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1、 本文由xiechunli8716贡献 ppt文档可能在WAP端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。 高三生物组 直击考纲： 直击考纲： 细胞融合和单克隆抗体（ 细胞融合和单克隆抗体（A） 教学目标: 教学目标: 1、简述动物细胞融合的方法和过程 2、简述单克隆抗体的制备过程及其应用 3、关注细胞工程研究的发展和应用前景 教学重点、难点： 教学重点、难点： 1、简述动物细胞融合的方法和过程 2、简述单克隆抗体的制备过程 思考 1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术 什么叫动物细胞融合？ 与动物细胞融合有什么不同呢？ 与动物细胞融合有什么不同呢？ ? 2、动物细胞在结构上
2、有何区别？这与它们 动物细胞在结构上有何区别？ 杂交或融合过程有什么影响？ 杂交或融合过程有什么影响？ ? 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基 本原理是否相同？ 本原理是否相同？两者的融合过程是否也 一样？ 一样？ 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动。 细胞融合是正常的生命活动。 受精作用 两个细胞正在融合 1、概念： 概念： 两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程， 胞的过程，融合后形成的具有两个或多个 细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、原理： 原理： 细胞膜的流动性 3、方法： 方法： 物理法：离心、振动、 物理法：离心、振
3、动、电激 化学法： 化学法： PEG（聚乙二醇） （聚乙二醇） 生物法： 生物法：灭活的病毒 思考 为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭 不灭活行吗？ 活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白 质分子和脂质分子重新排布， 质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打 细胞发生融合， 开，细胞发生融合，不灭活的话会感染 细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞，而不能诱导细胞融合。 4、 、 动 物 细 胞 融 合 的 过 程 5、意义： 意义： （1）使远缘杂交成为可能。 使远缘杂交成为可能。 （2）是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、 是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、 和生物新品种培育的重要手段。 和生
4、物新品种培育的重要手段。 (2)为单克隆抗体开辟了新途径。 (2)为单克隆抗体开辟了新途径。 为单克隆抗体开辟了新途径 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 、 比较项目 细胞融合原理 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 动物细胞融合 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱 原生质体融合 导细胞融合 诱导方法 物理（离心、振荡、 物理、 物理（离心、振荡、 物理、化学方法 电刺激） 同左） 电刺激） （同左） 化学（聚乙二醇） 化学（聚乙二醇） 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 二、单克隆抗体 （一）、抗体 ）、抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、 抗体是
5、机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原 发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴 细胞产生抗体。 细胞产生抗体。 B淋巴细胞与抗体的关系： 淋巴细胞与抗体的关系： 淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 、B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 动物体内的B 、动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗 每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 、每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 小结 传统生产抗体的方法缺陷是产量低、 传统生产抗体的方法缺陷是产量低、纯度 特异性差。 低、特
6、异性差。 （二）、单克隆抗体 ）、单克隆抗体 1、概念 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（ 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克 ），形成基因型相同的细胞群 形成基因型相同的细胞群， 隆），形成基因型相同的细胞群，这一细 胞群所产生的化学性质单一、 胞群所产生的化学性质单一、特异性强的 抗体称为单克隆抗体。 抗体称为单克隆抗体。 特点： 2、特点： 特异性强、 特异性强、灵敏度高 3、如何大量生产单克隆抗体？ 、如何大量生产单克隆抗体？ （1）利用淋巴细胞产生抗体的功能 ） （2）利用肿瘤细胞无限增殖的特性 ） （3）利用细胞融合的技术将两种细胞融 ） 合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的 杂交瘤细胞
7、（4）利用动物细胞培养技术大量培养杂 ） 交瘤细胞 4、过程： 过程： 注射抗原 B淋巴细胞 淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选， 筛选，继续培养 足够数量的、 足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 思考： 思考： (1)、本过程利用了哪些原理？ (1)、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理， 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 (2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ (2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞， 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的 遗传物质，不仅具有B细
8、胞分泌抗体的能力，而 遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力， 且还有无限增殖的本领， 且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单 克隆抗体 5、应用： 应用： (1)、 (1)、临床诊断 (2)、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹” (2)、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹” 治疗肿瘤 资料： 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克 隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、 隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾 血液病、内分泌疾病和遗传病， 病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作 为诊断手段，是一个必然趋势。另外， 为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体
9、做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶” 做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人 们的注意，目前， 们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊 断。 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 一个诱导细胞融合的新方法灭活 一个诱导细胞融合的新方法灭活 病毒 三个“ 三个“一” 一个新细胞杂交瘤细胞 一个新细胞杂交瘤细胞 一个优势单克隆抗体特异性 一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法， 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌的实验方案 A 骨髓瘤细胞 1、该实验方案的目的是 、该实验方案的目的是 制备单克隆抗体 2
10、、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 、该方案能达到预期效果吗？为什么？ B 杂交瘤细胞 C 3、A是从小鼠的脾脏中取得 、 是从小鼠的脾脏中取得 ,该细胞能够产生 抗体 B细胞 该细胞能够产生 B细胞 该细胞能够产生 足够数量的细胞群 4、图中 为过程，常用 过程， 、图中B为 细胞融合过程 灭活病毒 作为诱导剂，该细胞继 作为诱导剂 作为诱导剂， 双亲细胞 的遗传特性 的遗传特性， 承的遗传特性，既能 分泌抗体 又能 无限增殖 。 体外培养 注射到 ,又能 又能。 小鼠腹腔 5、C过程指细胞培养，该过程包括 过程指细胞培养， 、 过程指细胞培养 原代 培养和 传代培养两个阶段，其 培养和 培
11、养和培养两个阶段 培养两个阶段， 50 代以内的的细胞属于细胞株 代以内的的细胞属于细胞株。 中代以内的的细胞属于细胞株。 1.动物细胞工程技术的基础是：（ 1.动物细胞工程技术的基础是：（ ） 动物细胞工程技术的基础是 A动物细胞融合 B胚胎移植 C动物细胞培养 D核移植 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中， 确的是（ 确的是（ ） A结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B . 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A C B D1
