《HIV初筛实验室样品采集和处理程序.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HIV初筛实验室样品采集和处理程序.doc（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、南宁市红十字会医院检验科HIV筛查实验室文件编号：第1页 共3页HIV筛查实验室样品采集和处理程序2011年10月版第0次修订实施日期：2011年10月18日1 范围本文件规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。2 样品种类及相应的用途l 全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。l 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。l 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。l 全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。l 全血可用于HIV-
2、1分离培养。3 操作步骤3.1 采样前准备根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。l 采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，标记的内容至少应包括：患者姓名、送检科室、床号3.2 样本采集和处理l 抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼
3、酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀68次，备用。l 末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。1岁以下儿童采用足跟部）。用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，备用。l 血浆：将采集的抗凝全血15003000r/min离心15min，上层即为血浆，吸出置于合适的容器中，备用。l 血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取510ml静脉血，室温下自然放南宁市红十字会医院检验科HIV筛查实验室文件编号：第2页 共3页HIV筛查实验室样品采集和处理程序2011年10月版第0次
4、修订实施日期：2011年10月18日l 置12h，待血液凝固、血块收缩后再用15003000r/min离心15min，吸出血清，置于合适的容器中，备用。l 根据检测要求选用适当的抗凝剂，如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。l 采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里，妥善处理，防止发生职业暴露。l 样品采集后处理、保存、运输的时限和条件，因不同的检测项目而异，应参见不同检测项目要求。l 采样之后，应及时在登记本上作记录，记录的内容至少包括：患者姓名、性别、年龄、送检科室、床号、
5、送检项目、标本类别、采集时间、采集者3.3 样品的保存l 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于28， 一周以上应存放于-20以下。l 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4，3个月以内应存放于-20以下。3个月以上应置于-70以下。l 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，一般实验室保存期为7天。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。3.4 样品的运送l 应符合生物安全要求；要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。l 应采用三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品
6、唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签，注明数量、收样和发件人及联系方式，同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止重压”等字样，还应易于消毒。南宁市红十字会医院检验科HIV筛查
7、实验室文件编号：第3页 共3页HIV筛查实验室样品采集和处理程序2011年10月版第0次修订实施日期：2011年10月18日l 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下（1825）或4（特殊要求时）运送。用于病毒载量检测的样品应在-20以下运输。DBS样品应在室温下（1825）运送。每一件包装的体积以不超过50mL为宜。l 运送样品必须有记录。3.5 样品的接收l 样品接收必须在具有处理感染性材料能力的实验室内，由经过培训的、穿戴好工作服、戴好乳胶手套的工作人员接收。l 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚
8、存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。l 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。l 接收样品时应在样本送检登记本上填写相应的信息，至少应包括：送检人、接收时间、接收人。3.6 样本检测后的处理 l 检测后的标本暂存于标本冰箱7天，以备核查；对于可疑阳性标本，用一次性离心管（子弹头）装血清标本，留存血清量600800 ul，将标本冷冻保存于免疫室冰箱内，保存标本应标示清楚：受检者姓名、标本类型、采集时间；并在“HIV可疑标本送检筛查结果记录本”上作相应的记录。l 血液标本存放7天后处理时，先用5000 mg/L次氯酸钠溶液浸泡2小时以上，然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾，送专门存放医用垃圾处，交接给南宁市医疗垃圾处理中心统一焚化处理，并做好登记。4 支持性文件全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版）5、相关记录科室样本送检登记本HIV可疑标本送检筛查结果记录本废弃物处理登记本
