动物实验基本操作

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1、动物实验基本操作实验动物抓取保定方法 一、小鼠的抓取保定小鼠性情较温顺，挣扎力小，比较容易抓取和保定。抓取时，用左手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部（如图11-3所示）放在格板或铁笼上。趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小鼠的尾巴根部握入手掌（如图11-4所示）；放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠（如图11-5所示），完成抓取保定。注意，抓小鼠尾巴应抓住尾巴中部或根部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，因为这时小鼠的重量全部集中到尾端，如果小鼠挣扎，有可能弄破尾端。在进行解剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可将小鼠用线绳捆绑在木版上，或固定

2、在尾静脉注射架及粗试管中。引自：Victoria solberg:Laboratory manual for animal technicians二、大鼠的抓取保定抓取大鼠前最好戴上防护手套，右手轻轻抓住大鼠尾巴的中部并提起，迅速放在笼盖上或其他粗糙面上，左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行，以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。（如图11-6所示）对大鼠在进行解剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可用线绳加木版、尾静脉注射架等装置进行固定。三、豚鼠的抓取保定豚鼠性情温顺，胆小易惊，一般不易伤人。捉拿时，实验人员可先用手轻轻扣、按

3、住豚鼠背部，顺势抓紧其肩胛上方皮肤，拇指和食指环 其颈部，用另一只手轻轻托住其臀部，即可将豚鼠抓取保定（如图11-7所示）。抓取豚鼠需讲究稳、准、柔、快，不可过分用力抓捏豚鼠的腰腹部，否则容易造成肝破裂、脾淤血而引起死亡。如果在动物实验操作过程中，豚鼠挣扎剧烈，实验人员遇到这种情况，可以用纱布将豚鼠头部蒙住，把豚鼠置于实验台上，实验人员稍为用力扣、按住豚鼠，然后进行操作。四、兔的抓取保定家兔驯服不咬人，但四肢的爪尖锐，挣扎时容易抓伤人。抓取保定方法是用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，提起家兔，然后用左手托住臀部。另一种方法是使用家兔保定栏，打开保定栏的前盖（如图11-8所示），抓取家兔放进

4、栏内，右手抓住家兔耳朵将头部拉过保定栏的开孔，迅速关上栏门。假如家兔挣扎，可用手在它的背上轻轻扶摸，使它安静下来，因为家兔挣扎很容易损伤脊柱。需要进行手术时，可将家兔固定在兔实验台上，四肢固定，门齿用细绳栓住，固定在实验台的铁柱上。引自：Victoria solberg:Laboratory manual for animal technicians五、犬的抓取保定犬性情凶猛、咬人，但通人性。如果犬在动物实验前曾与实验人员有接触，受过驯养调教，抓取保定就比较容易。受过驯养的犬或哔格犬的抓取保定，实验人员应弯下膝盖，一只胳膊绕着它的胸部，另一只胳膊绕着后肢的大腿，两只胳膊一起绕着将犬抱起。取保定

5、比较凶猛的犬时，应使用特制的长柄犬头钳夹住犬颈部，注意不要夹伤嘴或其他部位。夹住犬颈后，迅速用链绳从犬夹下面圈套住犬颈部，立即拉紧犬颈部链绳使犬头固定。再用1米长的绷带打一活套（如图11-9所示），从犬的背面或侧面将活套套在其嘴面部（如图11-10所示），迅速拉紧活套结，将结打在颌上，然后绕到下颌打一个结，最后将绷带引至颈后部打结固定。麻醉后用绷带捆住犬的四肢，固定在实验台上。头部用犬头固定器固定好后，就可解去嘴上的绷带，以利犬呼吸和实验人员观察。这时可以进行手术等实验操作。引自：Victoria solberg:Laboratory manual for animal technicians

6、六、猴的抓取保定（一）猴房内或露天大笼内捕捉采用捕猴网进行捕捉，捕猴网是用尼龙绳编织成的网袋，网孔直径以不超过3厘米为宜，网口系在直径50厘米大小的钢筋圈上（钢筋直径约1厘米），捕猴网连有1.5米长的木柄。捕捉时动作要迅速准确，不要损伤头部及其他要害部位。猴入网后，将圈网按在地上，紧紧压住猴头或抓住颈后部（以防回头咬人），再将猴双前肢反背于猴的身后（如图11-11所示），捉住后将猴由网中取出，在捕捉凶猛的雄猴时应戴上防护皮手套，并有23个人紧密配合。（二）笼内捕捉指单笼饲养的实验猴在笼内的捕捉法，猴笼设计成笼的后壁可向前滑动（如图11-12所示），捕捉时拉动杠杆，使笼的后壁向前滑动，将猴夹在笼

7、的前后壁之间，随即将猴的双前肢从笼隙拉出笼外并紧紧握住，使猴更加固定，另一人戴上防护手套推开笼门，抓住猴头，然后小心地将双前肢反背于猴的身后，由笼中提出猴子。（三）固定椅固定猴固定椅基本上是由头枷和坐椅构成，坐椅可升降，头枷可固定猴头。固定椅外型与尺寸见图11-13。固定椅可根据猴体型的大小随意旋转升降杠调整椅子的高低；猴头枷上颈孔的大小可根据猴脖子的粗细作调整。固定后猴的头部与身体以枷板分开，操作者可避免被咬伤和抓伤，枷板同时又是工作台，可放少量器械。引自：Victoria solberg:Laboratory manual for animal technicians实验动物采血 采血方法

8、的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、CI-离子浓度，必须采取动脉血液。 采血时要注意：采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25-28，冬季，15-20为宜；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若需抗凝全血，在

9、注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 取少量血 尾静脉 大鼠、小鼠 耳静脉 兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 眼底静脉丛 兔、大鼠、小鼠 d舌下静脉 兔 e腹壁静脉 青蛙、蟾蜍 f冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅 取中量血 后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫 前肢内侧皮下头静脉 狗、猴、猫 耳中央动脉 兔 颈静脉 狗、猫、兔 心脏 豚鼠、大鼠、小鼠 断头 大鼠、小鼠 翼下静脉 鸡、鸭、鸽、鹅 颈动脉 鸡、鸭、鸽、鹅 取大量血 股动脉、颈动脉 狗、猴、猫、兔 心脏 狗、猴、猫、兔 颈静脉 马、牛、山羊、绵羊 摘眼球 大鼠、小鼠 采动物品种 最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml) 小 鼠 0.2 0.3 大

10、 鼠 1 2 豚 鼠 5 10 兔 10 40 狼 狗 100 500 猎 狗 50 200 猴 15 60 1.割(剪)尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm，让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.30.5ml。 2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查)，可采用本法。先将鼠尾用温

11、水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集1050mm3。如果长期反复取血，应先*近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血 采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(34cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度，小鼠约23mm，大鼠约45m

12、m。当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。 若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血 0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.81.2ml;

13、大鼠约5-10ml。 5.心脏采血 鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入右心室，吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml；大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血 先将动物仰位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉，离心端结扎，向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血 最好先将动物麻醉，仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖

14、头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血 先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml，大鼠约0.4-0.6ml。 豚鼠采血法 1.耳缘剪口采血 将耳消毒后，用锐器(刀或刀片)割破耳缘，在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液，阻止血凝，则血可自切口自动流出，进入盛器。操作时，使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。 2.心脏采血 取血前应探明心脏搏动最强部位，通常在胸骨左缘的正中，选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些，以免发生手术后穿刺孔出血，其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体

15、较小，一般可不必将动物固定在解剖台上，而可由助手握住前后肢进行采血即可。成年豚鼠每周采血应不超过10ml为宜。 3.肌动脉采血 将动脉仰位固定在手术台上，剪去腹股沟区的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切开长约2-3cm的皮肤，使股动脉暴露及分离。然后，用镊子提起股动脉，远端结扎，近端用止血钳夹住，在动脉中央剪一小孔，用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入，放开止血钳，血液即导管口流出。一次可采血10-20ml。 4.背中足静脉取血 助手固定动物，将其右或左右膝关节伸直提到术者面前。术者将动物脚背面用酒精消毒，找出背中足静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射针刺入静脉。拔针后立即出血，呈半球状隆起。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复采血时，两后肢交替使用。 兔采血法 1.耳静脉采血 本法为最常用的取血法之一，常作多次反复取血用，因此，保