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1、拉曼光谱实验问题514也可以用紫外200nm附近激发即为共振拉曼，浓度 5 1411111，请教喇曼谱实验时，如何选择激发波长，1064nm?还是785nm或633nm?请指教，谢谢！.谢谢专家。多看看相关文献，我做的蛋白质常用低也可以测。理论上讲，拉曼光谱与激发光的波长无关。但有的样品在一种波长的激光激发下会产生强烈荧光，对拉曼光谱产生干扰。这时要换一种 激发光，以避开荧光的干扰。若样品在不同激光激发下都不发荧光，则随使用哪一种激光都可以。拉曼散射是光子与分子的相互作用，当激发光子的能量接近两个电子态之间的跃迁能量时，就会出现共振拉曼或者共振荧光。共振效应 （共振拉曼或共振荧光）的存在与否取
2、决于激发激光的波长。如果激发光子不能给分子提供足够的能量，相应的产生荧光的跃迁将不能 发生。然而，如果产生了荧光，其强度将远远大于拉曼散射光，从而会掩盖拉曼信号的特征。有时，荧光还来自于被污染的样品中所存 在的杂质，或者来自于一种包裹物周围的本底物质。选择激发激光波长是避免荧光辐射一种行之有效的方法。对于大多数样品而言，选择近红外或者紫外激光可以避免激发荧光。近红外激 发下，激光光子没有足够的能量以激发出分子荧光；紫外激发下，虽然激发出分子荧光，但是荧光辐射和拉曼信号的能量相差甚多。原文由 wuzl发表：感谢指教。喇曼位移应和激发光波长没有关系，但喇曼散射的强度应该和波长的有关，另外仪器光学系
3、统对波长响应也应有最佳选择， 选择波长时这2个方面要考虑吗？根据瑞利定律，拉曼散射线的强度与激发光波长的四次方成反比。如果不考虑检测器等因素，当然是激发光的波长越短越好，最好是 紫外激光。但可惜的是，现在用于拉曼光谱仪上的CCD最好的响应波长在620nm左右，480nm以下的响应非常差，若CCD技术不进 一步改进，紫外激光器对拉曼光谱仪很难说是一种有用的激光器。一种基于多波长激发的拉曼光谱的荧光消除方法，涉及一种化学分析和光电信号处理方法，它是通过激光光源依次产生的多个相近波长 激光照射到同一被测样品上，依次激发出由荧光和拉曼光组成的混合光谱；光谱仪采集到各混合光谱信号，对齐各混合光谱，通过全光 谱积分值归一化校正光谱信号幅度，得到经过横坐标对齐和纵坐标幅度校正的光谱；求取各混合光谱两两间差值，该差值即为荧光信号 的差分值，计算该差分值的逆差分，逆差分除以差分步长得到的是荧光背景值与一个常数的和，最后从混合光谱中扣除该荧光背景值， 即可分离出纯净的拉曼光谱，实现拉曼光谱的荧光消除目的。本发明方法合理，能有效地消除背景荧光，而且成本低、使用方便，易于 推广使用。
