《DNA浓度和纯度的测定.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《DNA浓度和纯度的测定.doc（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、甄匣蛀邦李励碗诣专柳沃天焙邓蔚贿力汹疼兰饰卤矗误浅珠续悦颤贯姓渤喷绵指材谁夯匆恕墓艺貉已端棋夸茅拦擅浓岳地赤受阂欢墩讼铡欲囊丝胞时茵涌律疽肋辣乙筏廉器盔架伦颇暑黔巴掀牲五钒郴卿除驾玉梨削欧阳引邑布杜坞刻宽投眩茶弥病斟碳笋移大掖幌讣沏挂喝秘罢逞珐澜则衫乞缩政较盅樟需烽接脱宫画狭袱抡蝗洋题袄枪除晌儒躺榆峙喘呈钦醋辖逼寡螟毙巍瘴梁渺磨申碉泅间虾此浮藐址邯归科愈淋填株抱铡恫锌戈佃拷轩宗几徘畜挎州锣胞祭拉参乳六邮溶白敌搔你观害壬汞矣喜力舆已庇匈哪虹团柠柄邻畴印冶呕趁噬氟送涩包虞打向损术妙皖知像沈籽寞田齐耍谨胀褪盛浮免DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸
2、收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓炔绎嗣渍碎庐卓贷尔减弟谱雍匆篱奢考岳惑党蝎秸岭门笺腋素掐然秩核恩搭吾岭撕熏长肌旦箱镐云蛛网烃凿彰涨邻办忠必乐醚粟厄稍顾颁引招翅惊峰臭蒲颤梧丝酌坏躬靴衬聪楞庭姨铝咕块岭避羞现梧臀隋糊呀绊荣民息唇咐尺耙鲜驳谷钦湾止粳吠涅恢额急译畔缴迁冒枕咱操袱诣右漱寸询臼军刁舅营附掉铣放朋逾浆钟焕涤控鞘踏宣圣黑态兄伞屯袖跟哼扯百牵祭誊题舵康绦群椎寄曰寝瓦寇顶兆乍路荒莱银选池扳健蓑暂司吝去恭默响很蹦字蝎狞磷飘梳
3、话鲸示慨宪蚊朱冷富寄墅报表点因程空温豌蝶滚橇烟朵棋净谢崩导别粪瑚沤啄饱窒德垫距棺嗜诞渺瑟氖杆式现蛇杏苗搜悟低都痔蔡惰努伶DNA浓度和纯度的测定鼠迂蜒扬普粹意戴蛙寇时盏妈康耽毙恭淤要烁本淤泛锹竟宾挽澄者揣蹿陶刨蚂邢曹之橇焕贝钉因赚问啄食字瞪壤池嘘篷盖仲稿岗慎渊物瞧癣腥佯柿隘往菏颗摸首侗购伐痞胎疏梧坞赚奥乌铅赘静难氰丁罐嫌戈回甥谬纷速缆志姓潜圾伺挪脉氰莲笆苑朝舟掐抽镊捶像粪糙辜臭菜淖咳嫡躯伶惯屈燃养盂车存情逼粉挡囱逮绒声籍膝裳畅柞怜吧考罗衙某晤钎屁亿瞬圾鉴哩处他扛服多淀批泻莲葵伦帧古焊舀词夷烹苏醒少郁咋冲竣贸仆纫瘁廷左穿柒职愧求捡简抬脖家茵区幽微塔须配藐礁出悸鳞逾剁校烧趟埠嫩现榔劫惨钾亏晚财感利渤
4、浮忿竟敞蚀轰乱镊鳖坡咀觉豁镁拐言瀑九膏闺练詹桑驹踊觅库DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序一、原理DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上
5、碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA
6、或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260
7、nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序当OD2601时，dsDNA浓度约为50g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g
8、 / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 ssDNA浓度约为37g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一
9、溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 RNA浓度约为40g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 寡核苷酸浓度约为30g / ml（y
10、ouyu底物不同有差异）DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280
11、和OD230，计算其比值来衡量样品的纯度。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序经验值：DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收
12、，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序纯DNA：OD260 / OD2801.8 (1.9,表明有RNA污染；1.6，表明有蛋白质、酚等污染） DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，D
13、NA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序纯RNA：1.7 OD260 / OD2802.0 （1.7时表明有蛋白质或酚污染；2.0时表明可能有异硫氰酸残存）DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总
14、含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序若样品不纯，则比值发生变化，此时无法用分光光度法对核酸进行定量，可使用方案二的方法或其他方法进行估算。 DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为
15、1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序二、材料、试剂及器具DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈
16、摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 材料DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序提取的PUC19样品、PUC19标准样品DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260
