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1、细胞外基质(ECM )解决方案-附参考文献多细胞有机体中，细胞周围由多种大分子组成的复杂网络，称作细胞外基质。细胞外基质主要由 5 类物质组成，即胶原蛋白、非胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖与氨基聚糖，其在上皮 或内皮细胞的基底部者为基底膜，而在细胞间黏附结构者为间质结缔组织。细胞外基质(ECM)的形成需要细胞分泌ECM蛋白，ECM是通过遵循严格的分层组装模式来实现的，该模 式从纤连蛋白丝在细胞表面的沉积开始，这一过程称为原纤维形成( 1)。细胞通过降解和重组机制继续重 塑ECM，在发育，伤口愈合以及某些疾病状态下，ECM的动态特征尤为明显(2)。据估计，包含哺乳动物 ECM或“核心基质”的蛋白质
2、超过300种，而其中不包括大量与ECM相关的蛋白质，细胞通过诸如整合素 (Integrin)和合成癸烷之类的受体与ECM相互作用，从而传导多种信号以调节关键的细胞过程，例如分化， 细胞的增殖，存活和运动等(3)，同时ECM还能结合生长因子，例如VEGF，HGF和BMP，它们被认为会 产生生长因子梯度，从而调节发育模式的形成(4)，许多 ECM 调控的细胞过程是通过肌动蛋白和微管细胞 骨架的重组而实现的(5)。注：文章段落后括号中数字对应文末的参考文献。ECM 组分的异常调节或遗传缺陷通常会导致致病状态。遗传疾病：已显示出几种由ECM基因突变引起的疾病，包括黄斑变性疾病(Fibulin 3)(6
3、),骨关节炎(Asporin) (7)和先天性肌营养不良(Laminins) (8)。指出给定ECM蛋白表达的改变与癌症有关(9)。众所周知， 通过基质金属蛋白酶(MMP)的作用，ECM的降解是癌细胞转移侵袭的先决条件(10)。动脉粥样硬化： 动脉粥样硬化与胶原蛋白斑块的沉积有关(11)。生物医学应用：再生医学和组织工程领域正在利用 ECM 尝试根据给定的细胞类型生成可预测的组织和器官 形成(12,13)。Cytoskeleton 提供了独特的荧光标记和生物素化 Fibronectin， Laminin 系列产品，下面列出了这些产品的几 种应用： 应用 1：体外伪足/足小体侵袭试验(货号： F
4、NR01， FNR02， LMN01， LMN02) Cytoskeleton 的荧光标记 Fibronectin，Laminin 可用于伪足/足小体体外侵袭试验（16）。该检测方法允许对 特定 ECM 组分以及局部细胞侵袭进行高分辨率成像分析，并可用于评估细胞的浸润潜能。应用2：涉及纤连蛋白基质组装的信号传导途径：原纤维形成检测（货号：FNR01, FNR02, FNR03）与其他可以在生理条件下自动聚合的ECM组分不同，Fibronectin的组装是一种依赖细胞的过程。了解FN 组装所涉及的机制以及这些与细胞,纤维化和免疫反应之间的相互作用可能揭示了调控异常组织修复过程 的疗法的未来发展目
5、标。同样,组织工程很大程度上依赖于控制细胞外基质形成的速率和模式的能力。Cytoskeleton荧光标记的Fibronectin可用于检测原纤维形成。荧光纤连蛋白（FNR01和FNR02）该方法涉及通过掺入荧光纤连蛋白来对纤维丝形成进行荧光示踪（17）,通过向细胞培养基中加入TRITC标 记的 Fibronectin（ FNR01）或 HiLyte488 标记的 Fibronectin （ FNR02），可以观察到可溶性 Fibronectin 向细胞 表面不溶纤维丝的转化，掺入的纤连蛋白的水平可以通过荧光显微镜观察和定量（18）。生物素化纤连蛋白底物（FNR03）该方法将生物素化的 Fibr
6、onectin 掺入目标细胞，并定量可溶性（细胞结合）和不溶性（原纤维）纤连蛋白， 该检测方法已成功用于检查 Rho 蛋白在原纤维形成中的作用（19）。应用3：组织工程应用程序（货号：FNR03和LMN03）生物素化的 ECM 蛋白在与链霉亲和素表面结合时可以采用更天然的构象，并且可以导致细胞与 ECM 的结 合增强（20）。荧光纤连蛋白和生物素化纤连蛋白底物产品推荐：产品名称货号Fibronectin （红色荧光，罗丹明）FNR01Fibronectin （绿色荧光，HiLyte488TM）FNR02Fibronec tin （生物素标记）FNR03Laminin （红色荧光，罗丹明）LMN
7、01Laminin （绿色荧光，HiLyte488TM）LMN02Laminin （生物素标记）LMN03参考文献：1.Sottile J. and Hocking D. 2002. Fibronectin polymerization regulates the composition and stability of extracellular matrix fibrils and cell-matrix adhesions. Mol. Biol. Cell. 13, 3546-3559.2. Daley W. et al. 2007. Extracellular matrix dynam
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