《唾液淀粉酶最适pH值的测定实验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《唾液淀粉酶最适pH值的测定实验（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验目的：掌握精测唾液淀粉酶最适pH值的方法，熟悉缓冲溶液的配置，722分光 光度计的使用。首先配置缓冲溶液，然后获取唾液，稀释唾液，唾液稀释倍数的选取， 淀粉的分解，吸光度的测量，最后记录数据，作图。结果测得pH值在6.08.0范围内 并且随着pH的增大先减小后增大，pH=6.8左右，吸光度值最低。分析pH = 6.8左右， 酶的活性最大1，淀粉被分解的最多，剩余底物的量最少， A 值最小，过酸或过碱均会抑制酶的活性，使 之分解的底物减少， A 值增大。实验原理：酶催化活性最高时，反应体系的pH值称为酶的最适pH值2.碘液与淀粉 及其不同程度的水解产物反应呈现不同颜色，即：淀粉（蓝色）紫色糊
2、精（紫色） 红 色糊精（红色）麦芽糖及少量葡萄糖（黄色）。 3 利用朗伯比尔定律4,用分光光度计测量出各溶 液在660nm处的吸光度A,从而间接测出唾液淀粉酶的最适pH值仪器材料和试剂药品：仪器材料：1. 白瓷板、中试管、试管架、毛刷、吸耳球、玻璃笔、小烧杯、坐标纸、 漱口水2. 37 C 恒温水浴箱、分光光度计、沸水浴3. 0.1ml、0.5 ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml 刻度吸管、胶头滴管试剂药品：1. 0.02%淀粉溶液2. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶 液 3. 碘液、水实验步骤：1、缓冲液的配置：根据下表5,配置各个pH值的缓
3、冲溶液各10ml pH 值6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 磷酸氢二钠 12.3 18.5 26.5 37.5 49.0 61.0 72.0 81.0 87.0 91.5 94.7 磷酸二氢钠 87.7 81.5 73.5 62.5 51.0 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.32、唾液的获取： 6蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头. 轻启双唇，将下嘴唇搁在烧杯 边缘，让唾液自然流入试管中.3、唾液的稀释：取10支试管，分别编上号 0009管号0 123456789唾液(ml)0.10.10.10.10.1
4、0.1 0.10.10.1 0.1蒸馏水(ml) 2.04.06.08.010.012.0 14.016.018.0 20.04、唾液稀释倍数的选取另取10支试管，分别编上09号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入lml的0.02%的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒 温水浴5分钟后取出，滴加23碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一 支，记录稀释倍数。123456789 1011 120.02%淀粉溶液(ml)111 11 1 1 11 11 12ml 缓冲溶液 pH6.86.06.2 6.46.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.67.88.0（保温 10min） C37 摄氏度稀释唾液(ml)111 1 15)测量pH：取12支试管,管号分别标上号 112，按下表操作以蒸馏水调零，用分光光度计测出各试管中溶液的吸光度A值，做好记录。以pH值为横坐标， 吸光度A为纵坐标，在坐标纸上作出平滑曲线，取曲线最低点对应的pH值，即为唾液淀粉酶的最 适 pH 值。广西医科大学生化实验
