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1、微生物检检验实验验室操作作技术要要求第一节 实验验室管理理制度一、实验验室管理理制度1实验验室应制制定仪器器配备管管理、使使用制度度，药品品管理、使使用制度度，玻璃璃器皿管管理、使用制制度，并并根据安安全制度度和环境境条件的的要求，本本室工作作人员应应严格掌掌握，认认真执行行。2进入入实验室室必须穿穿工作服服，进入入无菌室室换无菌菌衣、帽帽、鞋，戴戴好口罩罩，非实实验室人人员不得得进入实实验室，严严格执行行安全操操作规程程。3实验验室内物物品摆放放整齐，试试剂定期期检查并并有明晰晰标签，仪仪器定期期检查、保保养、检检修, 严禁在在冰箱内内存放和和加工私私人食品品。4各种种器材应应建立请请领消耗
2、耗记录，贵贵重仪器器有使用用记录，破破损遗失失应填写写报告；药品、器器材、菌菌种不经经批准不不得擅自自外借和和转让，更更不得私私自拿出出。5禁止止在实验验室内吸吸烟、进进餐、会会客、喧喧哗，实实验室内内不得带带入私人人物品，离离开实验验室前认认真检查查水电，对对于有毒毒、有害害、易燃燃、污染染、腐蚀蚀的物品品和废弃弃物品应应按有关关要求执执行。6负责责人严格格执行本本制度，出出现问题题立即报报告，造造成病原原扩散等等责任事事故者，应应视情节节直至追追究法律律责任。二、仪器器配备、管管理使用用制度1食品品微生物物实验室室应具备备下列仪仪器：培培养箱、高高压锅、普普通冰箱箱、低温温冰箱、厌厌氧培养
3、养设备、显显微镜、离离心机、超超净台、振振荡器、普普通天平平、千分分之一天天平、烤烤箱、冷冷冻干燥燥设备、匀匀质器、恒恒温水浴浴箱、菌菌落计数数器、生生化培养养箱，电电位pHH计、高高速离心心机。2.实验验室所使使用的仪仪器、容容器应符符合标准准要求，保保证准确确可靠，凡凡计量器器具须经经计量部部门检定定合格方方能使用用。3实验验室仪器器安放合合理，贵贵重仪器器有专人人保管，建建立仪器器档案，并并备有操操作方法法，保养养、维修修、说明明书及使使用登记记本，做做到经常常维护、保保养和检检查，精精密仪器器不得随随意移动动，若有有损坏需需要修理理时，不不得私自自拆动、应应写出报报告、通通知管理理人员
4、，由经理同意填报修理申请、送仪器维修部门。4各种种仪器（冰冰箱、温温箱除外外），使使用完毕毕后要立立即切断断电源，旋旋钮复原原归位，待待仔细检检查后，方方可离去去。5一切切仪器设设备未经经设备管管理人员员同意，不不得外借借，使用用后按登登记本的的内容进进行登记记。6仪器器设备应应保持清清洁，一一般应有有仪器套套罩。7使用用仪器时时，应严严格按操操作规程程进行，对对违反操操作规程程的因管管理不善善致使仪仪器械损损坏，要要追究当当事者责责任。三、药品品管理、使使用制度度1依据据本室检检测任务务，制定定各种药药品试剂剂采购计计划，写写清品名名、单位位、数量量、纯度度、包装装规格，出出厂日期期等，领领
5、回后建建立账目目，专人人管理，每每半年做做出消耗耗表，并并清点剩剩余药品品。2药品品试剂陈陈列整齐齐，放置置有序、避避光、防防潮、通通风干燥燥，瓶签签完整，剧剧毒药品品加锁存存放、易易燃、挥挥发、腐腐蚀品种种单独贮贮存。3领用用药品试试剂，需需填写请请领单、由由使用人人和室负负责人签签字，任任何人无无权私自自出借或或馈送药药品试剂剂，本单单位科、室室间或外外单位互互借时需需经科室室负责人人签字。4称取取药品试试剂应按按操作规规范进行行，用后后盖好，必必要时可可封口或或黑纸包包裹，不不使用过过期或变变质药品品。四、玻璃璃器皿管管理、使使用制度度1根据据测试项项目的要要求，申申报玻璃璃仪器的的采购
6、计计划、详详细注明明规格、产产地、数数量、要要求，硬硬质中性性玻璃仪仪器应经经计量验验证合格格。2大型型器皿建建立账目目，每年年清查一一次，一一般低值值易耗器器皿损坏坏后随时时填写损损耗登记记清单。3玻璃璃器皿使使用前应应除去污污垢，并并用清洁洁液或22%稀盐盐酸溶液液浸泡224 hh后，用用清水冲冲洗干净净备用。4器皿皿使用后后随时清清洗，染染菌后应应严格高高压灭菌菌，不得得乱弃乱乱扔。五、安全全制度1进入入实验室室工作衣衣、帽、鞋鞋必须穿穿戴整齐齐。2在进进行高压压、干燥燥、消毒毒等工作作时，工工作人员员不得擅擅自离现现场，认认真观察察温度、时时间，蒸蒸馏易挥挥发、易易燃液体体时，不不准直
7、接接加热，应应置水浴浴锅上进进行，试试验过程程中如产产生毒气气时应在在避毒柜柜内操作作。3严禁禁用口直直接吸取取药品和和菌液，按按无菌操操作进行行，如发发生菌液液、病原体体溅出容容器外时时，应立立即用有有效消毒毒剂进行行彻底消消毒，安安全处理理后方可可离开现现场。4工作作完毕，两两手用清清水肥皂皂洗净，必必要时可可用新洁洁尔灭、过过氧乙酸酸泡手，然然后用水水冲洗，工工作服应应经常清清洗，保保持整洁洁，必要要时高压压消毒。5实验验完毕，即即时清理理现场和和实验用用具，对对染菌带带毒物品品，进行行消毒灭灭菌处理理。6每日日下班，尤尤其节假假日前后后认真检检查水、电电和正在在使用的的仪器设设备，关关
8、好门窗窗，方可可离去。六、环境境条件要要求1实验验室内要要经常保保持清洁洁卫生，每每天上下下班应进进行清扫扫整理，桌桌柜等表表面应每每天用消消毒液擦擦拭，保保持无尘尘，杜绝绝污染。2实验验室应井井然有序序，不得得存放实实验室外外及个人人物品、仪仪器等，实实验室用用品要摆摆放合理理，并有有固定位位置。3随时时保持实实验室卫卫生，不不得乱扔扔纸屑等等杂物，测测试用过过的废弃弃物要倒倒在固定定的箱筒筒内，并并及时处处理。4实验验室应具具有优良良的采光光条件和和照明设设备。5实验验室工作作台面应应保持水水平和无无渗漏，墙墙壁和地地面应当当光滑和和容易清清洗。6实验验室布局局要合理理，一般般实验室室应有
9、准准备间和和无菌室室，无菌菌室应有有良好的的通风条条件，如如安装空空调设备备及过滤滤设备，无无菌室内内空气测测试应基基本达到到无菌。7严禁禁利用实实验室作作会议室室及其他他文娱活活动和学学习场所所。第二节实实验室技技术操作作要求一、无菌菌操作要要求食品微生生物实验验室工作作人员，必必须有严严格的无无菌观念念，许多多试验要要求在无无菌条件件下进行行，主要要原因：一是防防止试验验操作中中人为污污染样品品，二是是保证工工作人员员安全，防防止检出出的致病病菌由于于操作不不当造成成个人污污染。1接种种细菌时时必须穿穿工作服服、戴工工作帽。2进行行接种食食品样品品时，必必须穿专专用的工工作服、帽帽及拖鞋鞋
10、，应放放在无菌菌室缓冲冲间，工工作前经经紫外线线消毒后后使用。3接种种食品样样品时，应应在进无无菌室前前用肥皂皂洗手，然然后用775酒酒精棉球球将手擦擦干净。4进行行接种所所用的吸吸管，平平皿及培培养基等等必须经经消毒灭灭菌，打打开包装装未使用用完的器器皿，不不能放置置后再使使用，金金属用具具应高压压灭菌或或用955%酒精精点燃烧烧灼三次次后使用用。5从包包装中取取出吸管管时，吸吸管尖部部不能触触及外露露部位，使使用吸管管接种于于试管或或平皿时时，吸管管尖不得得触及试试管或平平皿边。6接种种样品、转转种细菌菌必须在在酒精灯灯前操作作，接种种细菌或或样品时时，吸管管从包装装中取出出后及打打开试管
11、管塞都要要通过火火焰消毒毒。7接种种环和针针在接种种细菌前前应经火火焰烧灼灼全部金金属丝，必必要时还还要烧到到环和针针与杆的的连接处处，接种种结核菌菌和烈性性菌的接接种环应应在沸水水中煮沸沸5miin，再再经火焰焰烧灼。8吸管管吸取菌菌液或样样品时，应应用相应应的橡皮皮头吸取取，不得得直接用用口吸。二、无菌菌间使用用要求1无菌菌间通向向外面的的窗户应应为双层层玻璃，并并要密封封，不得得随意打打开，并并设有与与无菌间间大小相相应的缓缓冲间及及推拉门门，另设设有0.5-00.7mm2的小小窗，以以备进入入无菌间间后传递递物品。2无菌菌间内应应保持清清洁，工工作后用用2%-3%煤煤酚皂溶溶液消毒毒，
12、擦拭拭工作台台面，不不得存放放与实验验无关的的物品。3无菌菌间使用用前后应应将门关关紧，打打开紫外外灯，如如采用室室内悬吊吊紫外灯灯消毒时时，需330W紫紫外灯，距距离在11.0mm处，照照射时间间不少于于30mmin，使使用紫外外灯，应应注意不不得直接接在紫外外线下操操作，以以免引起起损伤，灯灯管每隔隔两周需需用酒精精棉球轻轻轻擦拭拭，除去去上面灰灰尘和油油垢，以以减少紫紫外线穿穿透的影影响。4处理理和接种种食品标标本时，进进入无菌菌间操作作，不得得随意出出入，如如需要传传递物品品，可通通过小窗窗传递。5在无无菌间内内如需要要安装空空调时，则则应有过过滤装置置。三、消毒毒灭菌要要求微生物检检
13、测用的的玻璃器器皿、金金属用具具及培养养基、被被污染和和接种的的培养物物等，必必须经灭灭菌后方方能使用用。（一）干干热和湿湿热高压压蒸气锅锅灭菌方方法1灭菌菌前准备备 （1）所所有需要要灭菌的的物品首首先应清清洗晾干干，玻璃璃器皿如如吸管、平平皿用纸纸包装严严密，如如用金属属筒应将将上面通通气孔打打开。（2）装装培养基基的三角角瓶塞，用用纸包好好，试管管盖好盖盖，注射射器须将将管芯抽抽出，用用纱布包包好。2装放放（1）干干热灭菌菌器：装装放物品品不可过过挤，且且不能接接触箱的的四壁。（2）大大型高压压蒸气锅锅：放置置灭菌物物品分别别包扎好好，直接接放入消消毒筒内内，物品品之间不不能过挤挤。3设
14、备备检查 （1）检检查门的的开关是是否灵活活，橡皮皮圈有无无损坏，是是否平整整。（2）检检查压力力表蒸气气排尽时时是否停停留在零零位，关关好门和和盖，通通蒸气或或加热后后，观察察是否漏漏气，压压力表与与温度计计所标示示的状况况是否吻吻合，管管道有无无堵塞。（3）对对有自动动电子程程序控制制装置的的灭菌器器，使用用前应检检查规定定的程序序，是否否符合于于进行灭灭菌处理理的要求求。4灭菌菌处理 (1)干干热灭菌菌法：此此法适应应于在干干热情况况下，不不损坏、不不变质、不不蒸发的的物品、较较常用于于玻璃器器皿、金金属制品品、陶瓷瓷制品等等的灭菌菌。a器械械器皿应应清洗后后再干烤烤，以防防附着在在表面
15、的的污物炭炭化。b灭菌菌时安放放物品不不能过挤挤，不要要直接接接触底和和箱壁，物物品之间间留有空空隙。c菌时时将箱门门关紧，接接上电源源，先将将排气孔孔打开约约30mmin，排排除灭菌菌器中的的冷空气气，温度度升至1160调节指指示灯，维维持1.5 2h。d灭菌菌完毕后后或温度度升温过过程中，须须在600以下下才能打打开箱门门。(2) 手提式式高压锅锅或立式式压力蒸蒸气灭菌菌器的使使用应按按下列步步骤进行行：a手提提式高压压锅在主主体内加加入3LL清水，立立式高压压锅加水水16LL（重复复使用时时应将水水量补足足，水变变混浊需需更换）.b手提提式压力力锅将顶顶盖上的的排气管管插入消消毒桶内内壁的方方管中（无无软管或或软管锈锈蚀破裂裂的灭菌菌器不得得使用）。c盖好好顶盖拧拧紧，勿勿使漏气气；置灭灭菌器于于火源上上加热，立立式压力力锅通上上电源，并并打开顶顶盖上的的排气阀阀放了冷冷气（水水沸腾后后排气110-115miin）。d关闭闭排气阀阀，使蒸蒸气压上上升到规规定要求求，并维维持规定定时间（按按灭菌物物品性质质与有关关情况而而定）。e达到到规定时时间后，对对需干燥燥的物品品，立即即打开排排气阀排排出蒸气气，待压压力恢复
