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1、摘 要核黄素，常称为维生素B2微溶于水，具有较强的生物活性，与人体的代谢活动密切相关。当其缺乏时，人体器官会发生一系列的病变导致疾病，如口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎和阴囊炎等。现在对药品含量的检测方法有很多，荧光分析法一直广泛应用于药品分析，具有快速、准确、直观等优点，并且可以同时检测多种药物含量。本文通过荧光发射光谱法检测维生素B2类药品中核黄素的含量。在做好实验的前期工作后，配制核黄素标准液和维生素B2药品样液并检测其荧光强度。研究核黄素的激发谱和发射谱，确定最佳激励波长468nm和最佳荧光波长523nm。由得到的数据绘制核黄素标准液浓度与荧光强度关系的标准曲线，根据检测的维生素B2药品样
2、液的荧光强度值，代入核黄素标准液曲线表达式得到样液核黄素浓度，进而计算出药品中核黄素的含量。实验结果令人满意，药品核黄素实际含量为5.3753mg/片，稍高于标示值。该方法具有成本低，检测简单快速、灵敏度高等特点。关键词：药物检测； 核黄素； 荧光分析； 激发波长； 发射波长； 标准曲线ABSTRACTRiboflavin,which is widely known as vitamin B2 ,is slightly soluble in water.It is closely related to the bodys metabolic activities and possess str
3、ong biological activity. With the lack of it,the human organ will undergo a series of leisions,leading to diseases such as angular stomatitis,cheilitis,glossitis,conjunctivitis and oscheitis.etc.Now there are many methods for the detection of dugs, Fluorescence analysis has been widely used in drug
4、analysis, with fast, accuracy, visualization and other advantages, and it can simultaneously detect a variety of pharmaceutical components. In this paper the jod was done through the fliorescence spectrometric analysis of vitamin B2 drugs in the detection of riboflavin content. After preparing the p
5、reliminary work,the next step is preparation of Riboflavin standard solution and sample solution,and finish the fluorescence intensity detection of them. Through the experimental detection of fluorescence spectra,the results show the optimal emission wavelength of 523nm and the best excitation wavel
6、ength of 468nm. Then using test data to draw a curve about fluorescence intensity to Riboflavin solution concenteation. According to the data of sample, Riboflavin solution conenteation of sample can be determined through substituting the data into the curvilinear expression.,and Riboflavin content
7、in tablets is obtained . The results were satisfactory, the actual content of drug riboflavin is 5.3753mg / piece.,which is slightly higher than indicated value of 5.0mg / piece.The method has the characteristics of low cost,simple and rapid detection and high sensitivity.etc.Key words: drug detecti
8、on; riboflavin; fluorescence analysis; excitation wavelength; emission wavelength; standard curve目录1.1 课题研究背景11.2 维生素11.2.1 维生素介绍11.2.2 维生素检测意义和方法21.3荧光31.3.1荧光介绍31.3.2荧光机理41.3.3荧光光谱51.3.4荧光衰减51.3.5荧光量子产率61.3.6 荧光与分子结构61.3.7影响荧光因素71.3.8 荧光分析法及其现状91.4章节安排112 实验内容112.1实验依据112.1.1核黄素结构及性质112.1.2定量依据荧光强
9、度与溶液浓度关系122.1.3定量方法标准曲线法132.1.4总体方案132.1.5荧光光谱仪及工作原理142.2实验试剂及仪器152.3实验装置162.4实验设计及操作162.4.1配制试剂172.4.2光谱测定172.4.3实验重复性验证183 实验数据处理183.1实验数据183.2数据处理方法最小二乘法求回归方程223.3标准曲线绘制233.4曲线表达式及药品含量计算234总结244.1实验数据对比244.2误差分析244.3结论25参考文献26致谢281 绪论1.1 课题研究背景药品是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质
10、，包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清、疫苗、血液制品和诊断药品等。药物作用是指药物与机体相互作用产生的反应，即药物接触或进入机体后，会促进体表与内部环境的生理化功能发生变化，或抑制病原体入侵，提高机体抗病能力，从而达到防治疾病效果。然而药物作用具有两重性，既能防病、治病，同时也会导致不良反应或是对人体器官有损害，不少药物的使用有着严格的规定，针对不同人群。加上，有一些企业图利贩制假药，危害人民的生命安全。因而药物含量的检测分析有很重要的意义。本课题所研究的维生素B2类药品，摄取过多可能会引起瘙痒、麻痹、刺痛、灼热感等，也会降低某些正在服用药物的
11、疗效。1.2 维生素1.2.1 维生素介绍维生素（俗称维他命）是人和动物从食物中获取的在物质代谢中起重要调节作用的一类微量有机化合物。由于这类物质在体内不能合成或是合成量不足，人和动物需要从外界摄取，每日需求量少。各类维生素的化学结构和性质不相同，却有着一些共同点：1.在食物中均以维生素原形式存在；2.不属于机体组织和细胞的组成成分，不产生能量，主要作用是调节机体代谢；3.多数维生素，机体无法合成或是合成量少，难以满足机体需要，必须经常从食物中摄取；4.人对维生素需求量小，日需求量在毫克或微克数量级，但不能缺乏，否则会引起相应维生素缺乏症，损害人体健康；迄今为止，人们已经发现了数十种维生素，其
12、中有13种为人体所必需，被称为必需维生素。必需维生素分成两大类：4种脂溶性维生素（维生素A、维生素D、维生素E、维生素K）和9种水溶性维生素（8种维生素B、维生素C）。必需维生素需要满足的特点：外源性、微量性、调节性、以及特异性。外源性：人体自身无法合成，必需从食物中摄取。微量性：在人体中只需要极小的量便可以起到巨大作用。调节性：必需能够调节人体新城代谢或控制能量转变。特异性：一旦缺乏特定维生素后会引发相应病症。1.2.2 维生素检测意义和方法维生素常被作为食品营养强化的添加剂，广泛存在于谷类、果蔬、肉禽和蛋类等加工食品中。市场上，食品添加剂像药品一样有明确剂量标注，这类添加剂的用量与食品安全
13、有着紧密联系。European Directive 2002/46 EC制定了一系列关于食品添加剂标识及添加含量的法规，我国国家标准GB5413-2010对婴幼儿配方食品与维生素含量也有明确规定。食品与药品中维生素的含量与人的身体健康关系密切，特别是婴儿和正在发育中的青少年以及身体机能大幅度下降的老年人。因此维生素检测对食品、饲料、医药领域都有很重要的意义。维生素检测的方法有很多。传统的鉴定方法大都步骤繁琐、检测周期长、操作费时、易受干扰、灵敏度不高。新型的方法具有准确、方便、快速等特点，然而实验设备价格不菲。1.传统经典方法微生物法微生物法依据维生素是细菌生长所必需的原理，用细菌繁殖程度或代
14、谢产物定量出维生素含量，适用于检测多种衍生物的总和2.仪器方法HPLC液相色谱法及LC-MS-MS液质联用法HPLC高效液相色谱法根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离，分离过程是一个分配平衡过程。该方法具有灵敏度高、特异性强、分离速度快、效果好等特点，可一次性分析多种水溶性维生素。LC-MS-MS液质联用法基于质谱分析，先将物质离子化，按离子的质荷比分离，随后测量各离子谱峰强度，从而实现分析目的。不纯的样品要用色谱和质谱联用仪，通过色谱分离，质谱作色谱的检测器。3.其他方法除了微生物法及HPLC法和LC-MS-MS液质联用法外，还有灵敏度和特异性很高的ELISA酶联免疫试剂盒及酶
15、法检测试剂盒。酶法试剂盒检测为MEBAK Commision检测果汁等食品中维生素C的标准方法。而德国拜伐生产的ELISA酶联免疫试剂盒能快速、方便、准确定量检测食品中维生素B12、生物素、叶酸等成分，节省实验时间和成本。1.3荧光1.3.1荧光介绍荧光（“萤光”），指的一种光致发光的冷发光现现象。荧光是物质吸收光照或其他电磁辐射后发出的光。多数情况下，发出光比吸收光波长长，能量低。1575年西班牙内科医生和植物学家N.Monardes在阳光下观察菲律宾紫檀木切片的黄色水溶液，其呈现出了极为可爱的天蓝色。17世纪，Boyle和Newton等一些著名科学家也观察到了荧光现象。17世纪到18世纪一些荧光材料和溶液相继被发现，但却没有强有力的理论解释这类荧光现象。1852年，Stokes在研究奎宁和叶绿素的荧光时，通过分光计意外发现荧光的波长比入射光稍长，才意识到这类荧光现象并不是光的漫射引起的，而是物质在吸收光能后会发射出其他波长的光，建立起荧光是光发射的概念。他从发荧光的矿石“萤石”获得灵感，提出“荧光”这一术语。1867年，Coppelsroder用铝桑色素配合物的荧光对铝进行测定，这是历史上首次荧光分析工作。
