常见蛋白酶抑制剂

《常见蛋白酶抑制剂》由会员分享，可在线阅读，更多相关《常见蛋白酶抑制剂（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、当前位置:生物帮实验技巧 生物化学技术正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期：20120 6 -13来源:互联网标签：相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要：破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋 白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了 5 种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不 相同，因此需要调整各种蛋白酶得浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销! Ib id i细胞灌流培养系统一模拟血管血液流 动状态下得细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎

2、细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋 白质不被降解、在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了 5 种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不 相同，因此需要调整各种蛋白酶得浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中得溶解度极低尤其应注 意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂得沉淀。在宝灵曼公司得 目录上可查到更完整得蛋白酶与蛋白酶抑制剂表。常用抑制剂P MS F1）抑制丝氨酸蛋白酶如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶）与巯基蛋白酶如木瓜蛋白酶）；2 ）1 Omg/ml溶于异丙醇中；3）在室温下

3、可保存一年；4）工作浓度:1717 4ug /ml（0。1 1.0m mo 1/L）;5 ）在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离与纯化步骤中加入新鲜得PMSF。EDTA1 ）抑制金属蛋白水解酶；2）0.5mol/L水溶液,pH8 9 ;3）溶液在4C稳定六个月以上;4 ）工作浓度：（、5 1.5mmol/L、（0.卜 0、5mg/ ml）;5)加入NaOH调节溶液得pH值，否则E DTA不溶解。胃蛋白酶抑制剂(P epst a nt n)l抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶D与凝乳酶;2) 1mg/m l溶于甲醇中;3储存液在4C一周内稳定,-20C稳定6个月；4) 1 作浓

4、度：0、7 ug/ml(1um o l/L)5) 在水中不溶解。亮抑蛋白酶肽(l eupep tin)1)抑制丝氨酸与巯基蛋白酶，如木瓜蛋白酶,血浆酶与组织蛋白酶B ;2 )lOmg/ml 溶于水；3) 储存液4 C稳定一周,一20C稳定6个月；4) 工作浓度0。5m g/mL胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)1)抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶；2 )lOmg / ml 溶于水,p H7 83储存液4C稳定一周,一20 C稳定6个月；4)工作浓度：0。06 2.0ug/ml(0.00。3um ol /L);5) 避免反复冻融：6) 在pH 1 2。8时失活。蛋

5、白酶抑制剂混合使用35ug/ml PMSF丝氨酸蛋白酶抑制剂0.3mg / ml E DTA金属蛋白酶抑制剂0o7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)酸性蛋白酶抑制剂0 .5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leup e p t in)广谱蛋白酶抑制剂常用蛋白酶抑制剂表抑制剂靶蛋白酶有效浓度储藏溶液注解Anti pain木瓜酶与胰酶50ug/ml1mg/ml水溶液对胰凝蛋白酶，胃液 素,纤溶酶无影响APMSF胰蛋白酶样丝氨酸 蛋白酶10一40ug/ml 或10 20UM10 0mmo l /L水溶液毒性比PMSF低，不能 抑制胰凝蛋白酶或 乙酰胆碱酯酶抑肽酶丝氨酸蛋白酶0.062ug/ml10

6、mg/mlPBS 溶液避免反复动冻融抑氨肽酶B氨基肽酶4 0ug/ml溶于甲醇不能抑制羧肽酶Calpa i n抑制剂I、IICalpain (钙依赖性半胱氨酸蛋白 酶)I:17ug/mlII:7ug/ml溶于乙醇可渗透薄膜抑糜肮酶素胰凝乳蛋白酶6-60ug/ml溶于DMSOB。M、综合酶片丝氨酸，半胱氨酸与 金属蛋白酶每105 0ml细胞 提取液内加一片不含EDTAEDTA金属蛋白酶0、2一0.5mg / ml 或0、513um ol/L5 0 0mmol/ L 水溶液 pH = 8. 0抑蛋白酶醛肽丝氨酸蛋白酶，巯基 蛋白酶0。5-2ug/ml10mg/ml水溶液a厂巨球蛋白广谱1U/ml1

7、0 0U/ml PBS 溶液避免接触还原剂Pefabloc SC (boe一 hringerMannheim)丝氨酸蛋白酶0.1-1。0 m g/ml 或 0、4一4mmol/ L1 0 0mM水溶液无毒,在中性pH下较PMSF稳定胃蛋白酶抑制剂酸性蛋白酶0、7ug/ml1mg/ml甲醇溶液PMSF丝氨酸蛋白酶17-170ug/ml10mg /ml异丙醇溶 液每一操作步骤时新 鲜加入TLCK胰蛋白酶3 7-50 ug/ml1mg/m 】溶于 50mMmol/L醋酸盐溶液，pH=50对胰凝蛋白酶无影 响TPCK胰凝乳蛋白酶70-100 ug/ml3mg / ml乙醇溶液对胰蛋白酶无影响作者青岚点

8、击:次来源于-生物秀知道首页实验实验中心常用蛋白酶抑制剂(p r。tease i n hibitor)与磷酸酶抑制剂得贮存与工作液浓度常用蛋白S抑制(protease inhibito)与磷酸酶抑制剂得贮存与工作液浓度20 1 4 0 6 -09 23:01:0 2来源：浏览次数:119网友评论d 条常用蛋白酶抑制剂(pro tease inhibitor)与磷酸酶抑制剂得贮存与工作液浓度在与蛋白 相关得检测中，首先最关键得一步便就是蛋白质得提取。蛋白质得提取过程中,我们要经常加 与蛋白酶抑制剂(pr。tease inh i bitor)以防止蛋白质得降解。另外在磷酸化蛋白得研究过 程中，磷酸

9、酶抑制剂也就是必不可少得，本文总结了常用得蛋白酶抑制剂(protease inhibit or)PMSF,Le upe ptin 亮肽素,Apro t inin 抑肽酶,Peps t atin 胃蛋白酶抑制剂(p ro t e a s 蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸在与蛋白相关得检测中,首先最关键得一步便就是蛋白质得提取。蛋白质得提取过程中，我们 要经常加与蛋白酶抑制剂(p rotease inhibito r)以防止蛋白质得降解。另外在磷酸化蛋白 得研究过程中，磷酸酶抑制剂也就是必不可少得，本文总结了常用得蛋白蜜抑制剂(protea s e i nhibi

10、tor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin 抑肽酶,Pep stat in 胃蛋白 酶抑制剂(protease inhibitor),EDIA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3V0 4原矶酸钠，BETAg lyceroph o sp ha t e甘油磷酸钠,Na2P2O4焦磷酸钠 等。对这些蛋白酶抑制剂(pr o tease inhibi t or)得溶解配制，贮存液与工作液浓度,保存都 做了详细得说明、蛋白酶抑制剂(p ro tease in hibitor)PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inh i bitor),如胰凝乳蛋白酶，胰蛋

11、白酶与凝血酶，也抑制 半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆得地面处理)、溶解性:溶于异丙醇，乙醇，甲醇与丙二醇果10m g/ml。在水溶液中不稳定。在100%异丙 醇，+25C时稳定至少9个月分子量：174、2使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1 mMLe u pe p tin亮肽素特性:抑制丝氨酸与半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶,与组织蛋白酶B溶解性:高度溶于水(1mg/ml)、4 C一周稳定，分成小份冷冻在一2 0C至少6个月分子量:C20H 3 8N6O4 x 1/2 H2 S O4: 4 75、6C2 0H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:49 3、6使用

12、:贮存浓度:1 mg/ml,工作浓度0 .5 ug/m l (1 mM)A protinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰 蛋白酶，糜蛋白酶得高活性、不抑制凝血酶或因子X、溶解性:易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如,t ri s,0、l M,pH 8、O ）pH约78得溶 液在4C可保存1周，分装保存在一20C可至少保存6个月。避免反复冻融，pH12。8得碱 性环境可使其灭活。分子量：6,512使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度:0。06-2。0 u g / ml（0、O 1-0。3 uM）Pepstatin

13、胃蛋白酶抑制剂（protease inhibitor）特性:抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织蛋白酶D ,凝乳酶，许多微生物酸性蛋 白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml;在 6当量乙酸中溶解度 为30 0 ug / ml、4C稳定一周，分装储存于一20C时可保存1个月分子量：685。9使用:贮存浓度:1 m g/ ml,使用浓度:0.7 pg/ml（ 1 pM）EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂（protease in h ibitor）溶解性:溶于水至0。5M,在pH8-9得条件下,4C稳定至少6个月分子量:3 7 2.24使用:工作浓

14、度:0.2-0、5 mg/ml（0、5-1。3 mM），不需现用现配,在溶液pH值调至8 9时再加入。磷酸酶抑制剂NaF氟化钠溶解性:溶于水分子量：4 1。99使用：贮存液:5M工作浓度:10-2 0mMNa 3VO4原矶酸钠分子量:183.9 1 溶解性:溶于水，我们购买过来得就是原矶酸钠。原矶酸钠需要经过处理以后才能成为激活得 矶酸钠，激活得矶酸钠才具有抑制去磷酸化得作用、原矶酸钠变成激活得矶酸钠得过程就是 100mM原矶酸钠激活储存液配制照1)。取0o 183克得原矶酸钠溶解于10ml得双蒸水中, 加酸调节PH至10(颜色变黄)A(2)。煮至无色必3).室温冷却(4) o重调PH至1 0(5) 重复(1)(2)(3)(4)直至溶液保持无色，并且PH稳定于10,分装10 05/管，每10ml裂解液加 一管。(终浓度为1mM),2 0度保存。使用：贮存液:100mM工作浓度:1 mMBETA-gl y ceroph o sp h a t e 甘油磷酸钠溶解性:溶于水分子量:306. 1 1使用:贮存液:1 00mM工作浓度:25mMN a 2P2O 4焦磷酸钠溶解性:溶于水分子量:265、9贮存液:10 0mM,工作浓度:12 mM关键词:蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸