《药物的鉴别试验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药物的鉴别试验（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第二章药物的鉴别试验第二章药物的鉴别试验基本要求1、掌握常用一般鉴别试验的原理、操作方法。2、熟悉鉴别试验条件对结果的影响。学习要点1、化学鉴别法一呈色、沉淀、荧光、气体、测定mp。2、光谱鉴别法一红外法(对照图谱)；紫外法(对比特征参数入max, Ei% , A,入min；比1cm较吸收度比值A1/A2的一致性；对比吸收光谱的一致性)。3、色谱法-HPLC、TLC、GC等(采用标准品对照法)。内容概述鉴别试验项目鉴别方法鉴别试验条件鉴别试验灵敏度一、概述药物的鉴别试验(identification test)判断药物的真伪药品质量检验的首项任务药典收载的鉴别试验一一均为用来证实贮藏的药物是否
2、为其所标示的药物。 这些方法有一定的专属性，但不能赖以鉴别未知物。对于原料药，还应结合性状项下的外观和物理常数进行综合判断。二、鉴别试验的项目鉴别1、性状(descrip tion)2、鉴别(identification)性状反映了药物特有的物理性质包括：1、外观聚集状态、晶型、色、臭、味2、物理常数mp, bp, a tD, E1% , n 等1cm3、溶解度4、熔点:1、固体一一液体的温度2、熔融同时分解的温度3、初熔-全熔的一段温度5、ChP收载方法第一法：测定易粉碎的固体药品第二法：测定不易粉碎的固体药品第三法：测定凡士林或其他类似物6、要求报告初熔和终熔7、比旋度：在一定波长（589
3、.3nm）与温度（20 C）下，偏振光透过长1dm,含旋光性物质1g/1mL 的溶液时测得的旋光度a,称为比旋度。atD =是手性药物特性及其纯度的主要指标。8、吸收系数在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度（C）、单位液层厚度（L）时 的吸收度，称为吸收系数（E1%或e）。1cmE1%= A / CXL1cmC= 1%或 1mol/L, L= 1cm一般鉴别试验（general identification test）依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 有机药物:官能团反应。无机药物：阴、阳离子的反应阴、阳离子的特殊反应例钠盐、钾盐、钙盐的焰
4、色反应铵盐鉴别方法硝酸亚汞试紙试氯化物 鉴别一一供试液+硝酸+硝酸银f硫酸盐鉴别一一供试液+氯化钡f白色/白色/白色/ +氨试液f沉淀溶解+硝酸f白色白色/ +硝酸(盐酸)f沉淀不溶有机药物一一典型的官能团反应。包括：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有 机氟化物类、水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐等鉴别。例有机氟化物鉴别被碱性溶液 吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在样品经氧瓶燃烧法破坏，pH4.3溶液中形成篮紫色络合物。 反应原理如下：由上可知，一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。 专属鉴别试验(specific identification test )是证实
5、某一种药物的依据。根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定 性反应，来鉴别药物的真伪。例巴比妥类药物含有共同母核，区别在于5, 5-位取代基和2-位取代基的不同：苯巴比妥苯环司可巴比妥一-双键硫喷妥钠硫原子又如甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要差别在A环和D环的取代基不同，可利用这 些结构特征进行鉴别确证。综上所述，一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质 进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。而专属鉴别试验，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物, 以区别同类药物或具有相同化学结
6、构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。三、鉴别方法要求：专属，再现，灵敏，操作简便、快速常用方法有：（一）、化学鉴别法一一呈色，沉淀，荧光，气体三氯化铁呈色反应-酚羟基；异羟肟酸铁反应-芳酸、酯、酰胺；一茚三酮呈色反应类似氨基酸结构；重氮化-偶合显色反应-芳伯氨基；氧化还原显色等等。与重金属离子的沉淀反应； 与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应。药物本身产生荧光；与各种试剂（硫酸、溴、间苯二酚等）反应后产生荧光；强碱处理，加热，产生氨（胺）气；强酸处理，加热，发生硫化氢气体；直火加热，生成紫色碘蒸气；硫酸水解，加乙醇产生醋酸乙酯香味。（二）、光谱鉴别法一一紫外法一一在指定溶剂中测定23
7、个特定波长处的吸收度比值（峰值与峰值比或峰值 与峰谷比），以提高专属性。例地蒽酚的鉴别试验：取含量测定项下的溶液，照分光光度法测定，于240400nm的波长范围内测定吸收度, 在257、289与356nm的波长处有最大吸收。规定：A /A 应为1.061.10；257289A /A 应为 0.900.94。356289对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时，采用单一浓度不易观察到全部吸收峰，可 采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长。例氯贝丁酯的鉴别试验：取本品，加无水乙醇制成每1mL中含0.10mg的溶液（1）与每1mL 中含10ug的溶液（2），照分光光度法测定，溶液（2）在226nm
8、的波长处有最大吸收；溶液（1） 在280与288nm的波长 处有最大吸收。综上所述，紫外鉴别方法通常有(1)入max,入min(2)入-A(3)入-吸收系数(4)入A1/入A2(5)化学处理后测定产物的光谱特性不同国家测定方法略有不同：USP （27）采用对照品法，将样品与对照品按同法处理，在200400nm波长范围内扫描两溶液， 要求在相同的波长处有最大吸收、最小吸收和相同的吸收系数，或吸收比在规定的限度内。JP（14）测定方法与中国药典相似。BP（2000）规定一定波长范围内仅有一个最大吸收或一个最小吸收。红外光谱鉴别法红外光谱法是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法
9、。主要 用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于用其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾 体激素类和半合成抗生素类药品。Ch.P和BP均采用标准图谱对照法，中国药典对XX药物的鉴别试验：本品的红外光吸 收图谱应与对照的图谱（光谱集XX图）一致。而USP则采用对照品法，例阿莫西林的鉴别试验：取本品，经干燥后用溴化钾压片法测 定，所得图谱与USP阿莫西林参考标准品的图谱一致。JP采用规定条件下测定一定波数处的特征吸收峰。例：氯羟去甲安定的测定取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定，其红外光吸收图谱中 3440cm-i，3220 cm-i，1695 cm-i，1614 cm-i，1324 cm-i，
10、1132 cm-i 以及 828 cm-i波数附近处有吸 收。中国药典试样制备有四种方法： 压片法一一用于固体（溴化钾） 糊法一一用于固体 膜法一一用于液体 溶液法一一用于液体 测定前应录制聚苯乙烯薄膜光谱图，并与标准谱图对照，以检查仪器性能。（三）、色谱（TLC, HPLC, GC）鉴别法利用物质各自的特征色谱行为（Rf值或tR值）进行鉴别试验。采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，根据两者保留行为和检测结果是否一致来验 证药品的真伪。药物鉴别方法新动向：仪器方法用于药物的鉴别数量大大增加，尤其是IR法和HPLC法。英美药典采用的仪器鉴别法与化学鉴别法的条目比约是2：1。制剂广泛采用IR法鉴
11、别，采取提取分离后再压片绘制图谱。鉴别条目简练，选择专属的方法进行鉴别，平均每个品种收载2条左右。四、鉴别试验条件鉴别试验必须在规定条件下完成，否则将会影响结果的判断。 影响因素主要有：（1）被测物浓度；（2）试剂的用量；（3）溶液的温度；（4）溶液pH；（5）反应时间；（6）共存的干扰物质等五、鉴别试验的灵敏度鉴别试验是以灵敏的专属反应为依据，在合适的条件下进行试验判定的。如果鉴别反应的灵 敏度愈高，则所需要的药物量就愈少。在一定条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满 足的程度，即称为反应的灵敏度（sensitivity）。它用两个相互有关的量来表示：1、
12、最低检出量（又称检出限量）（minimum detectable quantity）以m表示，即应用某一反应，在一定的条件下，能够观测出结果的供试品的最小量，其单位 通常用微克（ug）表示。最低检出量愈小，反应愈灵敏。2、最低检出浓度（又称界限浓度）（minimum detectable concentration）在一定条件下，若1份被测物溶解在G份溶剂中能被测出，而在大于G份溶剂中不能被 检出，则1： G就是这一供试品的最低检出浓度。最低检出量和最低检出浓度之间的关系1： G=（m/106）： Vm=V/GX10e空白试验 （blank test）在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而 进行的试验。提高反应灵敏度的方法加与水互不相溶的有机溶剂提取；改进观测方法：目视法-仪器法。
