分子荧光光度法测定二氯荧光素

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1、分子荧光光度法测定二氯荧光素 实验实验中修改部分 一、实验目的:1、(书)2、掌握荧光分光光度计的结构及基本使用方法3、熟悉荧光分光光度计的应用二、方法原理:(书)三、仪器和试剂:仪器: Cary/Eclipse 荧光分光光度计。该仪器使用氙弧灯作为激发光源。在 190900nm 的连续光谱区内进行工作。具备先进的结构性能和高效的工作效能。 仪器包括激发单色器和发射单色器、氙光源;固定宽度范围的可调狭缝、可调光 栅;以及两个光电备增管作为检测器。一次实验可设置测试多种样品,并对同一 种样品作多次测试,实验过程均通过联机电脑的工作站进行数字化控制,精度高、 重复性好!在环境条件允许的情况下,该仪

2、器还可用于生物化学发光的检测、 磷光的检测。试剂:(书)四、实验步骤:1、配制标准溶液(按书中要求配制)2、接通电源,打开联机电脑,开启仪器开关。3、待仪器稳定后,进行参数设置。(1) 选择荧光的检测模式(2) 设置激发波长500nm 发射波长520nm(3) 设置激发狭缝宽5nm发射狭缝宽5nm(4) 设置激发光栅状态open(5) 设置待测溶液的单位(6) 设置待测标准样品个数5_(7) 设置重复检测样品次数1(8) 设置最小R2 0.95(9) 设置待测样的个数及其重复检测次数1(10) 设置报告模式(11) 设置自动存贮模式为自动存贮off4、测定标准溶液和待测样溶液的荧光强度5、测定过程应将挡板关闭五、结果处理 按原要求处理六、思考题:1、试说明分子荧光法的基本原理及影响因素。2、绘出荧光光度计的简易光路图。

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