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1、专题2课题3分解纤维素的微生物的分离（学案）【复习目标】1能简述纤维素酶的种类及作用。2说出刚果红染色法及其原理。 3能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。【课时安排】 一课时【复习过程】 活动一、寻根问底 探究之旅【探究点一】纤维素与纤维素酶(1)纤维素是一种由_首尾相连而成的_化合物，是含量最丰富的_类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中_是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生_ _。(2)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_、_和_，前两种酶使纤维素分解成_，第三种酶将_分解成葡萄
2、糖。思考： 构成纤维素和纤维素酶的单体分别是 和 。【探究点二】纤维素分解菌的筛选(1)筛选纤维素分解菌的方法是_法。该方法可以通过_反应直接筛选。(2)筛选原理：刚果红是一种_，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成_，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被_分解后，_ _无法形成，出现以_为中心的_，我们可以通过_ _来筛选纤维素分解菌。思考：纤维素分解菌的代谢类型 【探究点三】分离分解纤维素的微生物的实验设计1土壤取样采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。根据生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中_的含量相对提高，
3、因此，从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。2选择培养(1)目的：增加纤维素分解菌的_，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。(2)操作方法：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在_上，在一定温度下振荡培养12 d，直至培养液变_。也可重复选择培养。(3)纤维素分解菌选择培养基属于_培养基，原因是_。培养基选择作用机制是以_为唯一碳源，只有_才能生存。若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是_。3梯度稀释:依次将培养液稀释101107倍。4将样品涂布到_纤维素分解菌的培养基上。常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养_，再加入_进
4、行颜色反应，另一种是在_时就加入刚果红。挑选产生_的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。课题延伸1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_发酵和_发酵。2纤维素酶测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_含量进行定量测定。思考： 人体内环境中是否含有纤维素？血液中的葡萄糖可来源于纤维素的水解吗？ 活动二、能力提升 破茧之旅【突破一】两种刚果红染色法比较比较项目操作方法优点缺点方法一先培养 再加入 显示出的颜色反应基本上是 的作用操作繁琐；刚果红会使菌落之间发生 方法二 时就加入 操作 ，不存在菌落混杂问题产生 的微生物也产生模糊透明圈；有些微生物能降解 ，形成明显的透明圈思考：方法一中NaCl的作用 。【突破三】纤维素分解菌与尿素分解菌的分离及鉴定比较尿素分解菌的分离与鉴定纤维素分解菌的分离与鉴定分离条件 作为唯一氮源 作为主要碳源鉴定方法培养基中加入 ，变 在以纤维素为主要碳源的培养基上，利用 法，出现 鉴定原理分解尿素的微生物合成 ，将尿素分解产生氨，使PH ，加入酚红变红色分解纤维素的微生物产生 ，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素-刚果红复合物降解而出现 步骤土壤取样制备培养基样品梯度稀释涂布平板培养观察进一步鉴定土壤取样制备培养基 梯度稀释涂布培养 挑选菌落进一步鉴定3
