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1、环境卫生学监测一、物体表面卫生学监测医院物体表面的微生物污染为不均匀性污染，检测时如采取标本不当，可影响结果的准确性。1、采样时间根据采样目的选择采样时间，如进行常规物体表面监测，选择消毒处理后进行采样；若是暴发流行时的环境微生物学检测，则尽可能对未处理的现场进行采样。2、采样面积常规检测时被采面积=100平方厘米，取100平方厘米。暴发流行时采样不受此限3、采样方法棉拭子法（1）对于平面的物体，用5cm乘5cm大小的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（吐温-80 1g、蛋白胨10g、氯化钠8.5g、蒸馏水1 000mL配置而成，pH7.27.4，121摄氏度压力
2、蒸汽灭菌20分钟）的棉拭子一支，在规格板内横竖往返均匀涂抹各五次，并随之转动棉拭子，连续采样14个规格板面积。将棉拭子折去手接触部分，放入装有10mL含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。（2）对于门把手、金属、玻璃等曲面的小型物体则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样。2.压印法 采用以直径为5.6cm（面积约为25平法厘米）的平皿，倾注营养琼脂培养基，使培养基高出平皿口12mm，凝固后置4摄氏度冰箱保存待用。检测时将平板上的培养基表面 压贴在物体上1020秒，送检。4、注意事项1、.采取的标本要有足够的样本数量且具有代表性。如层流洁净手术室，选择具有代表性采样地点，每个房间每种（
3、如手术台、桌、灯等）表面不少于2点。2.、采样时，棉拭子处于湿润状态，如处于饱和状态可将多余的采样液在采样管壁上挤压去除。禁止使用干棉拭子采样。3.、棉拭子采样时，培养皿在接种前于37摄氏度温箱中烤30分钟。4.、层流洁净手术室的采样时间：消毒后10分钟之内（各类洁净用房作为静态实测数据），手术室手术结束后和各类洁净用房的上午10时。5、.层流洁净手术室地面、墙面与物体表面动、静态染菌密度应符合环境污染控制指标的要求。二、手卫生监测大量文献表明，手卫生是减少医院感染最简单、最有效、最经济的方法。医务人员每日坚持高质量的洗手消毒可使医院感染发生率减低25%50%；手卫生是预防和控制医院感染散发和
4、流行爆发的重要措施，是具有很高效益的医院感染控制措施。1、采样时间常规监测在洗手后从事诊断操作前；特殊监测随时采样。2、监测频度一般情况下每季度监测一次。当发生医院感染流行，高度怀疑或确定于医务人员手的污染有关时，应及时进行监测。3、采样方法手的采样有直接压印法、棉拭子涂抹法和洗脱法。棉拭子涂抹法 被检人5指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30平方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子头投入10mL含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。4、注意事项1. 对化学因子的效果监测。，样液应为含经鉴定合格的中和
5、剂的洗脱液。若对非化学因子消毒效果监测，则不必加中和剂。2. 所采样本应及时检测，试问下存放不得超过2小时；4摄氏度冰箱存放不得超过4小时。3. 直接压印法操作较为简单，对手上细菌捕获率比较高，但此方法在擦杨是按下手印有时用力过度会使琼脂下陷，影响细菌计数。棉拭子涂抹法一次采样对受伤细菌捕获率较低，所采样的细菌数往往小雨实际带菌数，应增加涂抹的次数，但如此会增加操作的复杂性，使可变因素增加。所以，应进一步研究统一手部细菌采样方法，是消毒效果监测更科学、更准确。4. 棉拭子采样时，培养皿在接种前于37摄氏度温箱中烤30分钟。5. 层流洁净手术室每次抽检人数不少于3人。三、空气卫生学监测空气卫生学
6、监测必须目的明确，若为一般微生物学监测，可在一定时期内定期、定点进行空气采样，并注意选点的代表性。若为流行病学调查，则需要进行试验设计，选择集中指标菌，做细菌培养监测，可采用选择性培养基。如铜绿假单胞菌可采用mac培养基或乙酰胺选择培养基；格兰阴性肠道菌可用中国蓝培养基等。1、采样时间在消毒处理后、操作前进行采样。采样前应关好门窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。2、采样方法根据采样原理分为平板暴露法、固体撞击法、液体冲击法、滤过法。日常监测中常用的采样方法以前两者为主。1. 平板暴露法（1）.布点方法：室内面积30平方米设四角及中央共5点，四角的布点位置距墙壁1m处;室内面积=30
7、平方米设内、中、外3点，内、外点的布点位置距墙壁1m处。（2）采样方法：将普通营养琼脂平板或血平板（直径9cm）放在室内各采样点处，采样高度距地面1.5m，内外及四角距墙1m，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露五分钟，盖好立即送检。环境类别范围物体表面消毒合格标准值菌落总数(CFU/平方厘米)手卫生合格标准值菌落总数(CFU/平方厘米)空气消毒合格标准值菌落总数(CFU/立方米)1类层流洁净手术室、层流洁净病房=5=5=102类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌室、烧伤病房、重症监护病房=5=5=2003类儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病室和房间=10=10=5004类传染病科及病房=15=15
