弥散性血管内凝血

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1、弥散性血管内凝血1学习DIC动物模型复制方法;2学习血液学指标(PT、KPTT)的测定;了解急性DIC的诊断标准和实验室检查方法3讨论DIC的发病机制;锻炼动手操作能力:、器材、药品手术器械、托盘天平、离心机、水浴箱、试管、移液枪、秒表1.5%戊巴比妥钠、4%兔脑粉、P试液、K试液、3. 8%枸椽酸钠0. 025mol/L CaCl2溶液三、方法、步骤1 称重麻醉(1.5%戊巴比妥钠,2 mL/kg)分离一侧 颈总动脉T插入硅胶管-取血于抗凝管中至3 mL n2头皮针扎入耳缘静脉,注射4%兔脑粉稀释液30 ml, 1 mL/min X 5 min注射方式与速度为: 2 mL/min X 5 m

2、in 3 mL/min X 5 min3.11 1 10.3 ml 3.8%枸椽酸钠4.:5PT测定:37 C 水浴 1 min取01 mL血浆加入P试剂02 ml ,开始计时,6. KPTT测定:侧动试管,直至液体停止流动(呈胶冻状)或出现白色粗颗粒 时#即为凝固终点-计时停止,记录凝血时间。取0.2 mL血浆,加K试剂02mL37 C 水浴2 min加入CaCl2 0.2 mL,观察方法同上,记录凝血时间。实验结果表一静脉注射兔脑粉对兔血PT、KP7T的影响组别PT (S)KPTT(S)注射前1240注射后1449注射后30min1656五、分析讨论1、2、在家兔实验性DIC实验中,影响实

3、验成败的最重要因素是什么? 家兔实验性DIC的致病原因是什么?3、PT、KPTT测定的原理是什么?4、在实验性DIC实验中,PT和KPTT明显延长的原因是什么?六、注意事项1戊巴比妥钠毒性大,勿麻醉过量;2动脉插管固定线,打活结,以便解开;。3插管用盐水湿润,银子夹住切口,插入硅胶管;4放血速度中等,不宜过快或过慢;量要把握好,不宜过多或过少;5取血后,立即以大拇指堵住管口,颠倒混匀67次;6每次取血后,立即更换插管,并及时清洗换下的插管;7抗凝管每次取一支,用到哪支取哪支,禁止全部拿到实验台;&插管及其他器械均要洗净、擦干、回收。(1)凝血酶原时间(prothrombin time, PT)

4、测定原理:0.1 mL血浆(水浴1 min),加P试剂0.2 ml ,开始计时。P试液:TF+Ca2+)PT是外在凝血途径的筛选试验。DIC时因因子I、II、V、vn和X等均减少, 故PT延长。正常12秒,超过正常对照3秒或呈动态变化以上有意义。它反映肝脏合 成功能、储备功能、病变严重程度及预后的一个非常重要的指标。(2)白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)测定原理:02mL血浆,加K试剂0.2 ml (水浴2min),加 CaCl2 0.2 mL o(K试液:白陶土+磷脂,其中白陶土可以硅藻土、隸花酸代替)KPTTM内在凝血途径的筛选试验。除因子VD和Xm外,任何一个凝血因子缺乏 都可使KPTT延长。正常35-45秒,超过正常对照10秒以上有意义。DIC的高凝期 KPTT缩短,在消耗性低凝血期KPTT延长。(1) PT测定:0.1 I1L血浆(水浴1 min),加P试剂0.2 ml,开始计时。(2) KPTT测定:02mL血浆,加K试剂0.2 ml (水浴2min),加CaCl2 0.2 ml,计时。内欄性系妊外K性系统

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