试验动物保定方法.doc

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1、一、实验动物的捉拿、固定及给药方法 1.小白鼠:右手抓住鼠尾,放在台上或鼠笼盖铁丝网下,然后用左手拇指沿其背部向前抓住其颈部皮肤,并以左手的小指和掌部夹住其尾固定在手上。另一抓法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾尖,后用手掌及小指夹住其尾巴,再以拇指及食指捉住其颈部皮肤。前一方法易学,另一方法稍难,但便于快速捉拿给药。 小鼠灌胃(PO)法:将小鼠固定后,右手持装有灌胃器的注射器,自口角外插入口腔,沿上颚插入食道。如遇阻力,可将注射器拔出再插,以免穿破食道或误入气管,造成动物死亡。灌胃容量一般为0.10.2ml/10g,不超过0.5ml/只。 小鼠皮下注射法:两人合作,一人一手抓住小白鼠头部皮

2、肤,另一手抓住鼠尾。另一人注射药物。注射部位在背部皮下组织。如一人操作时,左手抓鼠尾,让鼠爬在铁丝笼上,右手将抽好药液的注射器针头插入背部皮下组织。如一人操作时,左手抓鼠尾,让鼠爬在铁丝笼上,右手将抽好的药液的注射器针头插入背部皮下将药注入。注射量不超过0.5ml/只。 小鼠腹腔注射法:左手持鼠,右手持注射器从下腹左或右侧(避开膀胱)朝头部方向刺入,宜先刺入皮下,经23mm再刺入腹腔,此时针头与腹壁的角度约45度。针尖插入不宜太深或太近上腹部,避免刺破内脏,注射量一般为0.10.25ml/只。 小鼠尾静脉注射法:将小鼠置于固定器内,使其尾巴露出,用70%酒精擦尾部,或将鼠尾浸入50热水中。待尾

3、部静脉扩张后,左手拉尾,右手进针。注射容量不超过0.5ml/只。 2.兔:用手抓起它脊背近后颈处皮肤,抓的面积越大其持重点越分散。如家兔肥大,应再以另一手托住它的臀部,将持重点承托于手上。 将兔作仰卧位,一手仍抓住颈部皮肤,另一手顺其腹部抚摸至膝关节,压住关节。另一人用绳带捆绑四肢,使兔腹部向上,固定在兔手术台上。头部则用兔头固定夹固定。 兔灌胃法:二人合作,一人固定家兔于两膝之间,一手固定兔头,使头部后仰,另一手将开口器插入兔口,并向后翻转数次,使兔舌伸直并压在开口器下面。另一人将胃管从开口器中央孔也插入口内缓慢插入食道和胃。插管时感觉顺利,动物不挣扎,也不屏气,表示胃管在胃内,为慎重起见,

4、将胃管外端放入水中,当兔呼气时,未见气泡出现,即证实胃管在胃内,然后将药液缓缓经胃管注入。灌胃容量一般为10ml/kg。 兔耳静脉注射法:两人合作,一人固定兔身及兔头,一人将兔耳后缘之毛拔去,显露耳缘静脉,用手指轻弹耳壳,使血管扩张。助手左手指压住耳缘静脉根部,待血管明显充血后,将抽好药液的注射器从静脉近耳尖处插入血管。针头刺入血管以后,以左手拇指和食指将针头与兔耳固定,不让针头滑动。放开耳根静脉手指压力,即可注放药液,若针头确实在血管内,则推药通畅无阻力,并见血液被药液冲走,如沆入皮下则耳壳肿胀、推注不顺,需拔出重新注射。注射守毕,用手指按在针眼上,然后将针尖抽出,并继续用手指或加棉球轻轻按

5、压23分钟,以防出血,注射量0.52.5ml/kg。 3.大白鼠:以左手或持夹子抓住鼠尾,左手戴防护手套或用厚布盖住鼠身作防护,握住其整个身体,并固定其头骨,防止被咬伤,注意不要握力过大,勿捏其颈部以免窒息致死,根据实验需要可指定于大鼠固定笼内或用绳绑其四肢,固定于大鼠手术台上。 大白鼠灌胃、腹腔注射、静脉注射均可一人操作,基本方法与小鼠相似。也可将大鼠腹股沟切开,从股静脉注射药物,也可从外颈静脉插管给药(麻醉后)。 4.豚鼠:以右手抓住豚鼠头颈部,将其两前肢挟在豚鼠头与右手拇指和食指之间,整个抓住颈胸部(不要抓得太紧以免窒息),左手抓住两后肢,使腹部向上,而后进行操作。 豚鼠腹腔注射可二人操

6、作,一人固定,将动物置于仰卧位,另一人注射。雄性豚鼠可作阳茎背静脉注射给药。 5.狗:绑狗嘴法:先将绳子绕过狗嘴,在嘴上部打一活节,再绕到嘴下部打结,最后绕到颈后打结固定,才能避免绳子脱掉。 固定法:急性实验时,将麻醉狗固定在手术台,四肢绑上绳。前肢的两条绳在狗背后交叉,然后将对侧前肢压在绳下面,再将绳拉紧,缚在手术台边缘楔子上。头部用背夹或绳扎其颌骨固定之。 狗静脉注射法:常用的注射部位是后肢小隐静脉,该血管从后肢外踝后侧走向外上侧,也可用前肢静脉,在脚爪上方背侧正前位,静注时先局部剪毛,一人用手抓紧腿使血液回流受阻,此时可看出血管走向。另一人随即将药液注入静脉。附:资料片实验动物捉拿:1.

7、小白鼠的捉拿 2.豚鼠的捉拿 3.家兔的捉拿 4.猫的捉拿 5.犬的捉拿实验动物给药: 1.灌胃给药 2.皮下注射 3.肌肉注射 4.静脉注射 5.腹腔注射 6.蟾蜍的淋巴囊注射实验动物的性别辨认实验动物的标号 有口服和灌胃两种方法。适用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗等动物。口服法可将药物混入饲料中或溶于饮水中任动物自由摄取,此法简单,也不会因操作失误而导致动物死亡。但由于动物的状态和嗜性的不同,饮水和饲料的摄取量不同,大部分很难准确掌握给药量。另外,室温下易分解物质的给药,小量被检物质的给药,都很难准确平均添加。为保证准确掌握给药量,则常用灌胃法。灌胃法由于能掌握给药时间,故能记录发现症状的时间

8、经过。灌胃法与添加给药方式相比,每天除给药耗费时间以外,还对动物造成一定程度的机械的和心理的影响,要减少这些不良影响,有必要充分掌握灌胃技术。现在有各种不同型号的灌胃针头可把药物直接送到动物胃内,注意针头顶端小球的直径应大于所用动物的气管直径,这样药物便不会灌人肺内。小鼠:用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头部皮肤,以无名指或小指将尾巴紧压在掌上,使腹部朝上,头部向上有一个倾斜度,右手取注射器进行灌胃。先从小鼠口角插人口腔内,然后用灌胃管压其头部,使口腔与食道成一直线,再将灌胃管沿上腭壁轻轻进入食道,当灌胃管继续经口进入时,稍感有抵抗,此位置相当于食道通过膈肌的部位。把灌胃管伸到底,使其达胃,如

9、此时动物安静,呼吸无异常,可将药物注人。如小鼠挣扎或遇有阻力应抽出灌胃管再试插之,若强行操作,会损伤食道或膈肌,造成小鼠死亡。在灌入药物之后,轻轻地将管子抽回。如插入气管注射后动物立即死亡。此种灌胃方法的要点是:动物要固定好,头部和颈部保持平行,进针方向正确,操作时不宜粗暴。大鼠:大鼠灌胃方法与小鼠相似,只是大鼠灌胃针头比小鼠的略粗一些。抓取大鼠时,除将左手拇指和食指抓住两耳和头部皮肤外,其它三指要抓住背部皮肤,将大鼠抓持在手掌内。在进行灌胃时,首先将灌胃管放在门齿与臼齿间的裂隙,使灌胃管沿着口腔上都向后达到喉头。在将灌胃管送入食道之前,让大鼠吞烟,如果大鼠不吞咽,轻轻转动管子刺激吞咽动作。注

10、意左手不要抓得太紧,以颈部皮肤向后拉,勒住食管,灌胃针不易插人并容易损伤食管。为防止插入气管,可将注射器的内栓轻轻回抽一下,证实没有空气逆流后注药。豚鼠:豚鼠灌胃时,助手以左手从动物的背部把后腿伸开,并把腰部和后腿一起固定,用右手的扬指和食指夹住两前腿固定之。术者右手所持的豚鼠用灌胃管沿动物上腭壁滑行插入食道,进而插入胃内灌药。也可用木制开口器,把导尿管通过开口器中央的孔插入胃内。上述两种方法皆需回抽证实注射器内无空气时才能慢慢注入药液。最后需注入生理盐水2ml,将管内残留的药液冲出,以保证投药剂量的准确。若给固体药物时,把豚鼠放在金属网上,以左手掌从背部握住豚鼠的头颈部而固定之,以拇指和食指

11、压迫其口角都使目张开。用摄子夹住固体药物,放进豚鼠舌根部的凹处,使动物迅速开口而咽下。当证实咽下后即放开手。兔:兔的固体药物口服法与豚鼠基本相似。液体药物灌胃法需二人协作进行。一人坐好,将兔的躯体夹于两腿之间,左手紧握双耳,固定其头部,右手抓住前肢。另一人将开口器横放于兔口中,将舌头压在开口器下面,把开口器固定。将合适的胃管或导尿管经开口器中央小孔慢慢沿上颚壁插入食道约1518cm。为避免误入气管,可将胃管的外口端放入清水杯中,若有气泡逸出,则证明在气管内,应拔出重新插入,若无气泡则用注射器将药物灌入,然后再注入少量清水,将胃管内药液冲入胃内。灌胃完毕后先拔出胃管,后拿出开口器,以免胃管被动物

12、咬坏。现将各种动物一次灌胃能耐受的最大容积列表如下,以供参考。各种动物一次灌胃能耐受最大容量动物种类体重(g)最大容积(ml)动物种类体重(g)最大容积(ml)家兔35002500350020002400200150100大鼠3002503002002491001998.06.04.05.03.0小鼠30253020241.00.80.5豚鼠3002503006.04.05.0 随着生命科学技术的发展,动物实验已成为医学实验研究的基本方法。根据实验研究目的、实验动物的种类及药物剂型、剂量的不同,要求对实验动物实施不同的给药方法。尤其对于药物的毒理、药效的研究和药物剂量的确定,经口灌胃给药方法是

13、一种重要的途径。在国内文献上却很少见到具体的描述。在此,作者将在实践中摸索出的一套实用于小鼠、大鼠、豚鼠、家兔经口灌胃给药的方法介绍如下。一、灌胃器具制作1.1小鼠、大鼠、豚鼠灌胃器的制作小鼠、大鼠灌胃器的来源有两个,一是从市面上购买特制的I2l6号灌胃针。二是自制。自制方法为:取l2号普通注射针头,首先将针头尖部去掉,然后用细锉刀把去掉部分锉平、锉光,再用沙纸磨光滑,有条件时可在针尖处点焊成球型。加工成有20度弧度的灌胃针,连接1ml或5ml的注射器,即成为大小鼠的灌胃器。在打磨针头或加工弧度时用力一定要均匀,否则就会将针管弄扁,影响针管畅通。豚鼠灌胃器,可采用大鼠灌胃器。1.2家兔灌胃器的

14、制作取12号腰椎穿刺针。加工方法同小鼠、大鼠灌胃器的制作,针体长约9cm,并连接10ml或20ml注射器,即家兔灌胃器。二、灌胃操作方法2.1小鼠经口灌胃给药方法先保定动物,即用右手将小鼠尾巴提起,置于鼠笼或粗糙的平面上,当小鼠向前挣扎时,用左手的拇指和食指捏住小鼠两耳后颈背皮肤,翻转小鼠置于掌心,拉直后肢,以小指压住小鼠尾巴即可。在保定小鼠过程中,不要用力过大,勿握其颈部,以免窒息死亡。以灌胃器轻轻压其头部,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿上腭壁轻轻进入食道,当灌胃针进入约3cm左右时即达胃内。如果灌胃针的位置插入正确,小鼠可自行吞服药,灌胃针插入位置不正确,小鼠会强烈挣扎,必须拔出重插

15、,否则可能将药物灌入气管,造成小鼠死亡。注完药液后轻轻抽出灌胃针。小鼠一次最大灌胃量为:0.4ml/10g.w。2.2大鼠经口灌胃给药方法大鼠的捕捉方法与小鼠基本相同。根据长期的实践经验,我们发现如用一块湿的纱布盖在大鼠身上,既可以防滑,又可以给初学者一种安全感。为了防止大鼠咬伤,应戴上帆布手套。大鼠体型较大,所以不能象保定小鼠那样可以把尾巴压住。同样在保定大鼠时不能用力过大和握其颈部,尤其在采取抓握保定大鼠时,要特别注意。大鼠灌胃的关键是左手把大鼠头部固定好,使其头不能随意摆动。其他操作方法与小鼠基本相同。灌胃针进入深度为5cm左右。大鼠一次灌胃最大容量2ml/100g.w。2.3豚鼠经口灌胃给药方法把豚鼠放在实验台上,用一块干纱布罩住其头,将豚鼠固定在左手掌下,用拇指和食指挤压其口角部让口张开。然后,右手持抽好药物的灌胃器,沿豚鼠上腭壁插入食道。如果灌胃器插入顺畅,位置正确,豚鼠会自动吞咽。否则,豚鼠会乱动,此时应立即拔出灌胃器,重新插入灌胃器,灌胃器进入深度为5cm左右。豚鼠一次灌胃最大容量2.0ml/100g.w。2.4家兔经口灌胃给药方法把实验兔放在实验台上,用左手掌从头部握住兔头颈部,将其固定,用拇指和食指使劲压迫其口角部使口张开。然后,右手持抽好药液的灌胃器,用有弧度灌面从右口角处慢慢插入。如插入位置正确就会看见兔自动吞咽,如插入不对,动物就会乱动,此时应立

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