肠杆菌科细菌质粒介导的AmpCβ

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1、肠杆菌科细菌质粒介导的AmpC- 内酰胺酶的研究细菌耐药已成为全球公共卫生的一大难题。肠杆菌科细菌为医院内感染的常见病原菌 , 尤其是携带有 AmpC- 内酰胺酶的细菌 , 对几乎所有 - 内酰胺类抗生素耐药 , 且对 - 内酰胺酶抑制剂不敏感 , 对头孢西丁亦耐药。目前没有国际统一的检测标准, 没有临床大规模监测数据, 人类对其还缺乏足够的认识。这类基因被质粒获取后 , 可以在不同菌种之间传播, 加之各种可移动基因原件的参与 , 使耐药基因的传播复杂多样, 给感染控制带来极大的困境。本研究搜集澳大利亚西悉尼4 家医院 ,3 年内对头孢西丁耐药的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌 83 株, 用多重 PC

2、R的方法检测不同类型的ampC耐药基因 , 测序确定基因分型 ; 脉冲场凝胶电泳 (PFGE)进行菌株分型 ; 质粒接合实验及电穿孔获取质粒 , 然后应用质粒不相容分型 PCR方法进行质粒分型 ; 应用 PCRmapping 的方法了解该基因上下游结构 , 从基因水平了解该耐药基因的传播机制。结果 :83 株头孢西丁耐药的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌中14 株携带有 ampC基因 ; 测序及基因库比对结果显示 7 株为 blaDHA-1基因 ,5 株为 blaCMY-2基因。且发现两个新型耐药基因, 一个已经命名为 bla ( CMY-42), 另一株blaDHA-1-like基因还需进一步深入研究

3、。PFGE结果显示各菌株均为不同类型 ; 发现几种不同类型质粒参与耐药基因的传播; 除一株外 , 所有blaDHA-1-like基因都连接有qnrB4 基因。blaDHA-1基因与 ISCR1或 IS26 相连 ,blaCMY-2 及blaCMY-42基因均与 ISEcp1 及 IS26 相连 ;pJIE092 可能为 pJIE142及基因库中收录的来自法国等国家基因结构的前体。结论: 在澳大利亚西悉尼的质粒介导的 ampC基因为已知的世界上较为流行的blaDHA-1及blaCMY-2基因型 , 并发现携带一种新型ampC耐药基因blaCMY-42, 及另外一种正进一步研究的新型ampC耐药基因blaCMY-42基因。并非单一克隆传播 , 亦非单一质粒传播 , 有多种移动基因元件参与ampC耐药基因的传播。并发现一种相对古老的基因结构。

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