上海部分地区肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶情况及药敏监测.doc

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1、上海部分地区肠杆菌科细菌产超广谱-内酰胺酶情况及药敏监测中华结核和呼吸感染 2000年第7期第23卷 论著作者:林庆安罗文侗修清玉李惠萍单位:林庆安罗文侗修清玉(200003 上海,第二军医大学长征医院呼吸内科);李惠萍(上海市肺科医院呼吸内科)关键词: 肠杆菌科;超广谱-内酰胺酶;耐药性,微生物【摘要】目的了解上海地区肠杆菌科细菌产超广谱-内酰胺酶(ESBLs)的情况;比较产ESBLs菌与非产ESBLs菌对11种抗生素的耐药率。方法收集1999年3月1999年10月上海地区4家医院分离的肠杆菌科细菌1 026株,用双纸片协同扩散法检测ESBLs,用Kirby-Bauer琼脂扩散法作药敏试验。

2、结果1 026株肠杆菌科细菌中,共检出产ESBLs菌352株,检出率为34.31%,其中肺炎克雷伯菌为37.40%,大肠埃希菌为30.21%,阴沟肠杆菌为41.82%;除亚胺培南-西司他丁和头孢美唑外,产ESBLs菌对其它9种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌(P0.01);亚胺培南-西司他丁对产ESBLs菌的耐药率最低。结论上海地区肠杆菌科细菌产ESBLs情况严重,临床实验室有必要常规检测肠杆菌科细菌是否产ESBLs;产ESBLs菌对抗生素耐药性比非产ESBLs菌严重,亚胺培南-西司他丁和头孢美唑是治疗由产ESBLs菌引起感染的有效抗生素。Detection of extended-s

3、pectrum -lactamases and drug sensitivity test in clinical isolates of the family Enterobacteriaceae in ShanghaiLIN Qingan, LUO Wentong, XIU Qingyu, et al.(Changzheng Hospital Affiliated to the Second Military Medical University, Shanghai 200003,China)【Abstract】ObjectiveTo investigate extended-spectr

4、um -lactamases (ESBLs) production in clinical isolates of the family Enterobacteriaceae in Shanghai, and compare the resistant rates of ESBLs-producing strains and non-ESBLs-producing strains to 11 antibiotics. MethodsDouble-disk synergy test was used to detect ESBLs in 1 026 strains of the family E

5、nterobacteriaceae; Kirby-bauer agar diffusion method was used to judge drug sensitivity.Results34.31% of strains of the family Enterobacteriaceae were considered ESBLs producers by double-disk synergy test. The prevalences of ESBLs in isolates of Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli and Enterobac

6、ter cloacae were 37.40%, 30.21% and 41.82% respectively. Except Imipinem and Cefmetazole, the resistant rates of ESBLs-producing strains to other 9 antibiotics were much higher than that of non-ESBLs-producing strains(P0.01). The resistant rates of Imipinem to ESBLs-producing strains were the lowest

7、.ConclusionsThe prevalence of ESBLs in clinical isolates of the family Enterobacteriaceae in Shanghai was high; it is necessary for clinical laboratory to detect ESBLs in clinical isolates of the family Enterobacteriaceae routinely. The resistant rates of ESBLs-producing strains to most antibiotics

8、were high. Imipinem and Cefmetazole were the effective antibiotics to infections caused by ESBLs-producing strains.【Key words】Enterobacteriaceae;Extended-spectrum -lactamases;Drug resistance, microbial产生-内酰胺酶是革兰阴性杆菌对-内酰胺类抗生素耐药的主要机制,尤其是自80年代中期以来发现的超广谱-内酰胺酶(ESBLs)不仅能分解第1、2代头孢菌素和青霉素类抗生素,而且能分解广谱头孢菌素和单酰胺

9、类抗生素,给临床感染性疾病的治疗造成极大的威胁。ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是其代表菌种;目前,产ESBLs的菌株日益增多,世界上许多国家和地区都有产ESBLs菌感染的报道1。北京和广州等地也有产ESBLs菌流行2,3,但尚未有大规模的流行病学调查资料。为此,本研究收集上海地区4家医院1999年3月1999年10月从住院患者各种临床标本中分离的肠杆菌科细菌1 026株,用国内外常用的双纸片协同扩散法(DDS)检测其产ESBLs情况,以了解上海地区产ESBLs菌及其耐药情况。明确临床实验室是否有必要对肠杆菌科细菌常规检测ESBLs。材料与方法一、 材料1临床菌株:1

10、999年3月1999年10月由长海医院、长征医院、上海市肺科医院和华山医院等4家医院提供从住院患者的各种临床标本中分离出的肠杆菌科细菌共1 026株,其中肺炎克雷伯菌599株(58.38%),大肠埃希菌331株(32.26%),阴沟肠杆菌55株(5.36%),其它如氟劳地枸橼酸杆菌、沙雷菌属和产气肠杆菌等共41株(4.00%);标本包括:痰610份(59.46%),尿307份(29.92%),血、胆汁、脓液、腹水、脑脊液等109份(10.62%)。2参考产ESBLs菌株:共5株,由美国Labey Hitcbock医疗中心Jacoby博士提供,均为大肠埃希菌,所产ESBLs分别为:TEM-3、T

11、EM-7、TEM-10、SHV-2、SHV-3。3抗生素纸片:头孢呋辛(cefuroxime, CXM 30 g)、头孢噻肟(cefotaxime, CTX 30 g)、头孢他啶(ceftazidime, CAZ 30 g)、头孢曲松(ceftriaxone, CRO 30 g)、氨曲南(aztreonam, ATM 30 g)、亚胺培南-西司他丁(imipenem/cilastatin, IM 10 g)、阿米卡星(amikacin, AK 30 g)、环丙沙星(ciprofloxacin, CIP 5 g)均为英国OXOID公司产品;头孢波肟(cefpodoxime, CPD 10 g)、

12、头孢美唑(cefmetazole, CMZ 30 g)和头孢哌酮/舒巴坦(cefoperazone/sulbactam, CFP/SU 75 g/30 g)为美国BBL公司产品;阿莫西林/克拉维酸甲(amoxicillin/potassium clavulanate, AMX/PC 20 g/10 g)为北京天坛药物生物技术开发公司产品。4MH琼脂:英国OXOID公司产品。二、 方法1药物敏感试验:采用Kirby-Bauer琼脂扩散法,结果按美国临床实验室标准委员会(NCCLS)1997年标准判读,并用大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923和铜绿假单胞杆菌ATCC278

13、53作质控。2ESBLs检测:采用双纸片协同扩散法,并用参考产ESBLs菌作质控。按常规纸片扩散法将待测菌涂布于MH平板培养基,放置15分钟后在平板中央位置贴上阿莫西林/克拉维酸甲纸片,在平板周围分别贴上头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢波肟和氨曲南5种抗生素纸片,使周围纸片中心与中央纸片中心距离为20 mm,35下孵育过夜后判断结果。如周围纸片中有任何一个抑菌环在靠近中央纸片一侧的边缘出现扩大或加强(即有协同作用),则判定为产ESBLs菌。结果一、肠杆菌科细菌中产ESBLs菌检出情况表1显示,除肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌外,阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和氟劳地枸橼酸杆菌均可产ESBLs。肠杆菌科细菌

14、中产ESBLs菌的总检出率高达34.31%。表1 肠杆菌科细菌产ESBLs情况菌种名分离株数产ESBLs株数产ESBLs率(%)肺炎克雷伯菌59922437.40大肠埃希菌33110030.21阴沟肠杆菌552341.82产气肠杆菌171-氟劳地枸橼酸杆菌144-粘质沙雷菌100-合计1 02635234.31二、产ESBLs菌与非产ESBLs菌对11种抗生素的耐药率比较表2显示,除亚胺培南和头孢美唑外,产ESBLs菌对其它9种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌。表2产ESBLs菌与非产ESBLs菌耐药率比较抗生素产ESBLs菌非产ESBLs菌2值P值耐药株数耐药率(%)耐药株数耐药率(

15、%)头孢噻肟32692.61548.01709.730.01头孢他啶19555.40446.53309.070.01头孢曲松33494.89527.72748.740.01头孢波肟34898.86578.46791.050.01氨曲南29684.09537.86598.630.01亚胺培南-西司他丁0010.150.520.05阿米卡星24569.608612.76341.890.01环丙沙星25873.3023034.12142.260.01头孢哌酮/舒巴坦22162.78476.97373.240.01头孢呋辛34698.3010515.58642.230.01头孢美唑5415.348813.061.010.05讨论ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为其代表菌种。自1983年欧洲首次发现ESBLs以来,世界各地均有产ESBLs菌感染的报道4,但国内外关于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ESBLs率报道差别较大,如Pai5报道大肠埃希菌产ESBLs率为4.8%7.5%,肺炎克雷伯菌为22.5%22.8%,Sader等6报道肺炎克雷伯菌产ESBLs率为37%,大肠埃希菌为28%,而Christopher等7报道肠杆菌科细菌中仅1.5%产ESBLs。国内王辉等2报道肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中仅5%产ESBLs,而王露霞等3报道大肠埃希菌产ESBLs率为1

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