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1、精心整理基因工程原理练习题及其答案一、填空题1基因工程是_年月发展起来的遗传学的一个分支学科。*2基因工程的两个基本特色是：(1)_，(2)_。3基因克隆中三个基本重点是：_；_和_。*4经过比较用不一样组合的限制性内切核酸酶办理某一特定基因地区所获取的不一样大小的片段，能够建立显示该地区各限制性内切核酸酶切点互相地点的_。*5限制性内切核酸酶是按属名和种名相联合的原则命名的，第一个大写字母取自_，第二、三两个字母取自_，第四个字母则用_表示。*6部分酶切可采纳的举措有：(1)_(2)_(3)等。7第一个分其余限制性内切核酸酶是_；而第一个用于建立重组体的限制性内切核酸酶是_。8限制性内切核酸
2、酶BsuRI和Hae的根源不一样，但识其余序列都是_，它们属于_。*9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_切割DNA聚合酶I获取的分子量为76kDa的大片段，拥有两种酶活性：(1)_；(2)_的活性。*10为了防备DNA的自己环化，可用_去双链DNA。*11EGTA是_离子螯合剂。12测序酶是修饰了的T7DNA聚合酶，它只有_酶的活性，而没有_酶的活性。*13切口移位(nicktranslation)法标志DNA的基根源理在于利用_的_和_的作用。14欲将某一拥有突出单链尾端的双链DNA分子转变为平尾端的双链形式，往常可采纳_或_。*15反转录酶除了催化DNA的合成外，还拥有_的作用，能够
3、将DNA-RNA杂种双链中的_水解掉。*16基因工程中有3种主要种类的载体：_、_、_。*17就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包含三个部分：_、_、_。此外，一个理想的质粒载体一定拥有低分子量。18一个带有质粒的细菌在有EB的培育液中培育一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫。19pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子根源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。20YAC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。*21pSCl01是一种复制的质粒。*22pUCl8质粒是当前使用较为宽泛的载体。pUC系列的载体是经过和两种质粒改造而来
4、。它的复制子来自，Amp抗性基因则是来自。23噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有双方面的原由：一是；二是。24野生型的M13不适适用作基因工程载体，主要原由是和。*25黏粒(cosmid)是质粒噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。26野生型的噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原由是：(1)(2)(3)。精心整理27噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，此中来自质粒的主要构造是，而来自噬菌体的主要构造是。*28噬菌体载体因为遇到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。29在分别DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠
5、檬酸钠等，其目的是。30用乙醇积淀DNA时，往常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc，其目的是。31引物在基因工程中起码有4个方面的用途：(1)(2)(3)(4)。*32Clark发现用TaqDNA聚合酶获取的PCR反响产物不是平尾端，而是有一个突出碱基尾端的双链DNA分子。依据这一发现设计了克隆PCR产物的。*33在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在。34乙醇积淀DNA的原理是。*35假设克隆一个编码某种蛋白质的基因，一定考虑其表达的三个基本条件：(1)_(2)_(3)。*36受体细胞的感觉态是。*37DNA重组连结的方法大概分为四种：(1)_(2)_(3)_
6、(4)。38将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个_，各样此类质粒的会合体称之为建立了一个_。39将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个_，源于同一批RNA制备物的克隆群则建立了一个_。*40只需知道基因组中某一特定地区的部分核苷酸构成，用_能够将这段DNA进行百万倍的扩增。*41人工感觉态的大肠杆菌细胞在温度为_时吸附DNA,_时摄人DNA。*42当前，在重组体的挑选中，已经发展了很多构想奇妙、拥有极高正确性的挑选方法。大概能够分为：(1)_(2)_(3)_(4)等。43PCR扩增挑选重组体是比较简易的挑选方法，它适合于。44核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和RNA探针。
7、此中DNA探针又分为_探针和_探针。45假如用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5突出的黏性尾端，则能够用_进行3尾端标志。假如用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3突出的黏性尾端，能够用_进行3尾端标志。46单链DNA探针的标志能够采纳以下方法：(1)_(2)_(3)。47依据Northern杂交的结果能够说明：。48差示杂交(differentialhybridization)技术需要。49RNA分子经凝胶电泳后按大小不一样分开，而后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上，同一放射DNA探针杂交的技术称。*50在_技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分别后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，
8、而后与放射性的DNA探针杂交。51可用T4DNA聚合酶进行平尾端的DNA标志，因为这种酶拥有_和_的活性。52依据外源片段供给的遗传表型挑选重组体，必需考虑三种要素：(1)_精心整理(2)_(3)。*53Northern印迹和Southern印迹有两点根本的差异：(1)_(2)。54放射免疫挑选的原理鉴于以下三点：(1)_(2)_(3)。答案1702(1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达3克隆基因的种类；受体的选择；载体的选择4限制性酶切图谱5属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名6(1)减少酶量；(2)缩短反响时间；(3)增大反响体积7EcoK；EcoRl8GGCC；异源同工酶9枯
9、草杆菌蛋白酶；(1)5-3合成酶的活性；(2)3-5外切核酸酶10碱性磷酸酶；5端的磷酸基团11Ca2+125-3合成；3-5外切13DNA聚合酶I：5一3外切核酸酶；5一3合成酶14S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平15核酸水解酶H；RNA16质粒DNA；病毒DNA；质粒和病毒DNA杂合体17复制区：含有复制起点；选择标志：主假如抗性基因；克隆位点：便于外源DNA的插入18质粒除去(或治愈)19，pMBl；pSCl01；pSF2124(R质粒)201000kb；300kb21.紧密22pBR322和M13；pMBl；转座子23它在细菌中能够大批生殖，这样有益于外源DNA的扩增；对某些噬菌体(如
10、噬菌)的遗传构造和功能研究得比较清楚，其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详细24没有适合的限制性内切核酸酶辨别位点；选择标志25质粒；噬菌体；4526(1)分子量大，(2)酶的多切点，(3)无选择标志27复制区；IG区287510529螯合Mg2+离子，克制核酸酶的活性30中和DNA分子的负电荷，增添DNA分子间的凝集力31(1)合成探针；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反响；(4)进行序列剖析32T载体33第二链合成时形成的发夹环?34乙醇使DNA分子脱水35(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)拥有翻译的开端和停止信号36接受外源DNA的生理状态37(1)黏性尾端连结；(2)平尾端连结；(3)同聚物接尾连结；(4)接头连结法38基因组DNA克隆；基因组DNA文库39cDNA克隆；cDNA文库精心整理40聚合酶链式反响(PCR)410C；42C42(1)遗传学方法；(2)物理挑选法；(3)核酸杂交法；(4)表达产物剖析法43插入外源片段的种类许多，大小又极为相像的重组体的挑选44基因组DNA；cDNA45Klenow酶填充的方法；T4DNA聚合酶46(1)用M13
