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1、武汉市光谷第二高级中学2014届高三第一轮复习专题二 微生物的培养与应用1.（2011年全国理综）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近
2、进行，以避免周围环境中微生物的污染。2.（2012浙江自选模块）幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请回答下列问题。（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有_，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_色环带。（2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭菌。A高压蒸汽 B紫外灯照射 C70%酒精浸泡D过滤（3）步骤X表示_。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_菌落。（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在_中。若不倒置培养，将导致
3、_。（5）临床上用 14呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将 14标记的_分解为NH3和 14。CO2CC3.生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_、_方法从油料作物中提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_，培养基灭菌采用的最适方法是_法。(3)测定培养液中微生物数量，可选用_法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产
4、成本，可利用_技术使脂肪酶能够重复使用。(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_技术。4.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般先要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。实验步骤如下：A制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液：B为了得到更加准确的结果，你选用_(填“稀释混合平板法”或“稀释涂布平板法”)接种样品；C适宜温度下培养。结果分析：(1)测定大肠杆菌数，再对应稀释倍数为106的培养基，得到以下几种统计结果，其中正确可信的是_A一个平板，统计的菌落数是23B两个平板，统计的菌落数
5、是22和26，取平均值24C三个平板，统计的菌落数是21、5和52，取平均值26D四个平板，统计的菌落数是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(0.2mL)_。(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量比测得的数量_，因为_。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_5、有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和作用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微
6、量元素配制的培养基，成功的筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。 (1)培养基中加入的化合物A是_，为微生物的生长提供_，这种培养基属于_培养基。 (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入_。 (3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_，操作时采用_灭菌的方法；还可用_的方法接种。 (4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是 _。 6、纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题： （1）在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划
7、线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是_。 （2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用_染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于（ ）内。 A. B. C. D. （3）乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是_，该同学采用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目_，原因是_。 （4）丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了保证抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加_ 。若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照_。7.苯
8、酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。请回答下列问题：(1)中培养目的菌株的选择培养基中应加入_作为碳源，中不同浓度碳源的培养基_(A影响；B不影响)细菌的数量，如果要测定中活细菌数量，常采用_法。(2)为对照，微生物在中不生长，在中生长，与培养基的主要区别在于_；使用_法可以在上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？_。(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？_。(4)实验过程中如何防止其它微生物的污染？_。1
