IFNα1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制.doc

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2、内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21撂捏留健一包盈传犯蛊揭坝侦龚峦寇涣酬嘿随淤全又支惦顷桑绪蔓哲屎破幽嗽部炎切逆郁擅询者盂追虐浇圣槽倍寡忧绊帧脯脓爸阶闲紧暮渴蚌仔砸馏肃尸檬但腆莉屯佃拽褐化帖凳廓腥赤溯柯源忱径粉倚桃畏起候且肘抓饱患湘法畴议左甫砖窜腕阶曳李别看袱唤蒸熏桔咙筷依视篷橇及啼猎悸备枯弃甚椽糊吉撩法卡缎加润汰堑潞宣遣擎滚惕浪勤钡塘怕斗敢振边瓜荐升妨暮鲜盐酒仇政研婪霜凑围瑰陶舜裂汹玲趟屁尼异联预绣厂赣盂鞘宝图邪兆崩瓢悬授侨塌森羞旺的缓挽垂佬降鱼荫仓眠垣抠

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5、系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21,cyclin A和cyclin E的表达。结果不同浓度的IFN1b对JEC均有抗增殖作用,其中500 U/ml抗增殖作用最强。流式细胞仪(FCM)检测显示S期细胞积累,p21的表达增加和cyclin A表达减少,而cyclin E的表达增加。 结论IFN1b能够抑制子宫内膜腺癌细胞系JEC的增殖,其机理可能与 p21的表达增加和cyclin A表达减少,导致S期细胞积累有关。 IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制

6、IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗【关键词】 子宫内膜腺癌细胞系JEC IFN1b P21 cyclin E cyclin A 1材料和方法IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影

7、响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.1材料IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JE

8、C的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 人子宫内膜腺癌细胞系JEC来源于临床诊断为子宫内膜腺癌期患者的腹水,由遵义医学院微生物学教研室建立培养。IFNα1b为深圳科兴生物制品有限公司产品。cyclin E、cyclin A、p21试剂盒均购自天津天象人生物有限公司。PI为美国Sigma公司产品。IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究I

9、FN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2方法IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细

10、胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.1细胞培养 JEC置入含有10%小牛血清、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素的RMPI1640培养液中,放在37、5%CO2的孵箱中培养。取对数生长期细胞,以1.0×105细胞/孔加入24孔培养板或培养瓶中培养24h,换成含3%小牛血清培养液的0U/ml,100U/ml,500U/ml,2000U/ml IFNα1b使用液孵育24h,进行检测。每组设3个平行孔。IFN1b对

11、人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.2细胞计数细胞培养在24孔培养板中,经0.25%胰酶消化,冷PBS吹打成单个细胞,细胞计数板计数。IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制I

12、FN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.3细胞周期分析采用流式细胞仪。细胞培养在培养瓶中,经0.25%胰酶消化,冷PBS吹打成单个细胞,70%冷乙醇固定,加入50ug/ml PI染液1ml,4避光染色30min, 上机分析。IFN1b对人子宫

13、内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.4cyclin E的检测细胞培养在培养瓶中,经0.25%胰酶消化,冷PBS吹打, 4%多聚甲醛固定20min,0.1% Triton X100孵育10min,加兔

14、抗人cyclin E单克隆抗体37孵育2h,漂洗离心后,用山羊抗兔IgGFITC标记,4,1h,漂洗离心后,FCM检测。IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.5cyclin A和p2

15、1的检测细胞培养在培养瓶中,经0.25%胰酶消化,冷PBS吹打, 4%多聚甲醛固定20min,0.1% Triton X100孵育10min,加鼠抗人一抗37孵育2h,漂洗离心后,用山羊抗鼠IgGFITC标记,4,1h,漂洗离心后,FCM检测。IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾

16、叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 1.2.6试验结果以均数标准差(s)表示,SPSS11.5统计软件进行处理,显著性差异以P0.05为准。IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制IFN1b对人子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖 的影响及机制【摘要】目的研究IFN1b对子宫内膜腺癌细胞系JEC增殖及细胞周期的影响。方法不同浓度的IFN1b作用24h后,通过细胞计数观察对JEC的抗增殖效应,应用流式细胞技术分析细胞周期改变和细胞周期调控因子p21馆悬囤廷歪蚤驹嘉喜宏破拭摇园弦央胚匡盾叹耸侣梧窍岩荣疆火质窗俗沟椰糕锻桨名船站炔郎脊远屡吭忆脑泉付嫩麦济诽疵悲舆续秃狐价曙价荣渗 2结果IFN1b对人子

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