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1、如何用平板培养检查法测定环境中细菌平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在37温度下培养，12天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。微生物检测材料微生物试剂、试剂盒肉膏蛋白胨琼脂仪器、耗材灭菌棉签接种环试管架酒精灯实验步骤1.写标签任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号，培养皿的
2、记号一般写在皿底上。如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时，容易混淆。用记号笔写上班级、姓名、日期，本次实验还要写上样品来源(如实验室空气或无菌室空气或头发等)，字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。2.实验室细菌检查(1)空气将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在当时做实验的实验室，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中;将另一肉膏蛋白胨琼脂平板放在无菌室或无人走动的其他实验室，移去皿盖。一小时后盖上两个皿盖。(2)实验台和门的旋钮用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间处画一垂直线。取棉签左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞
3、(或试管帽)，将其取出，将管口很快地通过煤气灯(或酒精灯)的火焰，烧灼管口;轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出。放回棉塞(或试管帽)，并将空试管放在试管架上。弄湿棉签左手取灭菌水试管，如上法拔出棉塞(或试管帽)并烧灼管口，将棉签插入水中，再提出水面，在管壁上挤压一下以除去过多的水分，小心将棉签取出，烧灼管口，放回棉塞(或试管帽)，并将灭菌水试管放在试管架上。取样将湿棉签在实验台面或门旋钮上擦拭约2平方厘米的范围。接种，A在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿开启成一缝。再将棉签伸入，在琼脂表面顶端接种(滚动一下)，立即闭合皿盖。将原放棉签的空试管拔出棉塞(或试管帽)，烧灼管口，插
4、入用过的棉签，将试管放回试管架。划线另取接种环在火焰上灭菌，先将环端烧热，然后将接种环提起垂直放在火焰上，以使火焰接触金属丝的范围广一些，待接种环烧红，再将接种环斜放，沿环向上，烧至可能碰到培养皿的部分，再移向环端，如此很快地来回通过火焰数次。左手拿起平板，同样开启一缝，将灭过菌并冷却了的接种环(可在琼脂表面边缘空白处试温度，若发出溅泼声，表示太烫)，通过琼脂顶端的接种区，向下划线，直到平板的一半处。注意：接种环与琼脂表面的角度要小，移动的压力不能太大，否则会刺破琼脂。闭合皿盖，左手将平板向左转动至空白处，右手拿的接种环再在火焰上烧灼，使冷。接种环通过前面划的线条再在琼脂的另一半，从上向下来回
5、划线至1/2处。烧灼接种环，转动平板，划最后1/4，立刻盖上皿盖，烧灼接种环，放回原处。整个划线操作均要求无菌操作，即靠近火焰，而且动作要快。3.人体细菌的检查(1)手指(洗手前与洗手后)分别在两个琼脂平板上标明洗手前与洗手后(当然，班级、姓名、日期各项在每次写标签时是必不可少的)。移去皿盖，将未洗过的手指在琼脂平板的表面，轻轻地来回划线，盖上皿盖。用肥皂和刷子，用力刷手，在流水中冲洗干净，干燥后，在另一琼脂平板表面来回移动，盖上皿盖。(2)头发：在揭开皿盖的琼脂平板的上方，用手将头发用力摇动数次，使细菌降落到琼脂平板表面，然后盖上皿盖。(3)咳嗽：将去盖琼脂平板放在离口约68 cm 处，对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。(4)鼻腔按照实验台检查法的步骤和，取出棉签，并将其弄湿。用湿棉签在鼻腔内滚动数次。按实验台检查法的步骤和，接种与划线，然后盖上皿盖。4.将所有的琼脂平板翻转，使皿底在上，放37培养箱，培养12天。5.结果分析(1)菌落计数在划线的平板上，如果菌落很多而重叠，则数平板最后1/4面积内的菌落数。不是划线的平板，也一分为四，数1/4面积的菌落数。(2)根据菌落大小、形状、高度、干湿等特征观察不同的菌落类型。但要注意，如果细菌数量太多，会使很多菌落生长在一起，或者限制了菌落生长而变得很小，因而外观不典型，故观察菌落的特点时，要选择分离得很开的单个菌落。
