翻, 被膜有少量出血点, 切面有多量白色小点; 脾肿大, 暗红色, 约为正常的3 倍大, 表面有大小不均的灰白色斑点; 盲肠扁桃体肿胀、出血; 肠道弥漫性出血、坏死, 并伴有卵黄性腹膜炎, 卵巢萎缩。根据发病鸡群年龄、发病季节、临床症状和病理变化可作出初诊, 结合实验室诊断确诊后, 用纯中药散剂“鸡宝五五一”治疗, 1 疗程后, 除5 只病重鸡死亡外, 全部治愈, 月产蛋率
6、已有大幅回升, 为巩固疗效, 减半药量继用1 疗程后, 产蛋率已基本恢复到原有水平。追访, 再未发生本病, 且生长、生产性能良好。8小结鸡的大肝大脾病是鸡的一种新的病毒性传染病, 主要感染夏秋季节高产蛋鸡, 本病传播很快, 临床上以造成产蛋率争剧下降为主要特征, 并伴有约1% 的死亡率, 在防治上应采取综合措施, 加强鸡舍卫生, 定期消毒, 减少病毒传播。治疗方面用抗生素无效, 用自制纯中药制剂“鸡宝五五一”拌料, 正常添加1 疗程后, 再减半药量用1 疗程, 能有效修复受损的免疫器官和组织, 增强免疫功能, 并能显著提高恢复后期的产蛋性能, 其治愈率可达98% 以上, 产蛋率基本恢复到原有水
7、平。摘要对自然感染和人工感染的大肝和大脾病鸡进行了超微结构的研究。根据超微结构的变化, 肝和脾是本病的靶器官,有时胰也受到损害。主要特征性变化是: 肝和脾细胞的核周间隙增加, 核染色质边移, 线粒体浓缩, 内质网扩张和空泡化,有时细胞器消失。在自然病例和接种后4 周病鸡的肝和脾细胞的内质网池和胞浆中均见有大量病毒颗粒, 间质有大量浆细胞、淋巴细胞和巨噬细胞增生。鸡大肝和大脾病(b ig liver and sp leen, BL S) 是鸡的病毒性传染病, 1980 年在澳大利亚首先发现,1988 年由Handlinger 1 4 等进行了描述。BL S 病发生于白色产蛋肉用种母鸡和产棕色蛋的
8、蛋鸡品种, 主要发生在性成熟前后, 20 周龄左右。主要临床症状表现为摄食时间延长, 厌食, 精神抑郁, 鸡冠和肉髯苍白, 约有5% 10% 母鸡产蛋率下降, 死亡率为1% 并持续数周。剖检变化主要表现为肝、脾肿大, 脾肿大是BLS 病最可靠的肉眼病变指标。该病在澳大利亚已造成重大的经济损失 5 10 。1993 年以来, 南京农业大学动物病理实验室对该病进行流行病学调查、血清学诊断及病理学研究, 并首先证实我国确有此病发生。本试验是在组织病理学研究的基础上进行超微结构研究, 以进一步弄清BL S 病主要靶器官病理变化特征, 揭示其病理发生和发展规律, 为诊断和防制该病提供依据。1材料和方法1
9、11自然感染病例采自我国部分省市的肉用种鸡场, 血清学检查呈BLS 抗原或抗体阳性。112人工接种病例选用18 周龄白色艾维茵父母代肉用种鸡16 只, 分成2 组, 每组8 只。第1 组接种标准BL S 阳性病料(来自澳大利亚Ingham s 实验室) , 第2 组接种国内采集的阳性病料, 均为静脉接种, 015 mL只。于接种后第2, 4, 6, 8, 10, 12, 16 和18 周扑杀。另选相同品种和日龄的健康阴性鸡(血清学：鸡大肝和大脾病组织超微结构的研究试验BL S 抗原或抗体呈阴性) 作对照。113电镜样品的制备在组织病理学研究的同时, 采取肝、脾、胰及骨髓等组织作常规电镜检查。将
10、标本切成1mm3 大小, 用体积分数为3%的戊二醛固定2 h, 然后用011 mo lL pH 714 的磷酸缓冲液洗涤; 用体积分数为1% 的锇酸固定2 h, 酒精逐级脱水, 无水丙酮置换, Epon 812 聚合和包埋; L KB 型超薄切片机切片, 醋酸铀柠檬酸铅对比染色, Jeal 100 CX 型透射电镜观察和照相。2结果211BLS 病鸡肝脏的超微结构变化接种后第2 周肝细胞变化不明显, 第4 周开始出现病变, 表现为肝细胞大小不一致, 出现暗淡两种类型的细胞, 肝细胞内有空泡状结构; 线粒体浓缩、深染, 有的萎缩, 有异型线粒体; 内质网池扩张、空泡化, 池内疑似有病毒颗粒; 肝
11、细胞核呈多形性, 核膜凹陷, 染色质边移, 核仁数目增多; 间质充血, 有浆细胞和淋巴细胞增生(图1, 2)。接种后第8 和10 周, 肝实质出血; 肝细胞核增大, 核仁边移; 染色质稀疏, 电子密度降低; 核周间隙增加, 线粒体数目减少; 细胞器部分消失, 有大小不一的透明区(细胞坏死) , 溶酶体数目增加(图3)。接种后第16 周, 肝细胞体积增大; 核仁数目增多、边移; 染色质浓染、边移; 核质透明, 电子密度降低; 胞浆透明呈溶解状态, 细胞器完全消失, 并出现凋亡小体; 整个过程都看到浆细胞、淋巴细胞增生, 后期出现巨噬细胞。212BLS 病鸡脾脏的超微结构变化接种后第4 周开始出现
12、病变, 主要表现为浆细胞、淋巴细胞和巨噬细胞增生。可看到大部分增生的细胞体积增大; 核周间隙增加; 核仁增大, 数目增多; 染色质边移; 核质呈空泡状; 胞浆部分溶解, 后期细胞器消失; 内质网扩张、空泡化; 胞浆中有大量圆形、大小稍有差异的病毒颗粒(图4, 5)。213BLS 病鸡胰脏的超微结构变化胰腺细胞的胞核大小不一, 核仁数目增多, 染色质边移; 胞浆中大部分粗面内质网扩张、空泡化, 有些部位胞浆呈均质状; 细胞器消失, 酶原颗粒大小不一、深染; 间质血管充血, 腺泡之间有浆细胞、淋巴细胞增生214BLS 病鸡骨髓的超微结构变化浆细胞呈结节状增生, 浆细胞胞浆内粗面内质网扩张、空泡化;
13、 核靠近胞浆的一侧, 染色质边移,排列成车轮状, 有时核仁数目增多; 骨髓中红细胞形态各异, 大小不一, 有些红细胞内有表面膜小体(细胞溶酶体) (图7)。自然病例肝、脾的超微结构变化, 基本上与人工接种病例相一致。3讨论通过超微结构的研究, BL S 病主要是肝脏和脾脏受损害。病变出现在接种后第4 周, 并呈梯度阶段性变化; 初期内质网扩张、空泡化, 线粒体浓缩,随后胞浆中部分细胞器消失, 最后出现凋亡小体等,说明肝脏和脾脏是本病的靶器官 12 15 。鸡大肝和大脾病组织超微结构的研究89从BL S 病超微结构的特征来看, 病毒侵害肝脏和脾脏后所引起的浆细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的大量增生是属
14、于炎症性增生, 而不属于肿瘤性增生, 因为增生的细胞形态较一致, 分化完全, 核型规则, 核仁的大小和数目正常, 无核分裂相等。况且本病有不同的病变阶段, 增生的细胞类型也有所不同, 这也是与肿瘤性疾病的不同之处。人工接种BL S 病料后第4 周, 在负染和超薄切片中可看到大量病毒颗粒。这与血清学(琼扩试验) 检查时, 在接种后第4 周抗原和抗体值最高相符合 16 , 也就是说这阶段是发现病毒的最佳时期。有关病毒的性质, 有待进一步研究。电镜下, BL S 病除肝和脾脏有病变外, 还见有骨髓浆细胞增生, 红细胞胞浆内有表面膜小体(细胞溶酶体) 等。这说明病毒对骨髓和红细胞有一定的损害, 但这些变化还有待追根溯源深入研究。
